猪繁殖与呼吸综合征弱毒苗阴道免疫对母猪子宫IgA和IgG分泌细胞的影响

用猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒苗分别通过生殖道黏膜免疫和肌肉注射免疫母猪(各4头),另4头经生殖道接种生理盐水作为对照,运用免疫组化技术显示子宫局部IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的分布.结果表明,对照组子宫中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞主要分布于黏膜固有层浅层,子宫颈中的IgA分泌细胞数量多于子宫角,而子宫角中IgG分泌细胞数量多于子宫颈.生殖道免疫后,与对照组相比,子宫角IgA分泌细胞数量极显著增多(P<0.01),子宫颈IgA分泌细胞数量无显著增加;子宫角IgG分泌细胞数量有所增加,但差异不显著,子宫颈IgG分泌细胞数量无显著变化.肌肉注射后,子宫中IgA和IgG抗体分泌细胞数量与对照组间无明显变化.表明用PRRS弱毒苗经生殖道黏膜免疫可增加子宫局部抗体分泌细胞数量,而全身免疫对子宫抗体分泌细胞无显著影响.     

PRRS弱毒株生殖道免疫对母猪阴道局部和全身IgA水平及特异性抗体水平的影响

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒株分别通过生殖道黏膜免疫和肌肉注射免疫母猪,再分别应用双夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测阴道分泌物中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的水平和血液中免疫球蛋白A(IgA)水平,用竞争ELISA技术检测血液中PRRS特异性抗体的水平.结果表明:免疫后第3周,母猪生殖道免疫组阴道分泌物中SIgA水平显著高于对照组(P<0.05);血液IgA水平与对照组相比升高,但差异不显著;血液中PRRS特异性抗体水平与对照组相比也无显著差异.肌肉注射组母猪阴道分泌物中SIgA水平与对照组相比无显著差异.但血液中PRRS特异性抗体水平显著高于对照组(P<0.05).免疫后第5周生殖道免疫组阴道分泌物中SIgA水平和血液中IgA水平高于对照组,但无显著差异.肌肉注射组血液PRRS特异性抗体水平显著高于对照组(P<0.05).表明PRRS弱毒株经生殖道黏膜免疫能提高母猪生殖道局部SIgA的水平,但对血液中IgA和IgG水平影响不大.     

禽流感灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对鸡呼吸道抗体分泌细胞的影响

分别在禽流感灭活抗原(H5N2)中添加黏膜免疫佐剂CpG(CpG佐剂组)和重组IL-2(IL佐剂组),经过鼻腔免疫鸡群后研究呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量变化.结果发现:在鼻腔免疫后第3周和第5周CpG佐剂组肺单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(生理盐水)(P＜0.05),CpG佐剂组和IL佐剂组肺和气管、气管叉单位视野中IgG分泌细胞面积和数量均显著或极显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01);免疫后第5周和第7周CpG佐剂组气管和气管叉单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(P＜0.05).免疫后第7周2个试验组气管叉中IgG分泌细胞数量极显著高于对照组(P＜0.01);而单独应用禽流感灭活抗原在鼻腔免疫后呼吸道中IgA分泌细胞面积和IgG分泌细胞数量与对照组均无显著差异.结果表明:鼻腔免疫添加了佐剂的禽流感(H5N2)灭活抗原能够增加呼吸道中IgA分泌细胞面积和IgG分泌细胞数量,提高局部呼吸道体液免疫应答水平.     

禽流感灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对鸡呼吸道抗体分泌细胞的影响

分别在禽流感灭活抗原(H5N2)中添加黏膜免疫佐剂CpG(CpG佐剂组)和重组IL-2(IL佐剂组),经过鼻腔免疫鸡群后研究呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量变化.结果发现:在鼻腔免疫后第3周和第5周CpG佐剂组肺单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(生理盐水)(P＜0.05),CpG佐剂组和IL佐剂组肺和气管、气管叉单位视野中IgG分泌细胞面积和数量均显著或极显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01);免疫后第5周和第7周CpG佐剂组气管和气管叉单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(P＜0.05).免疫后第7周2个试验组气管叉中IgG分泌细胞数量极显著高于对照组(P＜0.01);而单独应用禽流感灭活抗原在鼻腔免疫后呼吸道中IgA分泌细胞面积和IgG分泌细胞数量与对照组均无显著差异.结果表明:鼻腔免疫添加了佐剂的禽流感(H5N2)灭活抗原能够增加呼吸道中IgA分泌细胞面积和IgG分泌细胞数量,提高局部呼吸道体液免疫应答水平.     

猪肺炎支原体弱毒株与佐剂配合鼻腔免疫对仔猪呼吸道抗体分泌细胞的影响

应用猪肺炎支原体弱毒株配合佐剂CpG鼻腔免疫仔猪,检测呼吸道(鼻黏膜、气管和肺)IgA和IgG分泌细胞的分布与面积变化。30头仔猪随机均分为5组,7日龄首免,鼻腔免疫组10日龄二免,首免后42 d宰杀,取鼻黏膜、气管和肺,利用免疫组化技术检测IgA和IgG分泌细胞。结果表明:应用猪肺炎支原体弱毒株配合CpG鼻腔免疫后6周,鼻黏膜IgA和IgG分泌细胞的面积均极显著增加(P<0.01),气管IgA分泌细胞的面积也显著增加(P<0.01)。而单独应用猪肺炎支原体弱毒株鼻腔免疫或肌肉注射虽然也能显著增加鼻黏膜和气管IgA、IgG分泌细胞的面积(P<0.01),但仍显著低于配合佐剂鼻腔免疫的效果。在肺中并未检测到IgA和IgG分泌细胞。结果提示,猪肺炎支原体弱毒株配合CpG鼻腔免疫能够增强局部呼吸道体液免疫应答水平。     

禽流感灭活抗原与佐剂配合饮水免疫对鸭消化道抗体分泌细胞的影响

为探讨鸭源禽流感灭活抗原与佐剂配合饮水免疫雏鸭的效果,应用鸭源禽流感灭活抗原与复合黏膜免疫佐剂(CpG和/或葡萄糖)饮水免疫雏鸭,检测消化道(主要是咽和小肠)抗体分泌细胞的变化。首先分别从鸭的胆汁和血清中粗提免疫球蛋白A(IgA)和IgG,经纯化后制备了兔抗鸭IgA和IgG,然后应用免疫组化技术显示鸭消化道IgA和IgG分泌细胞。试验结果表明:用禽流感灭活抗原配合CpG和/或葡萄糖饮水免疫后3、5和7周,消化道黏膜局部IgA分泌细胞面积均显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),IgG分泌细胞(除首免后第3和7周小肠外)极显著升高(P<0.01)。而单独用禽流感灭活抗原和用葡萄糖配合禽流感灭活抗原饮水免疫对消化道局部免疫水平影响不大。结论:鸭源禽流感灭活抗原配合免疫佐剂饮水免疫能够提高雏鸭消化道局部免疫水平。     

PRRSV弱毒细胞疫苗与灭活疫苗生殖道黏膜免疫效果观察

应用组织学方法比较观察了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)弱毒细胞疫苗与灭活疫苗生殖道黏膜免疫的效果。试验选用5月龄长白×大约克夏二元杂交母猪18头。PRRSV弱毒细胞疫苗和灭活疫苗通过生殖道黏膜免疫接种。结果表明PRRSV弱毒细胞疫苗生殖道黏膜接种组母猪的子宫黏膜上皮内淋巴细胞数较灭活疫苗生殖道黏膜免疫接种组和对照组母猪显著减少(P<0.01);而且子宫黏膜上皮变矮变薄,变得有些不规则。灭活疫苗生殖道黏膜接种组母猪子宫黏膜上皮内淋巴细胞数与对照组母猪间差异不显著(P>0.05)。本试验结果显示PRRSV弱毒细胞疫苗经生殖道黏膜免疫接种则对生殖道黏膜上皮内淋巴细胞产生抑制作用。说明PRRSV弱毒细胞疫苗和灭活疫苗经生殖道黏膜免疫效果不理想     

鸭瘟弱毒疫苗诱导IgA、IgM和IgG产生规律的研究

【目的】探讨鸭瘟弱毒苗诱导鸭局部黏膜和系统免疫中抗体发生的规律。【方法】将DPV弱毒苗Cha株经皮下、口服和滴鼻途径免疫20日龄樱桃谷鸭后60 d内定时随机剖杀5只鸭,采集血清、气管和消化道（食道、十二指肠、空肠和直肠）分泌液,应用间接ELISA检测抗DPV的IgA、IgM和IgG抗体滴度（以lg表示）。【结果】所有免疫鸭检测样品中均可检测到DPV特异性IgG、IgM和IgA抗体。血清中抗体滴度由高到低均为IgG、IgM和IgA,其中IgM检出时间最早,IgG存留时间最长。皮下免疫DPV弱毒苗可更早诱导鸭血清中生成特异性IgG,且抗体滴度最高;气管和消化道分泌液中抗体滴度由高到低均为IgA、IgM和IgG,其中IgA和IgM检出时间最早,IgA存留时间最长。口服和滴鼻途径免疫鸭消化道和气管分泌液中IgA滴度较皮下免疫鸭高。【结论】不同途径免疫鸭瘟弱毒疫苗均可迅速诱导免疫鸭体液免疫介导的黏膜免疫和系统免疫。以DPV特异性IgA为主要抗体的黏膜免疫在预防DPV强毒早期对鸭消化道和呼吸道等局部黏膜的感染中具有十分重要的作用,使DPV弱毒疫苗快速产生免疫保护的机制从黏膜免疫的角度得到一定程度解释。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗不同接种途径对母猪生殖道黏膜淋巴细胞分布的影响

16头 5月龄长白×大约克夏二元杂交母猪 ,通过不同途径接种猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)弱毒疫苗 ,采用组织学方法研究其对母猪生殖道黏膜淋巴细胞分布的影响。结果表明 ,与对照组相比 ,鼻腔和肌注接种可使猪子宫角、子宫体和子宫颈黏膜上皮内淋巴细胞的数量极显著增加 (P <0 0 1 ) ,生殖道接种则使淋巴细胞的数量极显著减少(P <0 0 1 )。鼻腔与肌注接种间无明显差异。经生殖道接种疫苗时 ,子宫黏膜上皮变得不规则 ,有些部位上皮变薄。而经鼻腔和肌注接种时 ,黏膜固有层中多见淋巴细胞聚集 ,形成淋巴细胞群 ,并向黏膜腔表面排放。提示不同途径接种PRRSV疫苗对母猪子宫黏膜及上皮内淋巴细胞的分布和组织结构具有显著的影响     

益生菌与ND疫苗协同对雏鸡局部黏膜组织抗体生成细胞数量的影响

为探明益生菌能否增强新城疫(newcastle disease,ND)疫苗局部黏膜组织的免疫效果,雏鸡分别于ND疫苗免疫后第0,7,14,21天及新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)攻击7d后或死亡前,采用免疫组织化学方法测定盲肠扁桃体、哈德氏腺和十二指肠派伊尔结的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量的动态变化.结果发现:益生菌协同ND疫苗组雏鸡局部黏膜的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量分别在免疫后7d明显高于ND疫苗单独免疫雏鸡(P<0.05);NDV攻击后,益生菌ND疫苗免疫雏鸡的局部黏膜组织抗体生成细胞数量无统计学差异(P>0.05),表明益生菌是疫苗的理想佐剂之一.     

非抗性筛选抑制素基因疫苗免疫对奶牛产后子宫复旧的影响

将24头产后7 d的荷斯坦奶牛随机分为4组,高、中、低剂量免疫组(记为T1、T2、T3)分别注射1010、109、108 CFU/mL无抗性基因的抑制素真核表达质粒基因疫苗(重组菌C500(pXAIS))各3 mL,对照组(CK)注射10%生理盐水3 mL。初次免疫28 d后进行加强免疫。用B超诊断仪检测产后奶牛子宫恢复情况。结果表明:加强免疫能提高抗抑制素抗体P/N值,各免疫组P/N值均高于对照组,其中T1和T2组均与对照组差异显著(P0.05),加强免疫7 d,后T1组抗体阳性率最高,达83.33%;抑制素基因疫苗免疫30 d内,前21 d子宫颈和子宫孕角恢复较快,后7 d恢复较慢,各免疫组奶牛产后子宫颈恢复时间短于对照组,但差异不显著(P0.05);各免疫组产后子宫孕角恢复时间比对照组短,且T1组的恢复时间(28.75±1.92)d)与对照组((33.75±1.09)d)差异显著(P0.05)。以上结果表明,在本试验条件下,非抗性筛选的抑制素真核表达质粒基因疫苗免疫产后奶牛,加强免疫后能引起较好的免疫应答,且能促进奶牛产后子宫复旧。     

感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后免疫保护效应及其机理研究

 雏鸡 1日龄人工感染鸡贫血病毒 (CAV) ,于 8日龄接种 L asota疫苗 ,免疫后 2 8d进行新城疫强毒 (v NDV)攻击 ,以同龄未感染 CAV和用 L asota疫苗免疫并经 v NDV攻毒雏鸡为对照 ,检测其免疫保护效应 ,胸腺和脾脏 T细胞数量及 T细胞增殖反应 ,法氏囊和脾脏 Ig G+、Ig M+、Ig A+抗体生成细胞数量 ,血清免疫球蛋白 Ig G、Ig M、Ig A含量 ,血凝抑制抗体 (HI)滴度等。结果表明 ,CAV人工感染并用新城疫 (ND)疫苗免疫雏鸡经 v NDV攻击后的免疫保护率为 6 0 % ,对照组雏鸡 v NDV攻击后免疫保护率为 10 0 % ,胸腺和脾脏 T细胞数量和 T细胞增殖反应、法氏囊和脾脏Ig G+ 、Ig M+ 、Ig A+ 抗体生成细胞数量、血清 Ig G、Ig M、Ig A含量及 HI抗体滴度 ,均较对照组雏鸡显著降低。说明感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后的免疫保护效应及免疫功能明显降低。     

母猪接种PRRS疫苗预防PRRSV垂直传播的效果

用灭活疫苗和减毒活疫苗分别对10头母猪进行免疫.选择20头后代,在20日龄、30日龄、40日龄时分别采集血样进行跟踪监测.结果PRRS的抗体阳性率分别为30%、15%、5%和35%、20%、5%.显示用两种疫苗免疫的母猪后代体内获得性母源抗体水平均不高,且持续时间较短.因此,仅靠对母猪进行免疫难以预防PRRSV的垂直传播.     

Immune Responses to the Attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 Strain Vaccine by Intrapulmonic Immunization in Piglets

To investigate the immune responses to the attenuated Mycoplasma hyopneumoniae 168 strain vaccine, 8-15 d old piglets were immunized with M. hyopneurnoniae 168 strain vaccine by intrapulmonic route. And the specific IgG antibody in serum, lymphoproliferation, IFNT, and specific secretory IgA （SIgA） antibody in bronchoalveolar lavage fluid were detected on 30 and 60 d post-immunization （DPI）, respectively. On 60 DPI, all the pigs except for those in health control group were challenged with a field M. hyopneumoniae strain JS. Necropsy was performed on 30 d post-challenge （DPC）. The results showed that IFN7 and specific SIgA were stimulated on surface of respiratory tract after immunization. And peripheral blood mononuclear cells could also be proliferated about 1.81 and 2.12 fold on 30 and 60 DPI when stimulated by M. hyopneumoniae protein in vitro. However, no serum IgG antibody against M. hyopneumoniae was detected during the whole immune phage. After challenge, vaccinated pigs were observed with only very slight histological lesion in individual lobes. None of vaccinated pigs showed any clinical signs. While the unvaccinated pigs from challenge control group showed varying degrees of clinical sign and severe macroscopical lesion of mycoplasmal pneumonia of swine （MPS）. The result suggested that the attenuated M. hyopneumoniae 168 strain vaccine inoculated by intrapulmonic route could activate the systemic cellular immunity, the local mucosal immunity and IFNγ secretion in respiratory tract to against M. hyopneumoniae infection in piglets.     

猪瘟疫苗免疫后IFN-γ水平的检测

［目的］通过检测猪瘟疫苗免疫后的IFNγ水平探讨仔猪细胞免疫情况。［方法］采用超前免疫和普通免疫2种方法对仔猪进行猪瘟免疫,用流式细胞仪对猪瘟疫苗免疫后仔猪外周血单核细胞（PBMC）中分泌IFNγ细胞数量进行检测。［结果］无论采取哪一种方法进行免疫,仔猪PBMC中分泌IFNγ细胞的比例均显著增多,且一直维持在较高的水平。当在60日龄仔猪进行第2次免疫后分泌时,IFNγ细胞的比例增加更为明显,而对照组仔猪分泌IFNγ细胞的比例在试验过程中则一直维持较低的水平,这说明猪瘟疫苗能够诱导仔猪体内IFNγ水平升高,间接表明猪瘟疫苗注射后激发了机体的细胞免疫应答。［结论］与普通免疫方法相比,采用超前免疫方法能够使仔猪及早地产生针对猪瘟的细胞免疫反应。     

Immune Responses of Chicken Immunized with Marek‘s Disease Vaccines

The experiment was conducted to study the dynamic changes of immune responses of chicks immunized with Marck‘s disease(MD) trivalent vaccine and turkey herpesvirus (HVT)at one day age.Results were found that after immunization of chicks with MD vaccines,the interlcukine-2 (IL-2) inductive activity and IL-2 receptor expression of T cells from thymus and spleen significantly increased.suggesting that the immunoregulative function was markedly enhanced in the immune organs;the number of antibody-producing cells,the number and proliferative function of T cells rose markedly in Bursa Fabricius,Splcen and thymus,indicating that the ccllular and humoral immune responses were elevated remarkablly in the central and peripheral immune organs; the number of T and antibody-producing cells as well as the content of IgG,IgA and IgM obviously mounted in cecal tonsil,Harder ian gland mucosal lymphoid tissucs of bronchus along with tears,trachea washings,bilc and intestinal fluids,demonstrating that the local and mucosal immunity was raised in the respiratory and digestive tract;the levels of immune responses mentioned above in the trivalent vaccine-immuniacd chicks were apparently higher than those of HVT-immunized birds.     

免疫途径对雏鸡分泌型免疫球蛋白A细胞分布的影响

通过饮水、滴鼻和肌肉注射用鸡新城疫弱毒苗免疫雏鸡，以葡萄球菌Ａ蛋白－辣根过氧化酶（ＳＰＡ－ＨＲＰ）和兔抗鸡分泌型免疫球蛋白Ａ（ＳＩｇＡ）间接组化染色，显示消化道相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）和呼吸道相关淋巴组织（ＲＡＬＴ）中ＳＩｇＡ细胞的生成和分布。结果表明：滴鼻和饮水免疫组雏鸡ＧＡＬＴ和ＲＡＬＴ中产生ＳＩｇＡ细胞较早、较多，并于首免后２４ｄ和３０ｄ达到最高峰；肌肉注射组雏鸡ＳＩｇＡ细胞在各相应部位仅零星存在，其数量在整个免疫期间变化不显著。作者还对３种免疫途径与粘膜免疫过程中ＳＩｇＡ细胞的产生、分布、数量变化及其增长与消退规律的影响进行了讨论     

抗猪瘟IgA间接ELISA检测方法的建立及初乳中IgA动态变化规律

以猪瘟弱毒疫苗免疫空怀母猪,待母猪分娩后,分别收集30 d内的初乳和常乳,以建立的间接ELISA法检测抗猪瘟IgA水平,并观察IgA动态变化。试验结果表明,猪初乳中的IgA抗体效价在分娩当天达到最高值,随后迅速下降,7 d后抗体水平与常乳基本一致(P>0.05)。对照组仅在分娩当天检测到较低的抗体水平。