肝纤维化和肝硬化不同阶段细胞因子水平变化

目的：探讨肝纤维化、肝硬化不同分期时细胞因子水平变化及其对肝纤维化、肝硬化的形成、发展的影响。方法：经肝穿刺活检证实慢性乙肝肝纤维化患者30例、肝硬化患者75例。肝纤维化患者按病理标准分期为S1 2例、S2 4例、S3 10例、S4 14例，G1 3例、G2 5例、G3 10例、G4 12例。肝硬化患者按Child-Pugh分级A级28人、B级39人、C级8人。健康人20例作为对照。所有患者肝穿刺活检的同时．取血清测一氧化氟（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、内毒素（LPS）。结果：TNF—α随肝炎程度及肝纤维化程度加重而升高，具等级相关r分别为0．621（P〈0．05）、0．647（P〈0．01）．NO等级相关性r=0．329（P〉0．05）．LPS在肝纤维化阶段尚无明显增高．只是在肝功能Child-Pugh分级B、C级时才明显升高。结论：LPS早期未参与肝病的慢性损伤．在肝硬化时与肝功能损害互为因果；TNF-α在慢性肝炎发展至肝硬化过程中，始终起着重要作用；NO早期未参与肝硬化的形成与发展。     

生三七对肝纤维化小鼠血液流变学的影响

目的观察生三七对肝纤维化小鼠血液流变学的影响.方法复制小鼠中毒性肝纤维化模型,生三七粉灌胃6周,检测全血粘度、血浆粘度、红细胞压积等血液流变学参数,并行肝脏病理组织切片检测.结果与空白对照组比较,肝纤维化模型组小鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积明显增高(P＜0.05,P＜0.01),生三七治疗后小鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积明显降低(P＜0.05,P＜0.01);肝脏病理组织切片显示使用生三七后,肝纤维化程度有明显改善.结论生三七可降低血液粘度,延缓肝纤维化的发展.     

二氢杨梅素对肝纤维化小鼠肝功能的影响

试验旨在研究二氢杨梅素对肝纤维化小鼠肝功能的影响。试验选取小白鼠54只,随机分成空白组、模型组、扶正化瘀胶囊阳性对照组,二氢杨梅素低剂量组、二氢杨梅素中剂量组、二氢杨梅素高剂量组,测试不同剂量二氢杨梅素对肝纤维化小鼠肝功能的影响。结果表明:二氢杨梅素能缓解四氯化碳导致的肝损伤,低剂量二氢杨梅素对于ALT较佳,高剂量二氢杨梅素对于AST较佳;二氢杨梅素能够在一定程度缓解肝细胞纤维化,但是并不能完全防止肝纤维化。二氢杨梅素可以调节肝功能,能明细降低ALT、AST的水平,有显著的保肝护肝功效,同时,二氢杨梅素对于肝纤维化有一定的疗效。     

纤维化肝窦内皮细胞中基因表达的研究

按照肝脏受 TAA损伤的程度把试验动物 Wistar大白鼠分为两组 ( TAA- 1和 TAA- 2 )。Northern杂交分析表明 ,在 TAA- 1的窦内皮细胞中 ,bcl- x和 bax基因的表达水平轻微降低 ;随着肝损伤的增加 ,表达水平再度下降。核 Run- off转录分析表明 ,两组的窦内皮细胞、总的 RNA合成率下降约 30 %( P<0 .0 0 1 ) ;TAA- 1、bad、bax和 cyclin E的 m RNA合成有所降低 ,而 cyclin A的 m RNA合成则明显增加 ;TAA- 2、bad、bax和 bcl- 2的 m RNA合成增加了 2～ 3倍 ,bcl- x的 m RNA合成增加了 7倍多     

姜黄素抑制氧化应激减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾脏间质纤维化

为研究姜黄素对单侧输尿管阻塞大鼠肾间质纤维化可能的干预机制。将SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、对照组(UUO)、UUO+50 mg·kg~(-1)姜黄素组,UUO+75 mg·kg~(-1)姜黄素组,每组6只,均于手术当天晚上灌胃给药,每24 h给药1次。第14天处死取肾组织,Masson染色光学显微镜下肾脏组织病理变化、试剂盒检测肾组织匀浆液丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽S转移酶(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力;RT-PCR法检测核转录相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO-1)mRNA表达。结果表明:与Sham组比较,UUO组和姜黄素干预组MDA含量均升高,GSH、SOD、CAT活力均显著降低,Nrf2和HO-1 mRNA表达显著升高;UUO组与姜黄素干预组比较,姜黄素干预组MDA含量显著降低,GSH、SOD、CAT显著升高,Nrf2和HO-1 mRNA表达显著升高;UUO组肾小球球囊间隙增大,排列紊乱,胶原纤维增多,明显纤维化变性,姜黄素干预组病理表现较UUO组明显减轻。姜黄素能减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾脏间质纤维化,其机制可能是通过诱导肾组织Nrf2表达,上调HO-1、SOD等抗氧化酶水平,提高肾组织抗氧化应激水平。     

白头翁皂苷抗小鼠血吸虫病肝纤维化的试验

[目的]研究白头翁皂苷经腹腔注射给药对血吸虫病肝纤维化的作用机制。[方法]将30只C57BL/6雌性小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组和白头翁皂苷组,每组10只。血吸虫感染40条尾蚴6周后,阴性对照组、阳性对照组腹腔注射0.9%生理盐水,白头翁皂苷组腹腔注射白头翁皂苷注射液。感染8周后,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;称取小鼠体重及肝重;免疫组化观察肝组织α-SMA表达。[结果]白头翁皂苷组小鼠的体重、肝重、ALT及AST含量与阳性对照组比较均有统计学意义,白头翁皂苷组肝脏α-SMA表达明显低于阳性对照组。[结论]白头翁皂苷经腹腔注射给药可明显减轻日本血吸虫病所引起的肝纤维化程度。     

氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎后肝纤维化的疗效观察

目的：观察氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效。方法：43例慢性乙型肝炎随机分为治疗组22例与对照组21例，治疗组采用氧化苦参碱与常规药物联合治疗。对照组仅采用常规药物治疗．疗程24周。用酶联免疫法测定HBeAg，聚合酶链免疫护增法测定HBV-DNA，用放射免疫法测定治疗前后血清透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（CIV）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）水平。结果；治疗组HBeAg转阴率36．4％（8／22）．HBV—DNA转阴率54．5％（12／22）。血清HA、LN、CIV及PCⅢ明显降低（P〈0．01）。结论：氧化苦参碱有较好的抗乙型肝炎肝纤维化作用。     

大豆异黄酮干预肥胖大鼠肝氧化应激及炎症反应

本研究旨在探究不同剂量大豆异黄酮(soy isoflavones,SIF)干预肥胖大鼠后肝的氧化应激及炎症反应情况。准备80只SD大鼠,普通饲料喂养16只SD大鼠做空白对照;高脂饲料喂养64只SD大鼠9周建立肥胖大鼠模型,将64只模型大鼠随机分成4组,每组16只,大豆异黄酮(0、150、300、450 mg·kg^-1)灌喂,每周定期测量体重,连续干预4周。取肝脏组织,苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色观察肝脏组织形态学结构;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;荧光定量PCR方法检测肝脏组织中促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。组织病理学发现,肥胖大鼠出现典型的肝细胞脂肪变性伴肝组织炎性损伤,肝SOD、CAT和GSH-Px水平降低,IL-6、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平升高。大豆异黄酮干预后,各剂量组肝组织病理损伤得到改善,抗氧化因子活性显著提高并呈剂量效应,促炎因子表达水平显著下调。大豆异黄酮可逆转肥胖致肝组织病理损伤和提高肝脏抗氧化活性,下调肥胖相关促炎因子基因的表达,上述结果可为大豆异黄酮的应用开发提供参考。     

血吸虫病肝纤维化并发胆囊异位的B超诊断及分析

目的探讨血吸虫肝纤维化并发胆囊异位的声像图特征及发生机理.方法对323例血吸虫病肝纤维化病例的声像进行回顾性分析.结果有12例(3.7%)并发胆囊异位,其声像图有共同特征.结论这类胆囊异位是并发在血吸虫病肝纤维化的病理基础上的,对于这类胆囊异位的探查、诊断及分析在临床诊断中可以减少漏诊、误诊的发生.     

超声造影分析评估血吸虫病肝纤维化程度的初步探讨

目的：：利用超声造影分析评价血吸虫肝纤维化程度。方法：对临床诊断的血吸虫病患者40例进行超声造影,根据超声造影剂到达肝动脉、门静脉、肝实质及肝静脉的时间,计算肝动静脉渡越时间(HA-HVTT),门静脉肝静脉渡越时间(PV-HVTT)及肝实质肝静脉渡越时间(PA-HVTT),分析其差异及相关性。结果：造影剂到达 HA-HVTT、PV-HVTT 和 PA-HVTT 随血吸虫病的肝纤维化严重程度的增加而缩短,与肝纤维化程度呈负相关。结论：超声造影对评估血吸虫病肝纤维化程度有重要临床意义。     

茅莓中表儿茶素的含量测定研究

目的探讨表儿茶素(EC)对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠氧化应激和炎症的调节作用。方法采用气管滴注法建立ALI模型,通过测定肺组织湿干质量比(W/D)评估其水肿程度,检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)和蛋白质羰基的含量以评估其体内抗氧化损伤的作用,检测小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的含量、肺组织内一氧化氮(NO)的含量以及磷酸化的P38分裂原激活的蛋白激酶(P38)、细胞外信号调节激酶(ERK)和c-jun N端激酶(JNK)的表达水平评估其抗炎症作用。结果EC (40 mg/kg)预处理能降低ALI小鼠的肺组织的W/D值和水肿程度,提高CAT、GSH-Px和SOD等酶的活性,降低MDA和蛋白质羰基的含量提升其体内抗氧化活性,降低IL-1β、IL-6、TNF-α和NO的含量并降低肺组织p-JNK/JNK (P<0.05)、p-ERK/ERK (P<0.01)和p-P38/P38 (P<0.01)的比值。结论EC可以调节氧化应激和炎症反应改善小鼠的ALI。     

硫化氢对盐碱胁迫下裸燕麦光合生理的影响

【目的】研究硫化氢(H₂S)对盐碱胁迫下裸燕麦光合生理的影响,为揭示H₂S增强裸燕麦耐盐碱性机理提供理论依据。【方法】以盆栽砂培裸燕麦品种‘定莜9号’为材料,在抽穗期灌根施用50 mmol/L的盐碱溶液,同时喷施50 μmol/L H₂S供体硫氢化钠(NaHS)溶液或结合灌根施用1 mmol/L H₂S合成抑制剂羟胺(HA),研究H₂S对盐碱混合胁迫下裸燕麦叶片叶绿素含量、光合气体交换参数、叶绿素荧光参数、叶黄素循环色素含量和相关基因相对表达量、卡尔文循环关键酶活性及植株生长的影响。【结果】盐碱混合胁迫下,喷施NaHS可显著缓解裸燕麦叶片光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、蒸腾速率(T_r)、气孔限制值(L_s)、水分利用效率(WUE)的下降和胞间CO₂浓度(C_i)的提高;显著提高光化学淬灭系数(qL),紫黄质脱环氧化酶(VDE)和玉米黄质环氧化酶(ZEP)基因相对表达水平以及转酮醇酶(TK)活性;降低紫黄质(V)、单环氧玉米黄质(A)、玉米黄质(Z)含量和叶黄素循环的脱环氧化状态(A+Z)/(V+A+Z)以及1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活化酶(RCA)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)和景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)活性;缓解裸燕麦根系和地上部干质量的下降幅度;而对裸燕麦叶片叶绿素含量、初始荧光(F_o)、最大荧光(F_m)、最大光化学量子产量［(F_m-F_o)/F_m］、实际光化学量子产量［Y(Ⅱ)］、非光化学淬灭系数(NPQ)、非调节性能量耗散量子产量［Y(NO)］、调节性能量耗散量子产量［Y(NPQ)］和相对电子传递速率(ETR),以及1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)和果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)活性无显著影响。增施HA后部分或完全逆转了上述喷施NaHS的作用。【结论】H₂S通过加快叶黄素循环运转、提高光系统Ⅱ反应中心开放程度、协调卡尔文循环关键酶活性,缓解盐碱胁迫对裸燕麦光合作用和生长的抑制作用,从而增强裸燕麦耐受盐碱胁迫的能力。     

外源硫化氢对水分胁迫下玉米种子萌发和生长的影响

采用发芽试验,研究了外源硫化氢对水分胁迫条件下玉米种子萌发和生长的影响。结果表明:水分胁迫显著降低了玉米种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、根长、株高、侧根条数、根系和地上部分鲜重,显著增加了相对伤害率;与水分胁迫处理相比,外源硫化氢处理则显著提高了水分胁迫条件下玉米种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、根长、株高、根系和地上部分鲜重,显著降低了相对伤害率,但对侧根条数没有影响。说明在水分胁迫下,外源硫化氢处理可以促进玉米种子的萌发和生长。     

虾青素对小鼠肝脏原代细胞氧化应激的影响

【目的】研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝脏原代细胞产生氧化应激的影响。【方法】原位二步灌流法提取ICR小鼠的肝脏原代细胞,用丙二醛(Malondialdehyde,MDA)作为指标、采用H_2O_2处理建立氧化应激模型。采用流式细胞仪测定细胞中活性氧(Reative oxygen species,ROS)含量及凋亡水平变化,生物化学法测定细胞中MDA和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性,用荧光定量PCR检测抗氧化酶SOD、GSH-px mRNA的相对表达量,Western-blot检测细胞核中Nrf2蛋白相对表达量。【结果】使用5μg·mL~(–1)虾青素预保护细胞3 h,10μmol·L–1H_2O_2刺激3 h的情况下氧化应激模型效果最好。虾青素降低了H_2O_2诱导后小鼠肝脏原代细胞的细胞凋亡率以及ROS、MDA和GSH含量,提升了SOD、GSH-px的活性以及SOD、GSH-px的mRNA相对表达量,抑制了Nrf2蛋白的核转移。【结论】虾青素对H_2O_2诱导产生氧化应激的肝脏原代细胞具有保护作用。     

外源硫化氢对干旱胁迫下萌发水稻种子抗氧化代谢的影响

[目的]探讨外源硫化氢(H2S)对干旱胁迫下萌发水稻种子抗氧化代谢的影响及水稻抗旱性内在机制,为提高水稻抗旱能力提供参考依据.[方法]以0.75 mmol/L硫氢化钠(NaHS)为外源H2S供体,用聚乙二醇(PEG)为干旱胁迫模拟剂,以羟胺(HA)为H2S合成抑制剂,检测干旱胁迫下外源H2S处理后水稻种子的发芽率、发芽势、相对电导率和丙二醛(MDA)、可溶性蛋白、过氧化氢(H2O2)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性.[结果]干旱胁迫下,经NaHS处理的水稻种子发芽率为82.30%、发芽势为43.10%,均显著高于未经NaHS处理的种子(P<0.05);可有效阻止水稻种子可溶性蛋白含量减少,降低渗透势,缓解干旱胁迫引起的伤害;可有效缓解水稻种子中H2O2的累积,有利于减缓细胞衰老和解体;可较好地维持水稻种子萌发过程中质膜的稳定性,有利于减轻干旱引起的伤害;可有效降低水稻种子的MDA含量,降低质膜透性;可促进水稻种子萌发过程中SOD、POD、CAT和APX活性的增加,提高萌发水稻种子应对干旱的能力.[结论]经外源H2S供体NaHS处理可显著提高水稻种子的抗氧化酶活性,有效清除活性氧,降低质膜透性,缓解氧化伤害,提高水稻种子的抗旱性,最终有效促进干旱胁迫下水稻种子萌发.     

外源硫化氢处理对番茄生长发育的影响

[目的]作为被普遍认可的第三种气体信号分子,硫化氢(H_2S)在植物的生长发育及信号传递等方面具有重要的作用。[方法]以番茄MicroTom为试验材料,用不同的H_2S浓度(0、10、50、100、500、1 000μmol·L~(-1))及H_2S合成抑制剂羟胺(HA)进行处理;用50μmol·L~(-1) H_2S对相同状态下的番茄幼苗进行不同方法的熏蒸(3h·d-1或6h·2d-1),测量幼苗生长和光合作用的相关指标。[结果]H_2S处理浓度为50μmol·L~(-1)时可对植物的生长发育起到促进作用。对番茄种子或幼苗进行外源H_2S处理,可以显著促进种子的萌发及下胚轴的伸长;普遍延长番茄生命周期,显著增加叶片净光合速率、蒸腾速率及气孔导度;显著增强植物合成H_2S的能力,增加叶片中的H_2S含量;且以上结果与产生H_2S的相关酶编码基因LCD表达水平相关。[结论]综上,外源施加适宜浓度的H_2S,可以影响番茄的生长发育活力和光合作用能力,促进内源H_2S的合成。     

高热量饲料结合慢性应激致大鼠非酒精性 脂肪肝病变过程的研究

为观察不同作用时间下非酒精性脂肪肝(NAFLD)相关因子的改变,研究高热量饲料结合慢性应激促进NAFLD病变的过程,将64只雄性大鼠分为正常对照组、高热量饲料(HFSD)组、慢性应激(EFNS)组及高热量饲料结合慢性应激(HFSD+EFNS)组。8周后,每组随机取8只动物,作为第1批实验动物;14周后,余下每组8只动物作为第2批实验动物,检测胰岛素抵抗、血液及肝组织脂质、氧化应激状态、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及基因表达,计算肝指数。另外,取肝脏做病理切片,比较各组肝组织病理改变程度。结果显示,8周后大鼠出现胰岛素抵抗、脂质紊乱、氧化应激、炎症状态及肝指数增加。2种刺激只对肝脂质代谢紊乱有交互作用。14周后,大鼠NAFLD进一步恶化,对脂质紊乱、肝脂质代谢、炎症、氧化应激状态均有协同作用,肝组织切片也显示出现脂肪性肝炎。高热量饲料结合慢性应激促进NAFLD有一个发展过程,14周后能够诱导大鼠非酒精性脂肪肝模型的形成。     

硫化氢和一氧化氮在平邑甜茶幼苗抵抗镉胁迫中的作用

【目的】探究气体信号分子H₂S和NO在平邑甜茶幼苗抵抗镉胁迫中的调节作用和相互影响,为果树抗逆应用研究提供参考。【方法】以平邑甜茶幼苗为供试材料,采用营养液培养法,以正常Hoagland营养液为对照（CK）,在Cd胁迫条件下,分别通过外源施加H₂S供体硫氢化钠（NaHS）或清除剂亚牛磺酸（HT）和外源NO供体硝普钠（SNP）或清除剂Carboxy-PTIO盐（c-PTIO）,共计8个处理,分别为CK、Cd、Cd+NaHS、Cd+NaHS+HT、Cd+NaHS+c-PTIO、Cd+SNP、Cd+SNP+c-PTIO和Cd+SNP+HT,观测幼苗生长情况的变化,分析幼苗叶片叶绿素含量、叶绿素荧光参数和根系细胞死亡数量、呼吸速率、呼吸代谢关键酶活性、O^-·₂产生速率、H₂O₂含量以及抗氧化酶活性等的变化。【结果】与CK相比,单独Cd胁迫明显抑制平邑甜茶幼苗的生长,导致叶片光合能力下降;根系细胞大量死亡,活性氧积累,SOD、POD、CAT活性增加,呼吸速率下降,呼吸代谢关键酶PFK、MDH活性降低,而G-6-PDH活性升高。与单独Cd胁迫处理相比,Cd+NaHS和Cd+SNP处理平邑甜茶叶片叶绿素a、叶绿素b含量分别提高了22.84%,29.66%和16.29%,29.52%;潜在光化学活性（F_v/F_o）、最大光化学效率（F_v/F_m）和实际光化学效率（ΦPSⅡ）均显著升高;根系呼吸速率增加了46.33%和44.93%,PFK、MDH活性提高了11.29%,27.17%和13.70%,17.48%,G-6-PDH活性降低了13.82%和16.98%;根系O^-·₂产生速率降低了37.75%和35.74%,H₂O₂含量降低了27.49%和26.66%,SOD、POD和CAT活性显著提高了41.52%,82.22%,49.29%和34.87%,98.90%,78.72%。Cd胁迫条件下,外源H₂S和NO均能抑制根系细胞死亡,促进幼苗生长。而添加NO清除剂c-PTIO抑制了外源H₂S和NO对平邑甜茶幼苗镉损伤的缓解,添加H₂S清除剂HT仅能抑制外源H₂S的保护效应,对外源NO的作用基本无影响。【结论】平邑甜茶幼苗遭受镉胁迫时H₂S和NO有交互作用,推测H₂S的产生先于NO。