精液品质相关基因的研究进展

公牛精液品质不仅与种公牛的饲养水平有关,而且与公牛本身的遗传基础有关。公牛产弱精或不产精严重影响了养牛业的经济效益。为了解精液品质的遗传机制,发展优质、高效的制种业,作者从精子发生过程入手,着重介绍在精子发生过程中特异的细胞分化活动中发挥至关重要作用的基因或基因家族,包括tsMCAK、Minna53及TLF等,讨论了与精子发生有关的转录因子基因、细胞周期相关基因、原癌基因、细胞凋亡相关基因的研究成果,为从事该领域研究的工作者提供可靠的参考信息,并探讨了今后如何对精液品质遗传基础进行研究。     

AQP7基因第二外显子的单核苷酸多态性与牛精液品质的相关分析

采用PCR-SSCP技术分析了AQP7基因的第2外显子在西门塔尔牛和夏洛莱牛群体中的遗传多态性。结果表明:在所扩增的AQP7基因的第2外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有2种基因型AA型和AB型。对多态片段测序分析表明:在AQP7基因第2外显子中存在有一碱基A→G突变,导致编码氨基酸(天冬氨酸→丝氨酸)的改变。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡状态。用最小二乘法分析AQP7基因第2外显子不同基因型与西门塔尔牛和夏洛莱牛精液品质的相关性,发现AQP7不同基因型对冻精顶体完整率有极显著影响,AA型极显著高于AB型(P<0.01)。AA型的冻精活精子比率显著高于AB型(P<0.05),对其它性状的影响差异不显著。因此,西门塔尔牛和夏洛莱牛AQP7基因应是影响精液品质的一个主效基因或与影响精液品质的主效基因紧密连锁。     

促黄体素LHβ基因的单核苷酸多态性与牛精液品质的相关分析

采用PCR-SSCP技术分析了LHβ基因的5′UTR和3个外显子在西门塔尔、夏洛来等种公牛中的遗传多态性。结果在所扩增的LHβ基因的5′UTR 2个目的片段和外显子1、3中均未发现PCR-SSCP遗传多态;在第2外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有3种基因型AA型、AB型、BB型。对多态片段的测序分析表明:在LHβ基因第2外显子中1个碱基G突变为A。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡。用最小二乘法分析LHβ基因第2外显子不同基因型与西门塔尔和夏洛来精液品质的相关性,发现LHβ不同基因型对冻精畸形率和射精量有显著影响,对其他性状的影响差异不显著。结果表明,西门塔尔和夏洛来牛LHβ基因应是影响精液品质的一个主效基因或与影响精液品质的主效基因紧密连锁。     

饲粮维生素C添加水平对大通牦牛精液品质和抗氧化功能的影响

选用体质量(1 030±90)kg的健康大通牦牛种公牛24头,采用单因子试验设计,随机区组法分为4组,分别为对照组(基础日粮)、Ⅰ组(基础日粮+200mg/kg维生素C),Ⅱ组(基础日粮+400mg/kg维生素C)、Ⅲ组(基础日粮+600mg/kg维生素C),试验周期120d。结果显示:饲粮中维生素C的添加显著提高牦牛精清中维生素C的含量,与对照组相比显著升高(P<0.01);与对照组相比,日粮中维生素C的添加,显著提高了牦牛射精总量、精子密度、鲜精和冻精活力以及精子顶体完整率,降低精子的畸形率;但600mg/kg组牦牛精液品质与400mg/kg组相比有不同程度的降低。与对照组相比,饲粮中不同水平维生素C的添加显著提高牦牛精清中总抗氧化能力(TAOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.01),降低精液中活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量(P<0.01)。结果表明:大通牦牛种公牛日粮中合理的维生素C添加剂量为400mg/kg。     

快慢羽基因对崇仁麻鸡精液品质的影响

通过对崇仁麻鸡快羽品系和慢羽品系的公鸡的精液品质测定，结果显示快羽和慢羽公鸡在精液品质方面无显著差异，表明快慢羽基因不影响崇仁麻鸡公鸡的精液品质。     

牛AQP7基因第3外显子的单核苷酸多态性与精液品质的相关分析

采用PCR-SSCP技术分析了AQP7基因的第3外显子在西门塔尔和夏洛来群体中的遗传多态性.结果表明在所扩增的AQP7基因的第3外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有2种基因型AA型、AB型.对多态片段测序分析表明:在AQP7基因第3外显子中存在有一碱基G→C突变,导致编码氨基酸(精氨酸→苏氨酸)的改变.适合性卡方检验表明该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡.用最小二乘法分析AQP7基因第3外显子不同基因型与西门塔尔和夏洛来精液品质的相关性,发现AQP7不同基因型对冻精活精子比率有极显著影响,AA型极显著高于AB型(P<0.01).AA型的冻精项体完整率和冻精活力显著高于AB型(P<0.05),对其他性状的影响差异不显著.研究结果表明,西门塔尔和夏洛来牛AQP7基因应是影响精液品质的一个主效基因或与影响精液品质的主效基因紧密连锁.     

CLCOK基因在母牦牛不同组织中的表达

CLOCK(Circadian locomotor output cycles kaput)是生物钟家族重要的核心基因之一,本实验提取了母牦牛的下丘脑、心、肝、脾、肺、肾、卵巢和肌肉8种组织,应用实时定量荧光PCR技术对青海高原母牦牛的八种组织中提取的RNA进行了CLOCK基因表达分析。结果显示:CLOCK基因的在八种不同的组织中均有表达,但存在差异,其中肝脏的表达量显著高于牦牛下丘脑、心脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢和肌肉。     

天祝白牦牛精液冷冻试验

为探讨天祝白牦牛保种的新方法,选择了对经3个月调教的3头公牦牛进行精液采集及精液冷冻试验。结果表明,鲜精、冻精均未能完全达到GB4143-XX中的各项要求,3头公牦牛中2头公牛的精液品质差异显著(P<0.05),这项工作有待于进一步研究。     

南方不同月份中公犬精液品质的变化

犬的精液品质是影响繁殖力的一个重要因素,在其他家畜中的研究表明,精液品质在不同的月份均呈现一定的变化,但在犬的研究方面仍未见相关的报道.本文对南方某犬场的12头德国牧羊犬、15头罗威纳犬、7头杜伯文犬的精液品质进行记录并统计分析.结果表明:3个品种公犬的精子活力、密度和畸形率受当地气温的影响,气温升高时精液品质下降,气温下降时精液品质恢复.3个品种中,罗威纳犬精子活力、密度和畸形率均最好,各月间变化也较小;其次是德国牧羊犬;杜伯文犬的上述3个指标最差,且各月间变化也较大.     

牦牛副伤寒沙门氏菌特异性抗原基因在大肠杆菌中的克隆及表达

对牦牛副伤寒牛病沙门氏菌(S. morbificans bovis)的染色体DNA进行提取,用基因工程中的“鸟枪法”,将限制性内切酶部分酶切染色体DNA片段,重组到载体pBR_(322)的Barn H I酶切位点上,再转化到大肠杆菌DH_(5α)中,经耐药表型筛选,在约1900个转化菌中找出了86个具有重组质粒的细菌株,经ELISA法检测,其中pS9,pS31表现出较强的表达,通过动物免疫试验,小鼠获5/8保护,豚鼠获6/8保护,大肠杆菌DH_(5α)无保护力(0/4,0/8),证明本试验所克隆的片段是保护性抗原,为今后构建基因工程苗提供了依据。     

种公牛COX基因的单核苷酸多态性与精液品质的相关性分析

用长春优质肉种公牛繁育中心的33头种公牛,通过PCR-SSCP技术,检测细胞色素氧化酶（Cytochrome c ox-idase,COX）中存在的突变点,并对多态片段进行了测序,以确定突变的碱基类型和突变点的位置。根据PCR-SS-CP检测及测序结果得知：在细胞色素氧化酶基因的外显子中,第2外显子的92bp位处存在T→C的突变,该碱基位于密码子第2位,氨基酸由异亮氨酸突变为苏氨酸。同时结合精液品质测定记录,对长春优质肉种公牛繁育中心的33头种公牛的精液品质进行了相关分析,结果显示：细胞色素氧化酶基因的第二外显子CC型的活精子比率与CD型相比存在极显著差异（P〈0.01）,冻精活力存在显著差异（P〈0.05）。     

染色法评定精液品质的研究

目前,家畜精液品质检查(指显微镜检查法)主要检查精液的活力(率)、精子的畸形率、顶体完整率等指标,然后根据测得的若干指标,综合判定精液的品质。这样能比较可靠地选择出具有较高受精潜力的精液,但方法繁琐且存在明显的不足之处。活力(率)的检查,只考虑了某一精液活精子的数量,忽略了这些活精子的质量,如精子是否畸形,顶体是否完整。且此法主要用目测法来估评,主观性较大,也不     

牦牛乳铁蛋白基因多态性及其与乳品质性状的关联分析

试验旨在检测牦牛乳铁蛋白（lactoferrin,LF）基因多态性,评估基因突变对牦牛乳品质性状的影响,以期丰富牦牛重要经济性状的分子遗传研究。应用PCR-SSCP方法,检测甘南牦牛、西藏牦牛和天祝白牦牛LF基因5'UTR和内含子4突变,结合甘南牦牛乳品质测定,评估基因突变对其乳品质性状的影响。结果表明,牦牛LF基因5'UTR检测到c.-568 G>A的突变,等位基因A₁和基因型A₁B₁频率最高,为优势等位基因和基因型;内含子4检测到c.499+56 C>A突变,基因型A₂B₂频率最高,为优势基因型,等位基因A₂为甘南牦牛和天祝白牦牛优势等位基因,而B₂为西藏牦牛优势等位基因;各类群牦牛检测区域多态信息含量（PIC）介于0.25~0.50,属中度多态。关联分析表明,甘南牦牛LF基因突变影响部分胎次甘南牦牛乳品质性状,其中5'UTR第2胎基因型A₁A₁和A₁B₁个体无脂固体物质百分含量显著高于B₁B₁个体（P<0.05）;内含子4第3胎基因型A₂B₂和B₂B₂个体乳脂率显著高于A₂A₂型个体（P<0.05）,第4胎基因型B₂B₂个体的乳脂率显著低于A₂A₂和A₂B₂型个体（P<0.05）。以上结果表明,甘南牦牛、西藏牦牛和天祝白牦牛LF基因存在多态性,甘南牦牛LF基因5'UTR、内含子4突变分别影响无脂固体物质含量和乳脂率,可以作为潜在的分子遗传标记。     

GSTs-Mu基因的单核苷酸多态性与种公牛精液品质的相关性分析

谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)在致癌物质解毒及基因诱变等的过程中都发挥非常的重要的作用,因此可能影响公牛个体的精液品质。本实验选用长春中信集团种公牛繁殖中心的33头种公牛,通过PCR-SSCP技术,检测谷胱甘肽S-转移酶基因7个外显子扩增位点中是否存在突变;并对多态片段进行了测序,以确定突变的碱基类型和突变位点变异的位置;同时结合精液品质测定记录,对长春中信集团种公牛繁殖中心公牛的精液品质进行了相关分析。根据PCR-SSCP检测及测序结果得知:在谷胱甘肽S-转移酶基因外显子中,第5外显子的56bp位存在C→T的突变,但是由于该处的碱基位于密码子第2位,氨基酸由脯氨酸突变为亮氨酸。分析了33头种公牛谷胱甘肽S-转移酶基因的遗传多态性与精液品质的相关关系,谷胱甘肽S-转移酶基因的第5外显子AA型的鲜精活力、冻精活力、冻精活精子比率要显著高于AB型以及BB型。     

激光对精液品质效应的研究

<正>前言 近几年来,激光广泛地应用于农业、医学、以及研究细胞的分化和发育,特别是在农业上育成了许多优良品种,取得了可喜的成绩。在细胞研究方面,激光对鸡胚细胞的代谢有作用。可以延长猪精子的存活时间,但对绵羊精液品质效应报道的甚少,本文拟以He-Nr激光辐射绵羊精液,通过测定精子的活力、存活率、顶体反应率、果糖酵解、呼吸、(32)~Pi摄入量和精液中的钙浓度,从而来确定激光对精细胞的生物学效应和家畜繁殖中的应用。 材料和方法 1.精液的采集和处理 用假阴道法采集公羊的精液,混匀后在实验室评定活力。活力在0.6以上方可使用,并用血球计数器计数精子的密度。根据密度,用普通稀释液稀释为10~9精子/mL精液。实验设1个对     

奶牛精液品质综合评定方法

奶牛精液品质综合评定方法东北农业大学动物科学系（哈尔滨１５００３０）孙丽华，杨运清，单玉明精液品质的优劣是衡量公牛种用价值的重要指标，直接影响到母畜的受胎率乃至后代的生产性能。在我国，不论是奶牛饲养场，还是家畜繁育指导站，现行的精液品质测定方法大致为...