红花蛋白的提取及利用价值评价

本文在对红花蛋白的提取方法作了大量研究的基础上，指明了采用等电沉淀法提取红花收白时，ＰＨ值，温度，籽粒含油量，不同浸提液与蛋白质得率的关系，同时，用多种方法对红花蛋白作了较全面的利用价值的评价。     

植物组织双向电泳样品制备方法研究进展

摘要：双向电泳是目前应用最广泛的蛋白分离技术，该技术的核心是蛋白样品的制备。植物组织中通常含有大量蛋白酶和次生代谢物，这严重干扰蛋白提取、分离和鉴定。从植物组织中提取高质量的蛋白样品用于蛋白组分析充满挑战，本文简要阐述了植物组织蛋白提取的关键点，特别是植物组织中的次生代谢物及去除方案。此外，本文还对三种植物蛋白提取方法、三种方法的优缺点及适用植物组织作了概述。     

红花油体蛋白基因CtOleosin的克隆及表达

【目的】克隆红花油体蛋白基因CtOleosin,研究其表达特性,为探索其功能奠定基础。【方法】以红花种子为研究对象,于开花后4,8,12,16,20,24,28,32d,提取红花种子总RNA,利用RT-PCR技术克隆红花CtOleosin全长cDNA片段,生物信息学方法分析其特性及结构功能;利用Protparam在线工具分析CtOleosin蛋白的理化性质,用Blastp比对该蛋白与其他物种相关蛋白的同源性,使用SMART软件进行功能区分析;利用荧光定量方法检测该基因在种子不同发育时期的表达量。【结果】克隆了红花CtOleosin基因,其全长639bp,编码213个氨基酸,蛋白理论分子质量约为21.48ku,理论等电点9.39,带正电荷残基18个,负电荷残基14个;红花CtOleosin基因编码产物与向日葵Oleosin的同源性高达59.11%,属于油体蛋白家族成员,此蛋白不存在信号肽,无糖基化位点,存在2个跨膜区;以EF1α作为内参基因分析发现,CtOleosin基因表达量在红花种子发育初期逐渐升高,28d时达到最高,之后又有所下降。【结论】成功克隆了红花CtOleosin基因,明了了其特性、功能、编码产物的基本理化性质,以及其在红花种子不同发育时期的表达量变化情况。     

红花油酸去饱和酶基因的克隆及序列分析

【目的】对红花油酸去饱和酶FAD2基因进行克隆和生物信息学分析,为深入研究该酶的功能提供理论依据。【方法】提取红花种子总RNA,通过RT-PCR方法进行反转录,PCR扩增得到FAD2基因全长cDNA序列。运用生物信息学方法,对红花FAD2氨基酸序列的理化性质、系统进化、蛋白定位和跨膜区域等进行预测和分析。【结果】成功克隆获得了红花FAD2基因,其开放阅读框cDNA长1 140bp,编码380个氨基酸,预测分子质量43.6ku,理论等电点8.37,带有正电残基(强酸性)30个、负电残基(强碱性)34个。FAD2蛋白含有3个极度保守的His-Box,不存在明显的信号肽,存在6个跨膜结构域,与疏水区域预测结果一致。红花FAD2核苷酸的分子进化树分析显示,其与日本栽培稻的亲缘关系较近。红花FAD2氨基酸序列比对结果表明,不同植物的FAD2具有较高的同源性,同源性平均达72.94%。【结论】成功克隆了红花FAD2基因,并对其编码的蛋白进行了生物信息学分析。     

稻田绿肥提取叶蛋白新工艺及其应用前景

对四种叶蛋白沉淀方法的沉淀效果进行了比较，研究了澄清液经乳酸发酵发酵后作沉淀的机理，应用条件及沉淀技术，提出了叶蛋白提取新工艺。试验证明，这种新工艺叶蛋白提取率高，品质好，设备简易，成本较低，适合农村推广应用。     

固相萃取——高效液相色谱法分离红花中的黄酮类物质

目的 研究红花中的黄酮类物质。方法 乙醇浸泡提取，固相萃取分离，液相色谱法进行纯度检测，结果 采用的红花中有两种黄酮类物质。结论 洗脱液V（H2O）：V（C4H5OH）=3：7，能很好的分离红花中的两种黄酮类物质。     

红花提取物清除自由基能力的初步研究

本研究分析了红花清除自由基的能力,并探讨了有效提取其抗氧化成分的方法,旨在为红花的保健效用及其开发利用提供基本资料。以红花为试材,通过超声波、过滤、离心等方式,采用水、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯等溶剂提取抗氧化成分,应用水杨酸法测定其清除羟自由基的能力,应用光照核黄素法测定其对超氧阴离子自由基的清除作用。结果表明,通过超声波和离心结合的方式,利用95%乙醇对红花进行提取,提取液对羟自由基的清除作用最佳,清除率(98.31%)高于绿茶(81.85%)和VE(57.17%),与VC(99.60%)相当。同时,红花提取液对超氧阴离子自由基也有一定的清除作用,以70%乙醇对红花进行提取对超氧阴离子自由基的清除效果为佳。     

红花花瓣总RNA提取方法的比较研究

红花花瓣富含多糖、多酚和花色素苷等次生代谢产物,严重影响花瓣总RNA的提取。为探索适合红花花瓣总RNA的提取方法,以4种红花不同时期的花瓣为材料,通过对4种RNA提取方法,即RNA提取试剂盒、RNAiso Plus试剂法、改良的CTAB法和SDS法进行比较研究。结果表明:RNAiso Plus试剂法效果最好,提取的总RNA完整性好,纯度高、浓度高。通过RT-PCR验证,所提取的RNA达到基因克隆和实时定量PCR等分子生物学实验要求。     

朱顶红花红色素的提取条件及理化性质

研究了朱顶红花红色素的提取条件和理化性质。结果表明，pH1．0的95％乙醇是朱顶红花红色素的最佳提取剂；朱顶红花红色索属花青素类色素，易溶于水和酸性乙醇；pH值对色素影响明显，在酸性条件下色泽稳定且具有热稳定性。光照能加快色素降解。金属离子Na^＋，Ca^2＋，Al^3＋，Cu^2＋，Zn^2＋对色素色泽无影响，而Fe^3＋，Pb^2＋有不良影响。色素的抗氧化还原性能较好。蔗糖、葡萄糖和盐等添加剂对色素无影响。     

玉米醇溶蛋白的提取和应用

玉米蛋白粉中所含蛋白质主要是玉米醇溶蛋白，近年来随着对玉米醇溶蛋白的研究的深入，它的应用范围逐步扩大。本文着重介绍了玉米醇溶蛋白的几种提取方法，同时根据它独具的特性，在涂膜剂、可食性薄膜，粘结剂、渐释性制等应用方面作相应的阐述。     

红花CtMYB-TF1基因的克隆与表达分析

为了探索R2R3-MYB转录因子与植物类黄酮的次生代谢调控之关系,及对植物花青素合成代谢的作用,以红花花瓣为试验材料,采用RT-PCR结合RACE技术,从红花(Carthamus tinctorius)中克隆获得1个全长1 260 bp的调控花青素代谢的 CtMYB-TF1基因。结果表明,该基因序列可编码249个氨基酸,其蛋白质分子质量为28.08 ku;红花CtMYB-TF1蛋白分子式为C_(1220)H_(1930)N_(358)O_(378)S_(13),是一种不稳定的碱性亲水蛋白;由系统进化树分析可知,红花 CtMYB-TF1与葡萄 VvMYBPA1亲缘关系较近;通过RT-qPCR技术对表达体系进行基因表达量的检测分析,红花 CtMYB-TF1基因在花期的各个时期相对表达量均高于红花CtANS基因,并且随着花期的延长红花 CtMYB-TF1基因和CtANS基因的相对表达量也有增高,其中在花期的第5天红花 CtMYB-TF1基因的相对表达量出现峰值,说明 CtMYB-TF1基因对CtANS基因具明显的上调作用,可为构建高产、稳定的红花基因工程改良细胞株提供参考。     

复合红花油制剂降血脂作用初探

[目的]研究配伍红花籽油、红花黄素及其复合制剂是否具有降脂作用.[方法]小鼠造模用药后使用全自动生化仪,测定动物血清中总胆固醇(cHO -C)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL - C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量并统计进行T检验或者方差分析.[结果]配伍红花籽油、红花黄素及其复合制剂对血清中C HO - C、TG、LDL -C的增高均有抑制作用,对HDL -C数值的降低有提升作用.[结论]红花黄素可降低实验性高脂血症小鼠甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白,具有降低血脂的作用,红花黄素和配伍红花籽油复合制剂低剂量组方后,作用强于红花色素单一组分药物.     

云南红花的研究进展及前景展望

为系统总结回顾云南红花的研究与发展状况,通过对云南红花的分布、种质资源类型及收集保存利用现状资料分析和综述,总结了红花种质资源的描述规范和数据标准、种质资源的鉴定评价、优异红花种质资源的现状、育种技术、栽培技术、综合利用及取得的科技成果等方面。分析表明,云南红花仍然存在整体水平不高、缺乏深入研究、技术创新不足等问题。建议加强基础研究、杂交育种和药用红花研究,为推动云南省乃至全国红花产业可持续发展提供品种及技术支撑。     

不同基因型红花种质耐低磷筛选指标的鉴定及评价

[目的]获得耐低磷红花种质的形态鉴定指标,并选择磷高效红花种质。[方法]利用水培营养形成的低磷素水平和正常磷素水平对17份红花种质进行耐低磷筛选指标的鉴定及其综合评价。[结果]低磷胁迫下,除根冠比外,苗高、叶长、叶宽、主根长、侧根数、根鲜重、地上部鲜重和根体积这8个指标的生长发育迟缓,但不同品种不同指标间受低磷胁迫后的变异幅度不同。不同基因型红花种质耐低磷能力差异显著,耐低磷能力较强的3份红花种质分别是"原阳红花-3""封丘红花-1"和"永城红花";相对根体积、相对根鲜重和相对地上部鲜重可以作为红花耐低磷种质的筛选指标,可利用红花苗期耐低磷能力的回归模型对红花进行耐低磷能力预测。[结论]筛选出耐低磷能力较强的红花种质,将为培育耐低磷红花新品种和克隆相关磷高效基因提供基础材料。     

广宁红花茶油清除自由基能力

为了研究广宁红花茶油清除自由基的能力,分别以不同浓度的红花毛油和半精炼红花茶油来测定ＤＰＰＨ、ＡＢＴＳ＋·和羟基自由基清除率,以比较不同精炼程度茶油的抗氧化活性．试验结果表明,广宁红花茶油具有较明显的清除自由基活性,红花毛油和半精炼红花茶油清除自由基的能力均随浓度的增加而增强;当试验浓度为１０ｇ／Ｌ时,红花毛油和半精炼红花茶油对ＤＰＰＨ清除率分别为２３.４６％、１０.９８％,对ＡＢＴＳ＋·清除率分别为１７.３９％、１１.４５％;而试验浓度为２.５ｇ／Ｌ时,对羟基自由基清除率已分别达到２６.３９％、１９.０６％,结果表明对３种自由基的清除能力红花毛油强于半精炼红花茶油,其中对羟基自由基清除能力最强．     

稀土对红花的生物学效应研究Ⅰ.稀土对红花种子萌发的影响

为研究稀土对红花种子萌发和种苗初期生长的影响,给稀土用于红花的优质高产栽培技术提供生理生化依据,利用不同浓度稀土溶液浸泡红花种子,测定种子萌发和种苗初期的各项生理生化指标。结果表明:50 mg/L和100 mg/L的稀土溶液是处理红花种子的适宜浓度,能够促进红花种子的萌发,稀土能够提高红花的脱氢酶和硝酸还原酶的活性,有利于物质的转化,刺激胚芽与胚根的生长,有利于干物质的积累。     

微波辅助提取红花黄色素工艺的优化

[目的]研究微波辅助提取红花黄色素的工艺。[方法]采用单因素和正交试验的方法对微波辅助提取红花黄色素的工艺进行了系统研究,通过对溶剂浓度、微波功率、处理时间等因素的探讨,分析影响试验结果的因素,总结出微波辅助提取红花黄色素的最合适提取方法。[结果]微波辅助提取红花黄色素最佳提取工艺为乙醇浓度50%、处理时间40 s、微波功率为1 600 W。[结论]该研究为红花黄色素提取工艺提供一定的理论依据。     

复合红花黄色素抗凝血作用研究

[目的]研究双亚酸、红花黄色素及其复合制剂的抗凝血作用.[方法]用双亚酸、红花黄色素及其复合制剂给小鼠灌胃20 d后,测定其对小鼠的凝血时间和出血时间的作用;其对小鼠凝血酶原时间(PT)、小鼠活化部分凝血激酶时间(APTT)的影响.[结果]双亚酸、红花黄色素及其复合制剂能显著延长小鼠的凝血时间和出血时间,能够显著延长小鼠的凝血酶原时间、小鼠活化部分凝血激酶时间.[结论]红花黄色素具有抗凝血的作用,红花黄色素和双亚酸复合制剂的抗凝血作用强于红花黄色素单一组分药物.     

红花籽油提取工艺的优化研究

采用索氏浸提法对红花籽油的提取优化工艺进行了研究。在单因素试验的基础上,通过正交实验确定了红花籽油提取的最佳工艺,同时对红花籽油的脂肪酸成分进行分析,为红花籽油的工业化生产提供科学的理论依据。结果表明:70%的丙酮-水混合溶液以1∶6的料液比,在70℃的温度下浸提3 h,红花籽油的提取率达26.34%。气相色谱分析表明,红花籽油中饱和脂肪酸占19.67%、不饱和脂肪酸占80.33%。