高锌对早期断奶仔猪肠黏膜屏障和肠上皮细胞紧密连接蛋白表达的影响

为研究高剂量氧化锌对早期断奶仔猪肠黏膜屏障的影响并探讨其作用机理,选取54头21日龄断奶仔猪按胎次一致、体质量相近和公母各半方法分为3组,每组3个重复,每个重复6头.哺乳组仔猪继续哺乳至35日龄,基础日粮组饲喂基础日粮(110 mg·kg~(-1)锌),高锌组饲喂基础日粮+3 000 mg·kg~(-1)锌(氧化锌).分别于28和35日龄取样测定血浆D-乳酸、内毒素含量和二胺氧化酶(DAO)活性、肠系膜淋巴结细菌移位率以及结肠内容物大肠杆菌数,并分析回肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达.结果显示:与哺乳组相比,断奶仔猪饲喂基础日粮,28日龄时血浆中D-乳酸、内毒素含量和DAO活性显著升高(P<0.05),至35日龄时,肠黏膜仍维持较高的通透性;添加高锌抑制上述3个指标的升高,进而阻止肠黏膜通透性的增加,达到与哺乳组相同的效果;与哺乳组相比,基础日粮组和高锌组在28和35日龄时均存在肠系膜淋巴结细菌移位现象,但是高锌组低于基础日粮组(P>0.05);28日龄时,基础日粮组结肠内容物大肠杆菌数大于哺乳组(P<0.05),与高锌组比较差异不显著(P>0.05),35日龄时各组间差异不显著(P>0.05);与哺乳组相比,仔猪断奶后饲喂基础日粮使Occludin和ZO-1mRNA丰度以及ZO-1的表达下降(P<0.05),高锌组Occludin和ZO-1 mRNA丰度、ZO-1蛋白表达均显著高于基础日粮组(P<0.05).结论:仔猪断奶后肠黏膜通透性增加,肠上皮细胞紧密连接蛋白表达下降;而添加高剂量氧化锌可抑制细菌在肠道黏膜上的黏附,阻止上皮细胞渗透性增加,能保护肠黏膜屏障功能.     

饲粮添加白藜芦醇对断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响

本试验旨在研究白藜芦醇(RSV)对断奶仔猪生长性能和肠道健康的调节作用。试验选取24头遗传背景一致、健康状况良好、胎次和体重接近的21日龄断奶仔猪,随机分为对照组(饲喂基础饲粮)、低RSV组(基础饲粮中添加600mg/kgRSV)和高RSV组(基础饲粮中添加1000mg/kgRSV),每个处理8个重复,每个重复1头猪。预饲期3d,试验期21d。在第22天屠宰并收集所有试验猪的血清与肝脏样品,检测生长性能、肠道形态、肠道屏障与氧化还原平衡相关指标。结果表明:与对照组相比,(1)饲粮添加600mg/kgRSV显著提高断奶仔猪空肠CAT和SOD活性(P 0.05)、空肠ZO-2mRNA表达量(P 0.05)和断奶仔猪ADFI(P 0.05);(2)饲粮添加1000mg/kgRSV显著提高断奶仔猪空肠CAT和SOD活性(P 0.05)、空肠Claudin-1和ZO-2mRNA表达量(P 0.05)、空肠绒毛高度和绒隐比(P 0.05)和仔猪ADFI和ADG(P 0.05)。以上研究表明,饲粮补充600mg/kgRSV显著提高断奶仔猪肠道抗氧化酶活性、促进肠道屏障基因表达,但对肠道形态和生长性能均无显著影响;饲粮补充1000mg/kgRSV不仅显著提高断奶仔猪肠道抗氧化酶活性、促进肠道屏障基因表达,而且改善肠道形态、提高仔猪生长性能。     

微生态制剂与酶制剂联合使用对断奶仔猪生长性能、血液指标和肠黏膜防御屏障相关蛋白表达的影响

试验旨在研究微生态制剂与酶制剂联合使用对断奶仔猪生长性能、血液指标和肠黏膜防御屏障功能的影响。选取180头体重相近、健康状况良好的24 d断奶的"长×大"仔猪,随机分为两组,每组3个重复,每个重复30头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂在基础日粮中添加100 g/t酶制剂+微生态制剂的试验日粮,试验期25 d。结果显示:①与对照组相比,断奶仔猪日粮中添加酶制剂和微生态制剂有提高其平均日增重和平均日采食量,降低料重比的趋势(P0.05);②试验组猪只血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性均显著低于对照组(P0.05),IL-2和TNF-α的含量均显著高于对照组(P0.05),血液抗氧化能力与对照组相比无显著差异(P0.05);③试验组猪只空肠黏膜sIgA的含量显著高于对照组(P0.05);④紧密连接蛋白ZO-1(P0.05)和Occludin(P0.01)在试验组猪只空肠黏膜中的表达量显著高于对照组。综上表明,断奶仔猪日粮中添加100 g/t酶制剂+微生态制剂具有一定改善其生长性能、促进肝脏健康和增强肠黏膜防御屏障功能的作用。     

日粮添加抗菌肽buforin Ⅱ对病毒性腹泻断奶仔猪小肠黏膜屏障和TLR-2信号途径的影响

将15头体质量为(5.42±0.72)kg的21d病毒性腹泻断奶仔猪随机分为3组,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加100mg/kg新霉素和1.0mg/kg抗菌肽buforinⅡ,饲养期10d。每个处理5个重复,每个重复1头仔猪。结果显示,与对照组和新霉素组相比,日粮添加抗菌肽buforinⅡ能显著降低病毒性腹泻断奶仔猪腹泻指数,显著降低血清IgA、IgM和IgG的浓度、空肠黏膜sIgA的浓度(P0.05);显著下调病毒性腹泻断奶仔猪空肠和回肠黏膜TLR-2、PKR和eIF-5A mRNA相对表达丰度(P0.05);显著提高病毒性腹泻断奶仔猪空肠和回肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度、GSH-Px、NOS、SOD、GR和T-AOC浓度(P0.05)以及空肠黏膜occludin蛋白水平(P0.05)。结果表明,日粮抗菌肽buforinⅡ能减轻病毒对断奶仔猪空肠黏膜屏障功能的损伤作用。     

植物多糖对断奶仔猪小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响

旨在探讨断奶仔猪饲粮中单独或联合添加黄芪多糖、牛膝多糖及白术多糖对其小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响。选取256头35日龄的杜长大三元杂交断奶仔猪,随机分为8个组,每组4个重复,每个重复8头猪,采用三因素两水平(2×2×2)试验设计,饲粮中黄芪多糖、白术多糖和牛膝多糖的添加水平均为0,800mg/kg,试验共进行28d。结果显示:植物多糖能显著提高断奶仔猪十二指肠、空肠和回肠的黏膜绒毛高度,提高绒腺比(P0.05),3种多糖联用效果最适。与对照组相比,多糖组断奶仔猪回肠V/C比值显著提高(P0.05),各单一多糖组之间差异不显著(P0.05),3种多糖联合添加与两两添加及单一添加相比显著提高了V/C比值(P0.05)。多糖组断奶仔猪血清中二胺氧化酶(DAO)的活性、血清中内毒素(ET)含量及D-乳糖的含量均显著降低(P0.05),3种多糖联用效果最适。多糖能显著提高断奶仔猪肠道黏膜Occludin、Claudin和ZO-1的基因表达量(P0.05)。单一添加黄芪多糖、白术多糖及牛膝多糖能显著提高断奶仔猪肠道钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)的mRNA相对表达量(P0.05),对葡萄糖转运载体2(GLUT2)mRNA相对表达量有提高的趋势,但差异不显著(P0.05)。多糖两两联用及3种多糖联合添加能显著提高断奶仔猪肠道SGLT1和GLUT2mRNA相对表达量(P0.05)。结果表明,在断奶仔猪饲粮中添加植物多糖可显著改善断奶仔猪肠道黏膜形态结构和肠道的通透性,其机制可能与植物多糖改善断奶仔猪肠黏膜屏障功能作用有关。     

饲粮添加异亮氨酸对轮状病毒攻毒断奶仔猪回肠屏障功能的影响北大核心CSCD

本研究旨在探讨饲粮添加异亮氨酸是否可以缓解轮状病毒(RV)感染对断奶仔猪回肠屏障功能的影响。在细胞试验中,用8 mmol/L的L-异亮氨酸处理IPEC-J2细胞24 h;在动物饲养试验中,选取28头健康的21日龄断奶的"杜×长×大"仔猪,采用2×2双因子设计,即饲粮处理(添加1%L-异亮氨酸饲粮或添加0.68%L-丙氨酸饲粮)和RV攻毒(灌服RV或无菌培养液),RV攻毒于试验第15天早上进行。试验期为18 d。结果表明,L-异亮氨酸处理提高了IPEC-J2细胞中黏液蛋白2(mucin 2)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和闭合蛋白(occludin)的mRNA相对表达量(P<0.05);RV攻毒提高了断奶仔猪平均腹泻指数和血清二胺氧化酶活性(P<0.05),提高了回肠黏膜中RV的非结构蛋白4阳性率,降低了断奶仔猪回肠黏膜中mucin 2、ZO-1和occludin mRNA相对表达量(P<0.05);而饲粮添加异亮氨酸缓解了RV攻毒对断奶仔猪平均腹泻指数、血清二胺氧化酶活性和回肠黏膜mucin 2、ZO-1和occludin mRNA相对表达量的影响(P<0.05),降低了回肠黏膜中RV的非结构蛋白4阳性率。综上所述,在断奶仔猪的饲粮中补充1%异亮氨酸可以预防RV诱导发生的腹泻,而这一作用与其可改善回肠屏障功能有关。     

酪酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道组织形态及肠道通透性的影响

本试验旨在研究酪酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道组织形态及肠道通透性的影响。试验选用21日龄断奶、体重(5.35±1.33)kg的"杜×长×大"三元杂交仔猪18头,随机分为3组,分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+500 mg/kg酪酸梭菌(酪酸梭菌组)、基础饲粮+3 000 mg/kg氧化锌(氧化锌组),每组6个重复,每个重复1头猪,试验期14 d。结果表明:1)各组断奶仔猪平均日增重与料重比无显著差异(P0.05);酪酸梭菌组和氧化锌组仔猪腹泻率与对照组相比显著降低(P0.05)。2)与对照组相比,酪酸梭菌组和氧化锌组断奶仔猪回肠隐窝深度显著降低(P0.05),绒腺比极显著升高(P0.01)。3)酪酸梭菌组和氧化锌组断奶仔猪第14天血清内毒素与D-乳酸浓度均显著低于对照组(P0.05),酪酸梭菌组与氧化锌组之间无显著差异(P0.05)。4)与对照组相比,酪酸梭菌组和氧化锌组断奶仔猪回肠和结肠咬合蛋白(Occludin)mRNA表达量显著升高(P0.05);与氧化锌组相比,酪酸梭菌组断奶仔猪回肠和结肠闭合小环蛋白-1(ZO-1)、Occludin mRNA表达量无显著差异(P0.05)。综合以上结果,断奶仔猪饲粮中添加酪酸梭菌可以显著降低断奶仔猪腹泻率,改善肠黏膜形态,降低肠黏膜通透性,上调紧密连接蛋白的表达量,可达到与添加氧化锌相同的效果。     

纳米氧化锌对断奶仔猪生长性能和肠黏膜屏障的影响

本文旨在研究纳米氧化锌对断奶仔猪生长性能和肠黏膜屏障的影响及其机理。选用96头平均体重为(5.7±0.2)kg的21日龄"杜×长×大"断奶仔猪,随机分成3组:1)对照组,饲喂基础饲粮;2)氧化锌组,饲喂在基础饲粮中添加3 000 mg/kg锌(氧化锌)的试验饲粮;3)纳米氧化锌组,饲喂在基础饲粮中添加300 mg/kg锌(纳米氧化锌)的试验饲粮。每组4个重复,每个重复8头仔猪,试验期14 d。结果表明:1)与对照组相比,纳米氧化锌组断奶仔猪平均日增重提高了7.26%(P<0.05),腹泻率降低了70.82%(P<0.05),但与氧化锌组差异不显著(P>0.05)。2)与对照组相比,纳米氧化锌组仔猪28和35日龄绒毛高度分别提高了12.64%和10.80%(P<0.05);28日龄隐窝深度降低了15.42%(P<0.05);28和35日龄绒毛高度/隐窝深度分别提高了33.61%和17.11%(P<0.05);28和35日龄血浆D-乳酸含量分别降低了28.97%和20.23%(P<0.05),二胺氧化酶活性分别降低了28.61%和24.92%(P<0.05)。氧化锌组和纳米氧化锌组之间各指标差异不显著(P>0.05)。结果提示,断奶仔猪饲粮中添加300 mg/kg锌(纳米氧化锌)可提高平均日增重,降低腹泻率,改善肠黏膜形态,降低肠黏膜通透性,其效果与添加3 000 mg/kg锌(氧化锌)相当。     

高锌日粮对断奶仔猪肠道黏膜免疫及黏膜上皮形态的影响

本试验旨在研究长期饲喂不同锌源的高锌日粮对断奶应激仔猪肠道黏膜免疫及黏膜上皮形态的影响。选用临床检查健康的(26±2)日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪60头,按体质量和性别随机分成3组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+3 000 mg.kg-1氧化锌和基础日粮+500 mg.kg-1蛋氨酸锌。试验期70 d。于试验结束时,每组选取5头仔猪放血致死,分别取十二指肠近端、空肠近端1/4处、空肠远端1/4处和回肠中段,用于测定肠黏膜绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度,小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞数量,粘液层厚度及肠道粘液中IgA的含量。结果显示,在断奶后0～42 d,添加高锌日粮组仔猪的体重和日增重显著或极显著高于对照组仔猪(P0.05或P0.01),而在断奶后42～70 d,对照组仔猪日增重显著高于添加高锌日粮组仔猪(P0.05);两高锌组仔猪小肠黏膜结构有明显的损伤,表现为绒毛高度下降,隐窝变深,肠黏膜上皮细胞萎缩,肠道粘液层厚度变薄;上皮间淋巴细胞数、杯状细胞数和肠道黏液中IgA水平都显著或极显著低于对照组(P0.05或P0.01)。高锌日粮长期暴露引起断奶仔猪锌中毒,改变了肠道黏膜上皮结构的完整性,并降低了仔猪生长性能及肠道黏膜免疫功能。     

α-酮戊二酸对脂多糖应激断奶仔猪空肠黏膜蛋白合成和抗氧化能力的影响

试验研究日粮添加1%α-酮戊二酸(AKG)对多次脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪空肠黏膜蛋白、RNA、DNA浓度和抗氧化能力的影响。选用24头健康杜洛克×长白×大白(7.25±0.23)kg断奶仔猪,随机分成3个处理,每个处理8个重复,公、母各半。对照组和LPS组饲喂基础日粮+1%淀粉、AKG组饲喂基础日粮+1%AKG,在试验第10、12、14、16天分别在LPS组和AKG组仔猪的腹膜注射80μg/kgBW脂多糖,对照组注射相应剂量的灭菌生理盐水。第17天清晨屠宰空腹仔猪,刮取空肠黏膜待测。结果表明:多次LPS刺激显著降低断奶仔猪空肠黏膜RNA/DNA、蛋白/DNA、蛋白质浓度及SOD活性(P<0.05),显著升高MDA含量(P<0.05),而日粮中添加AKG能在一定程度上抑制LPS刺激引起的空肠黏膜蛋白合成减少和抗氧化能力降低,维持肠道屏障完整性。