奶牛布鲁氏菌病不同血清学检测方法的比较研究

为了比较布鲁氏菌病不同血清学诊断方法的优缺点,试验采用虎红平板凝集试验(RBT)、快速诊断试纸卡、间接酶联免疫吸附试验(i ELISA)、竞争酶联免疫吸附试验(c ELISA)四种不同的血清学检测方法,同时对河南地区2 545头疑似布鲁氏菌病病牛进行了布鲁氏菌的检测。结果表明:与i ELISA、c ELISA以及快速诊断试纸卡方法相比,RBT法操作简便、成本较低,且阳性检出率较高,但其特异性较低,容易出现假阳性结果;快速诊断试纸卡与i ELISA、c ELISA的阳性检出率、敏感性和特异性相互比较均无显著差异(P0.05)。说明在实际应用中牧场应根据自己的条件与需要选择合适的检测方法。     

牛布鲁氏杆菌病的间接酶联免疫快速检测

本文通过制备布鲁氏杆菌菌壁抗原,建立了牛布鲁氏菌病的间接酶联免疫检测方法,应用虎红平板凝集试验方法、补体结合试验、间接酶联免疫吸附试验方法对145份牛血清进行了布鲁氏菌病的检验,间接酶联免疫吸附试验检出率最高,虎红平板凝集试验与补体结合试验的结果符合率为95．6％,虎红平板凝集试验与间接酶联免疫吸附试验的结果符合率为96．7％,补体结合试验与间接酶联免疫吸附试验的结果符合率为92．7％。结果表明间接酶联免疫吸附试验方法特异性较强,具有检测快速、灵敏、准确等优点。     

奶牛布氏杆菌病的血清学诊断

为了解虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)三种血清学方法在奶牛布氏杆菌病诊断方面的实际应用情况,本试验采集了10份疑似奶牛布氏杆菌病的血清样本,同时采用上述三种血清学诊断方法进行了对比研究。结果显示,RBPT、SAT和ELISA的阳性检出率分别为70%、80%和90%,以ELISA的阳性检出率为最高。因此,具备特异、灵敏、快速等优点的ELISA血清学诊断方法更适合奶牛布氏杆菌病的抗体检测及其研究。     

川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行病学调查

同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%（272/1070）,虎红平板凝集试验检测阳性率为12.7%（136/1070）,而试管凝集试验检测阳性率为9.1%（97/1070）。8个县均发现阳性布鲁氏菌病血清。与间接ELISA相比,虎红平板凝集试验的相对敏感性和特异性分别为50%和100%,而试管凝集试验的相对敏感性和特异性分别为35.7%和100%。布鲁氏菌病在川西北地区广泛存在,血清学方法是检测和监测布鲁氏菌病最常用和最简便的方法,其中间接ELISA方法最为敏感。     

2018-2023年西昌市某奶牛场布鲁氏菌病血清学监测分析

为掌握西昌市某奶牛场布鲁氏菌病流行情况,做好奶牛布鲁氏菌病的防治工作,2018-2023年连续六年对该奶牛场采集血清样本,累计采集2 201份血样,经西昌市动物疫病预防控制中心兽医实验室采用虎红平板凝集试验（RBT）、间接酶联免疫吸附试验（iELISA）进行初筛;运用试管凝集试验（SAT）、竞争酶联免疫吸附试验（c ELISA）进行复核。结果显示,2018-2023年虎红平板凝集试验初筛阳性数分别为5、6、4、8、7、0,初筛阳性率分别为1.5%、1.89%、1.25%、1.96%、1.98%、0;间接酶联免疫吸附试验初筛阳性数分别为4、4、3、8、5、0,初筛阳性率分别为1.20%、1.26%、0.93%、1.96%、1.41%、0;试管凝集（SAT）试验与竞争酶联免疫吸附试验（c ELISA）的复核结果显示,2018、2019年阳性数分别为2和1,阳性数占总群分别为0.60%和0.32%,2020-2023连续四年均为阴性。针对奶牛布鲁氏菌病流行特点及血清学检测结果,制定符合该牛场布鲁氏菌病净化的相应防控措施,以期预防控制奶牛布鲁氏菌病的发生,能够及时发现并淘汰病畜,为奶牛健康生产...     

牛布鲁氏菌A19号疫苗免疫血清几种检测方法的比较

为选择科学适用的牛布鲁氏菌病净化检测方法,对1721份免疫布鲁氏菌A19号疫苗18个月后的牛血清,分别用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)和荧光偏振试验(FPA)5种血清学检测方法,以及环介导等温扩增技术(LAMP)和荧光定量P...     

奶牛布鲁氏菌抗体检测常用方法的筛选

目前,奶牛布鲁氏菌病血清学检测最常用的方法包括虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和酶联免疫法(EILSA)、金标试纸法(GICA)。前两种是国家规定的标准方法,后2种是近年来才开始使用,但没列入国家标准的新方法。为了筛选出最适合的检测方法,我们对近5年来留存的奶牛虎红平板检测为阳性血清82份、阴性血清100份和40份人工调配的布病标准阳性血清进行了4种方法的比较,结果显示,EILSA法特异性强,灵敏度最高,GICA操作最简便,耗时最少。因此,在奶牛布病检测方法上选用GICA、EILSA组合较为合适。     

猪布鲁氏菌病流行病学调查及3种检测方法比较

为了解南平市延平区猪布鲁氏菌病的感染状态,分别从该地区12个乡镇随机选择1个规模化猪场,每个猪场采集30份血清样品,共采集360份样本。先用布病虎红平板凝集试验(RBPT)筛选,再用间接酶联免疫吸附试验（iELISA）和竞争酶联免疫吸附试验（c ELISA）复核。结果显示,虎红平板凝集试验共检出阳性血清样本54份,阳性率为15%,两种酶联免疫吸附试验检测均无阳性血清样本,表明延平区的猪场未存在布病感染的风险,在3种检测方法中,RBPT操作简单、灵敏性高,但假阳性率高,而ELISA特异性最好。     

研制新型布鲁氏菌抗体胶体金快速检测卡方法的建立与应用

为了得到一款准确、敏感、稳定,且可应用于临床的布鲁氏菌抗体检测产品,本研究应用胶体金原理研发了一款新型布鲁氏菌抗体胶体金快速检测卡,并结合胶体金试纸卡读数仪使用,可对布鲁氏菌进行快速准确的定性检测。试验结果表明,产品的检测时间为3 min,灵敏度高于虎红平板凝集试验的32倍,特异性好。对已知阳性样本的阳性检出率高于虎红平板凝集试验9.10%,对已知阴性样本的阳性检出率为0%;且通过批内和批间的稳定性及色度辨析度对比结果表明已达到判读要求。以上结果表明检测卡具有良好的重复性、灵敏度和特异性,可以作为布鲁氏菌病的临床初筛工具。     

布鲁菌病血清学检测方法的比较

[目的]比较4种布鲁菌病的血清学检测方法。[方法]分别用虎红平板凝集试验（RBT）、间接酶联免疫吸附试验（i-ELISA）、竞争酶联免疫吸附试验（c-ELISA）、试管凝集试验（SAT）4种方法检测876份奶牛血清。[结果]RBT、i-ELISA、SAT、c-ELISA检出的阳性血清分别为543份、501份、460份、500份,阳性率分别是61.99%、57.19%、52.51%、57.08%。     

两种诊断制品对临床样品中布鲁氏菌抗体的检测比较

本研究以国家标准《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T 18646-2018)中的试管凝集试验方法为确诊金标准,对353份临床牛、羊和猪血清样品进行确诊,然后分别采用虎红平板凝集试验抗原和抗体检测试纸条,对该353份临床血清进行检测,比较两种诊断制品在布鲁氏菌病初筛中的差异。经统计分析发现,虎红平板凝集试验抗原敏感性为100%(23/23),特异性为97.88%(323/330),与确诊结果间的Kappa值为0.86;布鲁氏菌抗体检测试纸条敏感性为100%(23/23),特异性为99.39%(328/330),与确诊结果间的Kappa值为0.95,两种方法的重复性试验结果均一致。试验结果证明,布鲁氏菌抗体检测试纸条和布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原都能满足布鲁氏菌病初筛的需求;由于布鲁氏菌抗体检测试纸条的储存、运输和操作的便捷性,在部分地区或特殊环境下可替代布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原用于布鲁氏菌病初筛。     

陕西省靖边县奶牛布鲁氏菌病血清学调查

为摸清靖边县奶牛布鲁氏菌病流行情况,2017年7—8月对该县全部存栏奶牛进行了布鲁氏菌病血清学调查。共采集98个奶牛养殖场户的1 227份血清样品,分别用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA)3种血清学检测方法,对其进行布鲁氏菌血清抗体检测。结果显示:奶牛布鲁氏菌病群体阳性率为13.27%,个体阳性率为3.50%,其中散养户个体阳性率较高,为7.52%,远高于我国控制区标准,需重点加强防控。为探讨上述3种检测方法的一致性,对3种检测方法的检测结果进行了对比分析。结果显示:RBPT、SAT和C-ELISA 3种方法检测结果的一致率大于99%,Kappa值大于0.90,表明3种方法具有良好的一致性。因此,在奶牛布鲁氏菌病监测净化过程中,将3种血清学检测方法联合应用,能有效降低出现假阳性和假阴性的概率,准确识别野毒感染牛,从而减少阳性牛处理过程中的误杀和漏杀现象。     

酶联免疫吸附试验诊断黄牛布氏菌病(摘要)

<正> 用酶联免疫吸附试验(ELISA),对139例黄牛血清标本,进行了布鲁氏菌病的抗体检测,阳性标准是1:320。同时与常规的试管凝集试验(SAT)、半胱氨酸凝集试验(CAT)、平板凝集试验(PAT)、虎红平板凝集试验(RBPT)四种试验方法进行了对比和分析。     

几种牛羊布鲁氏菌病抗体检测方法的比较

应用虎红平板凝集试验、试管凝集试验、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金法对牛羊血清样品进行布鲁氏菌病抗体检测,对不同的检测方法进行比较,以建立和优化动物布病简便快速的检疫诊断方法。结果显示:针对牛血清,胶体金法结果阳性率最高,虎红平板凝集试验与间接ELISA结果阳性率相似,试管凝集试验与竞争ELISA结果阳性率一致,表明胶体金法和虎红平板凝集试验的敏感性较好,而试管凝集试验与竞争ELISA特异性较好。针对羊血清,试管凝集试验、竞争ELISA和胶体金法的敏感性和特异性好于虎红平板凝集试验和间接ELISA。     

3种奶牛布鲁氏菌病血清学检测方法的贝叶斯评估

在无"金标准"的情况下,为评估虎红平板凝集试验(RBT)、荧光偏振分析法(FPA)和间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)用于奶牛布鲁氏菌病的抗体检测能力,作者分别以RBT、FPA、I-ELISA3种方法对采自某奶牛场的血清样品进行检测,通过贝叶斯分析法对检测结果进行分析,研究3种方法检测奶牛布鲁氏菌血清抗体的敏感性(Se)和特异性(Sp)。结果显示,RBT、FPA、I-ELISA3种检测方法的敏感性(Se)分别为91.81%、95.92%和95.98%;特异性(Sp)分别为98.80%、86.54%和98.65%。本研究表明,3种血清学检测方法中以I-ELISA的检测能力最好。     

虎红平板凝集试验与试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病的比较

布鲁菌病主要采用凝集试验来检测,本试验用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对江苏海安、江都、无锡和兴化地区的660头奶牛的血清样品进行平行检测,虎红平板凝集试验的阳性检出率为9.7%,试验管凝集试验的阳性检出率为5.5%;与后者相比,虎红平板凝集试验的敏感性为100%,特异性为95.3%,符合率为95.6%。这些数据表明,江苏地区某些奶牛场存在布鲁菌感染,虎红平板凝集试验可以用于布鲁菌病初步检测。     

济宁地区猪布鲁氏菌病流行病学调查及3种检测方法比较

为了解济宁地区猪布鲁氏菌病的感染状态,从该地区随机选择5个猪场,采集600份血液样本,以上猪场均未免疫猪布鲁氏菌病疫苗。先用布病虎红平板凝集试验(RBPT)筛选,再用试管凝集试验(SAT)和ELISA(酶联免疫吸附试验)复核。结果表明,虎红平板凝集试验共检出阳性血清样本13例,阳性率为2.17%;试管凝集试验检出阳性血清样本12例,阳性率为2.00%,与虎红平板凝集试验符合率为92%;ELISA试剂盒检出阳性血清10例,阳性率为1.67%,与虎红平板凝集试验符合率为77%。结论为:济宁地区的猪场存在布病感染,种猪的阳性率最高,其次是肥育猪和仔猪,并且在3种检测方法中,RBPT最敏感,而ELISA特异性最好。     

不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡检测牛羊布鲁氏菌病的效果分析

为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡（简称试纸条/卡）检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验（RBPT）初筛和竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）复核的临床牛羊血清样品进行检测比较。结果显示：不同试纸条/卡对布鲁氏菌企业标准阴阳性血清检出率均为100%,其中2种试纸条/卡敏感性高,对不同稀释倍数阳性血清均可检出;试纸条/卡对临床阴性血清均100%检出,但对临床阳性血清样品的检测结果差异较大,其中对羊阳性血清样品的检出率为5.88%～70.59%,对牛阳性血清样品为50.0%～100.0%。结果表明,不同品牌试纸条/卡在布病检测时存在一定差异。建议使用试纸条/卡进行布鲁氏菌病初筛后,应结合国家相关布病诊断技术进行复检,以确保检测结果的准确性。     

山东省部分地区奶牛场布鲁氏菌病血清学调查

2016年5—12月,从山东省泰安市、枣庄市、菏泽市和青岛市等地区6个奶牛场的成母牛群中,随机采集血清1 736份,分别用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)平行检测布鲁氏菌病血清抗体。结果显示:该6个奶牛群的布鲁氏菌病抗体总阳性率为11.12%;3种方法的阳性检出率各不相同,其中RBPT的阳性检出率为12.73%,SAT为11.12%,ELISA为11.75%;5个免疫牛场的布鲁氏菌病血清抗体检测均呈阳性,并且不同地区奶牛场之间的抗体阳性率差异较大,最高的为40.00%,最低的为8.93%;1个非免疫牛场的布鲁氏菌病血清抗体检测结果为阴性。检测结果提示:鉴于当前严重的布鲁氏菌病疫情形势,山东省的布鲁氏菌病防控压力加大;任何一种检测方法都有局限性,3种方法联合应用可有效降低出现假阳性和假阴性的概率;上述检测方法均无法区分免疫和感染,因此免疫给布鲁氏菌病的检测净化带来了极大困难。     

畜间布鲁氏菌病的血清学检测方法

布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌引起的人畜共患的传染、变态反应性疾病。病原体可以通过体表皮肤黏膜、呼吸道、消化道进入机体。人感染布病主要是与职业、饮食和生活习惯有关。由于布鲁氏菌感染一周后可出现特异性血清抗体,因此,国内外均用血清学试验检测该病。方法主要有虎红平板凝集、试管凝集试验、胶体金免疫层析试验和酶联免疫吸附试验。