长链非编码RNA(H19)在小鼠骨骼肌生长发育过程中的表达

本试验旨在研究长链非编码RNA(H19)在骨骼肌发育和损伤修复过程中表达量的变化,为研究H19在小鼠骨骼肌发育中的作用机制奠定基础。以C2C12细胞系和ICR小鼠为试验素材,通过生物信息学方法分析H19的非编码特性和在物种间的低保守性,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测H19在C2C12细胞分化,ICR小鼠骨骼肌发育不同时期和成体小鼠骨骼肌损伤修复过程中表达量的动态变化。结果表明,H19在小鼠骨骼肌中的表达量随出生后日龄的增长逐渐下降;在诱导C2C12细胞分化过程中,H19的表达量先是逐渐升高,进而在较高水平维持不变;在肌肉损伤模型中修复的第4~6天,H19的表达量维持在较高水平。鉴于上述H19在C2C12细胞分化和肌损伤修复过程中的表达特点,推断H19可能具有促进肌纤维形成和成体骨骼肌损伤后修复的功能。     

黄芪对雏鸭IL-2基因表达的影响

为研究黄芪对白介素2基因表达的影响，将20只雏鸭随机分成对照组和试验组，试验组雏鸭用黄芪拌料饲喂，对照组雏鸭不用黄芪拌料饲喂，15d后处死，提取脾组织总RNA，通过实时荧光定量RT—PCR测定两组雏鸭IL-2基因表达情况。结果表明，实验组雏鸭IL-2基因表达量是对照组IL-2基因表达量的7．892倍。因此，黄芪能够提高雏鸭体内IL-2基因的表达，提高机体免疫力，从而增强雏鸭的抗病能力。     

LPS诱导的肉鸡肺脏损伤中AQP1、AQP5表达变化研究

为了研究和探讨肺脏损伤肉鸡肺脏中的水转运机制,对防治肉鸡肺脏损伤提供理论基础,试验采用气管滴注LPS(Escherichia coli O_(55):B_5,sigma)的方法诱导肺脏损伤,对15日龄肉鸡肺脏湿干重比(W/D)、病理学改变、AQP1和AQP5的表达变化进行研究。结果表明:LPS组肺脏湿干重比上升;H.E.染色观察肺脏组织可见炎性浸润和水肿;免疫组化结果显示,AQP1主要在正常的呼吸毛细管上皮和血管内皮中表达,AQP5主要在三级支气管上皮细胞中表达;H-Score评分结果显示,AQP1、AQP5的表达量均减少。说明LPS导致肉鸡肺脏损伤,引发肺水肿后肺脏内AQP1、AQP5的表达量下降,佐证AQP1、AQP5在肉鸡肺脏水转运中有重要作用。     

4种禽源病毒感染CEF后β-catenin基因的动态表达

旨在建立鸡β连环蛋白(β-catenin)m RNA的实时荧光定量RT-PCR方法,检测NDV、AIV、REV、ALV四种病毒感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后β-catenin m RNA的动态表达水平;运用建立的Rrt-PCR方法,检测NDV F48E9、AIV H5N1、ALV和REV病毒感染后β-catenin m RNA的动态表达水平。研究结果:(1)NDV F48E9感染CEF后3 h诱导β-catenin m RNA的表达,而在感染后6 h至24 h抑制β-catenin m RNA的表达。其中接毒后的9、24 h,接毒组β-catenin m RNA的表达量分别是对照组的0.22倍和0.25倍,差异显著(P0.05);(2)AIV H5N1感染CEF后3、6 h,接毒组β-catenin m RNA的表达水平高于对照组,其中3 h时接毒组是对照组的3.14倍,差异极显著(P0.01);在感染后9、12、24 h抑制β-catenin m RNA的表达,接毒组分别是对照组的0.5、0.03、0.3倍,其中12 h时差异极显著(P0.01);(3)REV感染CEF后诱导β-catenin m RNA表达,接毒后24 h、3、5、7、8 d,接毒组分别是对照组的2.38、2.71、2.05、2.64、2.79倍,差异均显著(P0.05);(4)ALV感染CEF后诱导β-catenin m RNA的表达,其中接毒后3、5、7 d时,接毒组细胞β-catenin m RNA的表达水平分别是对照组的6.20、3.11、6.70倍,3、7 d时差异极显著(P0.01),5 d时差异显著(P0.05)。研究结论:β-catenin参与这四种病毒的感染应答,且表达模式不同。β-catenin动态表达为研究病毒感染致病与机体相互作用的分子机制提供了有价值的参考。     

添食不同含氮物质对家蚕产丝量及丝素蛋白基因表达的影响

给家蚕5龄幼虫分别添食大豆蛋白、NH4Cl和尿素后,调查家蚕产丝量的变化,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测蚕体丝腺组织中丝素重链基因(fib H)的表达变化,探究适合用于提高家蚕产丝量的含氮物质。5龄起蚕连续6 d按照0.45 mg/(头·d)的剂量添食尿素后,茧层率比对照组增加15.7%,且幼虫的体质量及丝腺体积都比对照组有所增加;5龄幼虫添食大豆蛋白和NH4Cl后茧层率无明显增加。qRT-PCR检测5龄起蚕按照上述剂量添食尿素120 h后,后部丝腺中fib H的表达量比对照组增加了1.5倍。上述结果再次证实了家蚕5龄幼虫添食尿素后可以增加产丝量,并且表明尿素可以促进蚕体后部丝腺中fib H基因的表达。     

H19基因的单核苷酸多态性与猪生长性状的相关分析及其时空表达

本试验为了了解H19基因在猪骨骼肌生长发育过程中的作用,首先采用实时荧光定量PCR的技术检测了H19的组织分布以及在骨骼肌生长发育中的动态表达。然后通过混合池测序检测了H19外显子和内含子区的单核苷酸多态位点(SNP),利用质谱在大白猪群体中进行SNPs位点基因型鉴定,并进行标记性状关联分析。H19基因在大白猪的心、肝、脾、肺、肾、小肠、胃、腿肌、背肌中均有表达,且在骨骼肌(腿肌、背肌)和肾中高表达。在骨骼肌发育中,H19主要是在胚胎期和出生后40d之前有较高表达量,并且在胚胎期105d达到最大值。对7个SNPs位点进行相关性分析,结果显示,RS15位点与达100kg体重的校正日龄显著相关(P=0.046 20.05),RS20位点与100kg的校正眼肌面积显著相关(P=0.009 50.01)。RS15与RS16紧密连锁,其单倍型与校正背膘厚显著相关(P=0.049 80.05);RS17与RS18单倍型与达100kg的校正眼肌面积显著相关(P=0.037 10.05)。结果表明H19基因参与猪骨骼肌发育调控,是猪产肉性状的候选基因。     

内固定治疗犬股骨远端骨折体会

骨折是指由于外力作用,使骨的完整性或连续性遭受机械破坏,骨折的同时伴有周围软组织不同程度的损伤,多因车祸、高处摔落以及外力打击引起。股骨骨折在小动物临床上发病率最高,约占全部骨折的26%,常见的有股骨颈、大转子、股骨干和股骨远端骨折,因其位置特殊,临床多采用内固定进行治疗。笔者自2006年1月至2007年2月,接诊骨折病例48起,股骨远端骨折12起,占股骨骨折的25%,其中内固定治疗2起,效果较好,现报道如下。1发病情况及临床诊断典型病例1:斑点犬,2岁,体重15kg。来我院就诊时,发病已2月余,现左后肢中度支跛,驻立视诊可见患肢负重减轻,膝关节肿大,触诊疼痛敏感,X光摄片检查:左侧股骨远端闭合性全骨折,未见有明显骨痂形成。确诊后第2天手术。典型病例2:挪威那犬,8月龄,体重18kg。被出租车撞伤后,立即来我院就诊。右后肢不敢负重,疼痛明显,股骨远端迅速肿胀,运步视诊典型支跛症状,触诊肿胀部位有骨摩擦音,敏感疼痛。X线摄片检查:右侧股骨远端闭合性全骨折。确诊后第5天手术。2术前准备术前禁食24h,禁水12h。术前静脉输注5%糖盐水、维生素C、肌苷、能量、止血敏等,皮下注射贝多灵(林可霉素与大观霉素复合制剂)。...     

H5Rel与H5N28两种禽流感疫苗对肉番鸭免疫效果对此试验

用H5Rel与H5N28两种疫苗在肉番鸭体内的免疫效果对比研究.首免后35d,两组抗体效价没有明显差异.二免后19d,H5Rel组抗体效价提高0.9 log2,至免后25d效价达到最高峰值8.4 log2,比H5N28组效价高2.9 log2.以后相对稳定,至二免后60d抗体效价H5Rel组平均维持在7.3 log2,H5N28组平均为5 log2.     

芪贞增免颗粒对保育猪免疫提升的功效

目的:探讨芪贞增免颗粒(旭免舒)在提升保育猪免疫能力方面的效果。方法:选择50头保育猪为研究对象,25头采用黄芪多糖颗粒治疗(对照组),其他25头予以芪贞增免颗粒(实验组),采用检测保育猪蓝耳病、猪瘟抗体的形式,评估两组用药效果。结果:免疫后第10d、20d时,实验组(芪贞增免颗粒)保育猪PRRS抗体S/P值>0.4,明显高于对照组(黄芪多糖),差异有统计学意义(P<0.05);但免疫后第30d,两组保育猪PRRS抗体S/P值差异不显著(P>0.05).结论:芪贞增免颗粒,有利于提升免疫后第10d、20d的免疫效果,具有一定推广价值。     

运输应激对大鼠空肠形态与热休克蛋白家族mRNA表达的影响

本试验以SD大鼠为试验动物,利用摇床模拟公路运输过程中的摇晃、高温、噪音、饥渴、拥挤、碰撞6个主要的刺激因子,构建了大鼠运输应激模型.应激条件为60 r/min,35℃,每天应激2h.体重为270±20 g,20只SD大鼠被随机均分为4组:对照组、应激1d组、应激2d组、应激3d组.在应激结束后,应激组大鼠体温均显著升高(P＜0.05),体重显著下降(P＜0.05),血清中皮质醇含量显著升高(P＜0.05).试验结果与实际公路运输结果一致,表明运输应激模型构建成立.形态学研究显示,运输应激造成了大鼠空肠组织损伤,与对照组相比从应激第1天到应激第3天空肠绒毛脱落逐渐加剧.荧光定量PCR研究结果则显示,Hsp27,Hsp70和Hsp90 mRNA的表达量也剧烈的升高.本试验研究表明,随着应激时间增加,大鼠空肠损伤逐渐加重,且Hsps mRNA表达量升高,表明Hsps的表达量与运输应激造成空肠的损伤严重程度有关.运输应激后表达量急剧升高的保护性分子Hsps,是动物抵抗运输应激的重要机制之一.     

骨折对大鼠凝血指标的影响

Wistar大鼠160只,随机分为8组,正常对照组、6h组、12h组、24 h组、3d组、5d组、7d组、14d组,每组各20只,除对照组外其他各组大鼠均手术使其一侧后肢股骨粉碎性骨折,各时段组大鼠采血测凝血指标:凝血酶原时间(PT)、凝血活酶时间(TT)、纤维蛋白原(FBG)后取患肢血管做病理学检查.两项检查结果表明,大鼠粉碎性骨折后,12 h至3d内的时间段是肢体深静脉血栓(DVT)形成的关键期,此后进入静脉血栓脱落导致肺栓塞的危险期,在骨折前或骨折后的前3d采取积极措施预防DVT可取得较理想的效果.动态监测创伤骨折大鼠凝血指标的变化,对早期预防创伤后深静脉血栓形成具有诊断价值.     

玉屏风散对小鼠β防御素-2基因表达的影响

研究玉屏风散益气固表、提高机体对环境病因抵抗力的机理。实验组6只小鼠以玉屏风散水煎液灌胃10 d,对照组6只小鼠给予同体积生理盐水,处死动物后提取肺组织总RNA,通过实时荧光定量PCR测定小鼠在灌服玉屏风散水煎液后β防御素-2基因表达水平。结果实验组小鼠β防御素-2基因的相对表达量是对照组的9.327倍。表明玉屏风散增强机体抵抗力与其可上调β防御素-2基因的表达从而提高机体非特异性免疫力有关。     

益生菌猪发酵剂发微生物酵饲料饲喂断奶仔猪和育肥猪的效果研究

目的:研究微生物益生菌猪发酵剂发酵饲料饲喂断奶仔猪和育肥猪的效果.方法选择30头奶仔猪和30头育肥猪作为研究对象,将两种猪随机抽取其中的15头共30头作为实验组,另外30头作为对照组;对照组断奶仔猪喂仔猪基础日粮,对照组育肥猪饲喂育肥猪基础日粮;实验组断奶仔猪和育肥猪喂微生物益生菌猪发酵剂发酵饲料饲,比较两组猪的生长情况.结果:对照组每头断奶仔猪每日增重约390g,40d后增重约15.60kg,实验组每头断奶仔猪每日增重520g,40d后增重约20.80kg;实验组每头断奶仔猪比对照组每头断奶仔猪40d后增重高出5.20kg.实验组断奶仔猪出现轻度拉稀,对照组断奶仔猪出现较为严重的腹泻.对照组每头育肥猪每日增重约680g,40d后增重约27.20kg实验组每头育肥猪每日增重约840g,40d后增重约33.60kg;实验组每头育肥猪比对照组每头育肥猪40d后增重高出6.20g.实验组育肥猪出现轻度拉稀,对照组育肥猪出现较为严重的腹泻.结论:微生物益生菌猪发酵剂发酵饲料饲喂断奶仔猪和育肥猪的效果良好,能够促进断奶仔猪和育肥猪更加快速健康地发育、生长,增重速度更快并改善腹泻情况.     

一例藏獒股骨粉碎性骨折的内固定手术报告

<正>1发病与诊断哈力油(藏獒),铁包金,雌性,9月龄,体重28kg,主人讲述:6月14日深夜开车回家,哈力油突然出现,被撞,凄惨鸣叫,很久不能动弹,后发现右后肢不能着地。2010年6月15日下午到我院就诊,体温38.8℃,左后肢剃毛检查,整个后肢明显肿胀,呈蓝紫色。膝关节上部肌肉收缩变短,股内侧股骨远端骨折断端尖锐处,凸出于皮下。X线拍片检查:左侧股骨粉碎性骨折,共有2个较大的骨碎片,关节未被破坏(见图1)。     

3-甲基-4-硝基酚对大鼠睾丸组织的损伤作用

为从病理学角度探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)的生殖毒性,采用24只SPF雄性SD大鼠随机分为4组,染毒组分为100 mg/kg体重、10 mg/kg体重和1 mg/kg体重三组,连续5 d皮下注射,对照组皮下注射等量的溶剂(PBS+0.05%tween80)。最后一次染毒后24 h,无痛处死大鼠,称取睾丸湿重并计算其指数。将已固定的睾丸组织进行石蜡切片,采用H.E和免疫组化染色的方法观察PNMC对大鼠睾丸的病理损伤及其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果显示各个染毒组与对照组相比较,睾丸大体湿重和睾丸指数明显下降(P0.05或P0.01);H.E染色结果显示各试验组睾丸曲细精管生精细胞均有不同程度的空泡变性兼或坏死;免疫组织化学染色观察发现:各实验组睾丸中Bax蛋白表达量显著高于对照组(P0.01),而Bc1-2蛋白表达量却明显低于对照组(P0.01),Bc1-2/Bax也显著低于对照组(P0.01)。研究结果表明,PNMC不仅可引起雄性大鼠睾丸曲细精管生精细胞变性、坏死,还可促进生殖细胞的大量凋亡。     

犬股骨远端干骺处骨折的内固定术

从2007年10月至2008年5月我院共收治犬股骨远端干骺处骨折11例,笔者采用髓内针配合钢丝8字形固定取得了满意的效果,典型病例报道如下. 1 病例 品种:吉娃犬,年龄:1岁,性别:公,体重:4 kg.主诉:该犬从约2 m高处摔下,当即左后肢不能负重.X线检查可见左后肢股骨远端干骺处骨折.经过手术患犬患肢3 d后可负重,30 d后行走正常.     

犬外伤导致的股骨粉碎性骨折的治疗

<正>(一)基本信息比熊犬,4岁,4.6kg,雄性,未绝育,被汽车撞击后左后肢无法站立、行走,主人带往我院就诊。(二)临床检查患犬精神良好,左后肢不敢着地,触诊左后肢股骨有明显骨摩擦感,T:38.3℃,P:88次/分,R:26次/分。     

鹿角盘不同提取部位对环磷酰胺致小鼠骨质疏松的防治作用

建立了环磷酰胺所致小鼠骨质疏松模型,利用空白对照组和葡萄糖酸钙阳性组做对比,以小鼠免疫器官脏器指数、股骨计量学、骨钙、磷、镁、骨羟脯氨酸含量为指标观察鹿角盘提取物对小鼠免疫功能、骨量的影响.结果:20mg/(kg·d)环磷酰胺可引起小鼠胸腺指数下降(P＜0.01),股骨干重、股骨横径减少(P＜0.01),股骨长减少(P＜0.05),骨钙、羟脯氨酸含量同时下降(P＜0.01),引起小鼠骨丢失;鹿角盘水提物和70％乙醇提取物均可增加小鼠股骨的干重和骨钙的含量,水提物高剂量组和70％乙醇提取物高低、高剂量组使骨羟脯氨酸含量显著提高.结果表明鹿角盘对以低转换型骨丢失为特征的骨质疏松具有一定的预防作用.     

相对定量Real-time PCR分析不同品种鸡胚H-FABP基因表达的差异

选用孵化5d的9只莱芜黑鸡,9只汶上芦花鸡和8只济宁百日鸡胚以及孵化11d的12只莱芜黑鸡,11只汶上芦花鸡和9只济宁百日鸡胚作为研究对象,采用相对定量Real-timePCR的方法,研究心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因在不同品种鸡胚中表达的差异。结果显示检测的3个品种孵化11d的鸡胚中H-FABP基因的表达高于孵化5d的鸡胚。其中莱芜黑鸡的H-FABP基因的表达量变化最小,孵化11d的表达量约为孵化5d的2.64倍;变化最大的是济宁百日鸡,孵化11d的表达量约为孵化5d的4.17倍;汶上芦花鸡H-FABP基因在孵化11d的表达量约为孵化5d表达量的2.96倍。     

热应激条件下猪肠道糖皮质激素受体的表达变化

为探究糖皮质激素受体(GR)在热应激引发猪肠道病变中的作用,本研究将48头2月龄左右的健康猪(15±2 kg)随机分为两组(实验组和对照组),实验组饲养于环境温度为35±1℃的人工气候温室,对照组环境温度为28±3℃,相对湿度均为75%～80%。在热应激的第1 d、7 d、14 d和21 d迫杀受试猪,采集其肠道组织,采用免疫组织化学法和western blot分别检测了GR在不同肠道组织的分布及表达情况。免疫组织化学结果显示,热应激第7 d和第14 d实验组猪十二指肠粘膜层GR表达量显著增高;盲肠和结肠GR表达量在热应激第14 d上调。Western blot结果显示,实验组猪十二指肠和结肠中GR表达量随应激时间延长而增加,在热应激第14 d达到峰值。而盲肠GR表达量较对照组显著下调(p0.05)。本实验表明热应激影响猪肠道GR的表达水平,为进一步阐述GR在热应激诱发猪炎性肠病的作用提供实验依据。