猪源乳酸菌的抗逆性及益生性研究

在对猪肠道中分离到的乳酸菌的抗逆性和益生性进行研究,拟为获取可用于发酵饲料生产接种菌奠定基础。采用体外法,对筛选得到的11株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐、抑菌、温度敏感性和耐抗生素试验检测。结果显示:11株乳酸菌中,编号为L71、L76和L104的乳酸菌株可耐受p H2.5环境,暗示其对胃酸环境有一定的耐受性;L33、L35、L37和L104菌株可耐受猪肠道的胆盐环境;L22、L24、L26、L71、L76和L96菌株发酵液上清对大肠杆菌K88、K99和鸡白痢沙门氏菌均有较好的抑制效果;L76和L96菌株对60℃温度具有一定耐受性;L71、L76和L96对抗生素最低耐受量在益生菌的测定最低限制浓度范围内。研究表明:编号为L71和L76的2株乳酸菌具有较好的抗逆性,有用作发酵饲料生产接种菌的潜力。     

PCR技术检测产蛋下降综合征病毒核酸的研究

根据已报道的腺病毒DNA序列，设计合成了1对核苷酸引物，引物间隔约630bp。用该引物对EDS76病毒内蒙古地区分离株(N3、B4)和参考株(AV-127)核酸进行聚合酶链式反应(PCR)，均扩增出约630bp的特异性DNA片段。对PCR灵敏度进行测定，该法可检出100pg的样品模板。结果表明，PCR是检测EDS76病毒的一种简便快速、特异性强和灵敏度高的方法。     

自然青贮多花黑麦草优良乳酸菌的筛选及对多花黑麦草青贮品质的影响

为了筛选出适用于多花黑麦草青贮发酵的优良乳酸菌菌株,从自然青贮多花黑麦草中分离乳酸菌,筛选并鉴定生长快速且产酸效率高的菌株,分析其生理生化特征以及对多花黑麦草青贮品质的影响。利用传统的平板培养法,从自然青贮多花黑麦草中分离获得180株乳酸菌。其中,5株乳酸菌生长快速且产酸能力强,均能够在NaCl浓度为3.0%,温度为15~35 ℃,pH为3.5~7.0的MRS液体培养基中良好生长。经16S rRNA基因序列比对鉴定,菌株PR_LAB_9、PR_LAB_34、PR_LAB_67和PR_LAB_86为植物乳杆菌,PR_LAB_76为戊糖片球菌。对菌株进行生长曲线和产酸性能测定,该5株乳酸菌均能够在12 h内快速繁殖和产酸,菌株PR_LAB_76在24 h内生长速率和产酸效率均优于其他4株乳酸菌。进一步分析添加该5株乳酸菌对多花黑麦草青贮发酵品质、营养成分、微生物数量的影响,发现该5株乳酸菌均能提高多花黑麦草的青贮品质,包括显著降低青贮料pH和氨态氮含量,减少干物质损失,提高可溶性碳水化合物含量。其中,菌株PR_LAB_76处理组多花黑麦草青贮品质最优,干物质含量、粗蛋白含量、乳酸含量、乳酸菌数量显著高于其他4株乳酸菌处理组,且pH值、酵母菌数量显著低于其他4株乳酸菌处理组。综上,戊糖片球菌PR_LAB_76可作为多花黑麦草青贮的备选菌株。     

规模化鸡场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性监测

为了对鸡致病性大肠杆菌的流行情况及耐药性调查分析,从山东省部分地区的60个鸡场采集了116份鸡内脏病料,结合培养特性对其进行了细菌的分离和生化鉴定,结果分离到大肠杆菌95株,其中致病性大肠杆菌76株。对这76株致病性大肠杆菌进行了12种抗生素敏感性试验,发现分离的菌株对12种药物均有不同程度的耐药性,青霉素对其完全没有抑制作用;新研制的利福平复合新药抑制作用最强,64.5%为高度敏感(49/76),34.2%中度敏感(26/76),表明该药对鸡大肠杆菌具有显著的效果;其中,丁胺卡那霉素(63.2%)、氟哌酸(55.3%)也有良好的抑菌作用。     

肾型鸡传染性支气管炎病毒X株S1基因序列的测定及同源性分析

根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) S1基因序列 ,设计了 2对引物并以 RT- PCR特异性扩增出IBV X株的 S1基因 ,基因产物大小为 1.6 4kb,与设计相符 ,对其进行序列测定后 ,与标准毒株 H5 2、H12 0、M41、BEAU和澳大利亚 T株的 S1基因进行同源性比较。结果表明 ,X株与 H5 2、H12 0、M41、BEAU和澳大利亚 T株的核苷酸序列的同源性分别为 75 .8%、76 .1%、76 .3%、75 .5 %和 76 .9%,由此可以看出 ,IBV X株与标准毒株在 S1基因上存在较大差异。     

规模化鸡场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性监测

为了对鸡致病性大肠杆菌的流行情况及耐药性调查分析,从山东省部分地区的60个鸡场采集了116份鸡内脏病料,结合培养特性对其进行了细菌的分离和生化鉴定,结果分离到大肠杆菌95株,其中致病性大肠杆菌76株.对这76株致病性大肠杆菌进行了12种抗生素敏感性试验,发现分离的菌株对12种药物均有不同程度的耐药性,青霉素对其完全没有抑制作用;新研制的利福平复合新药抑制作用最强,64.5%为高度敏感（49/76）,34.2%中度敏感（26/76）,表明该药对鸡大肠杆菌具有显著的效果;其中,丁胺卡那霉素（63.2%）、氟哌酸（55.3%）也有良好的抑菌作用.     

强毒株与弱毒株鼠疫菌在赫氏干燥培养基上的生长差异

应用鼠疫菌强毒株141标准株和鼠疫菌弱毒株EV76株菌落计数实验,接种到不同pH值、不同氨基氮含量和不同刺激因子的赫氏干燥培养基上通过菌落计数方法筛选最佳培养条件。结果表明在相同条件下141株鼠疫菌较EV76株鼠疫菌易受pH值、氨基氮含量、刺激因子的影响(P<0.05)。     

鸭源H9亚型禽流感病毒的分离及其生物学特性的研究

从南京某肉鸭养殖场用灭菌棉拭共采集肉鸭的泄殖腔样品20份,通过SPF鸡胚尿囊腔传代接种法分离到1株病毒。HA-HI试验表明:该病毒可凝集鸡红细胞,不能被ND、EDS-76阳性血清抑制,但能被H9阳性血清所抑制,为H9亚型AI。该分离株生物学特性研究结果表明,对鸡表现为弱致病性,而对鸭无致病性。能在小鼠体内良好的增殖,并且可引起发病和死亡。     

四川省动物性食品源沙门氏菌的耐药性监测与分析

近年食源致病菌耐药性较严重,为了解四川省动物性食品源沙门氏菌（Salmonella spp.）耐药情况,本试验采用肉汤微量稀释法,对源自四川省动物性食品的76株沙门氏菌进行了25种抗生素(组合)的敏感性试验。结果表明76株沙门氏菌对利福平（96.05%）、黏菌素（78.95%）、磺胺异噁唑（64.47%）、先锋唑啉（60.53%）、氨苄西林（60.53%）、阿莫西林—克拉维酸（56.58%）、甲氧苄啶（53.95%）及强力霉素（52.63%）耐药率较高。76株沙门氏菌对25种抗生素（组合）共产生了66种耐药谱,多重耐药率达97.37%（74/76）,主要对青霉素类、先锋唑啉、链霉素、四环素类、磺胺类药物及黏菌素表现出多重耐药。结果表明,四川地区食源沙门氏菌耐药性已较为严重,应加强连续监测。     

减蛋综合征病毒不同毒株多肽初步分析

采用SDS-PAGE凝胶电泳对AV-127、GC2、HS-13株不同地方EDS-76病毒进行了多肽分析,初步证实3株病毒蛋白多肽组成上存在一定的差异,从而说明不同地方病毒株之间存在差异。