Peatl蛋白及其3个缺失突变体的表达与热稳定性分析

从极细链格孢菌中提取出一种植物激活蛋白,后命名为Peatl,其分子量为35 kD。该蛋白具有良好的热稳定性。生物信息学分析显示,Peatl含有2个保守结构域,即NAC（Nascent polypeptide-associated complex）和UBA（Ubiquitin-associated）结构域。该文将Peatl在E.coli中进行克隆和表达,并构建3个缺失突变体,拟对赋予Peatl热稳定性的区域进行初步定位。     

Peat1蛋白及其3个缺失突变体的表达与热稳定性分析

[目的]为揭示Peat1蛋白序列(含1个NAC结构域和1个UBA结构域)各片段在该蛋白热稳定性上的作用。[方法]构建了Peat1蛋白及其3个缺失突变体的融合表达载体,经IPTG诱导表达的目标蛋白,对所得蛋白经AKTA亲和纯化和热稳定性分析。[结果]与Peat1一样,3个缺失突变体蛋白(Peat1、Peat1-△CD99、Peat1-△ND49和Peat1-△ND108)都具有良好的热稳定性。[结论]说明NAC或UBA结构域对Peat1蛋白的热稳定性不是同时必需的,可能它们都有单独赋予蛋白某种特殊稳定结构的作用。     

Peat1蛋白及其3个缺失突变体的表达与热稳定性分析

从极细链格孢菌中提取出一种植物激活蛋白,后命名为Peat1,其分子量为35kD。该蛋白具有良好的热稳定性。生物信息学分析显示,Peat1含有2个保守结构域,即NAC(Nascentpolypeptide-associated complex)和UBA(Ubiquitin-associated)结构域。该文将Peat1在E.coli中进行克隆和表达,并     

Peat1蛋白及其3个缺失突变体的表达与热稳定性分析（英文）

[Objective] The research aimed to reveal the functions of NAC and UBA domains in Peat1's thermal stability.[Method] Fusion expression vectors of Peat1 protein and the 3 deletion mutants were constructed.The recombinant plasmids were induced by IPTG and the target proteins(Peat1,Peat1-△CD99,Peat1-△ND49 and Peat1-△ND108)were expressed obtained by AKTA and its thermal stability was analyzed.[Result] The research found that 3 deletion mutants have good thermal stability like Peat1.[Conclusion] The research demonstrated that the coexistence of NAC or UBA domains is not necessary to thermal stability of Peat1 protein,and they may give the protein particular stability structure seperately.     

绿色荧光蛋白及其突变体的特征与应用

就GFP及其突变体的性质和GFP作为报告基因,在基因表达、蛋白质定位、蛋白质互作等方面的应用进行了综述。。     

细极链格孢菌蛋白激发子对棉花纤维品质的影响

探讨了激活蛋白对棉纤维品质主要指标的影响.结果表明,用细极链格孢菌蛋白激发子喷施棉株,纤维各个指标都能得到明显的改善,即能显著提高纤维长度、整齐度、比强度、反射率、伸长率、纺纱均匀指数等指标,降低纤维黄度和麦克隆值.     

云南省烟草赤星病(Tobacco brown spot)病原研究及其防治药剂的筛选

对云南省烟草赤星病１２个代表菌株进行培养性状、形态特征和致病力测定以及防治药剂筛选。结果表明：它们属于长柄链格孢菌和链格孢菌,以后者居多。两者的菌落形态相似,温度反应一致;最低,最适,最高生长温度分别为５℃,２４℃－２８℃和３６℃,大多数链格孢菌的致病力比长柄链格孢菌致病力强。保鲜剂西爱是一种高效无毒无残留的理想防治药剂。     

蛋白激发子产生菌链格孢(Alternaria spp.)JH505菌株分子系统学研究

在传统真菌形态学分类研究的基础上,运用遗传学、分子生物学研究手段,结合生物信息学方法对具有诱导植物增产抗病的蛋白激发子产生菌链格孢(Alternaria spp.)JH505菌株进行了分子系统学研究.克隆了该菌株长度为1 267bp的rDNA序列.结果表明,rDNA包含部分18S rRNA、28S rRNA序列及完整的5.8S rRNA、转录外间隔区(ITS1、ITS2)rRNA序列,与A.tenuissima、A.cinerariae、A.dianthi、A.brassicae、A.zinniae相应的rDNA分别具有100%、98%、97%、97%和96%的相似性.结合菌落形态、孢子特征以及rDNA分析.鉴定该菌株为细极链格孢菌(A.tenuissima).     

细极链格孢菌蛋白激发子对棉主要性状及相关酶的影响

为了给细极链格孢菌蛋白激发子的田间使用提供依据,测定了其粗提蛋白液对棉主要性状及相关酶活性变化影响的相关数据。结果表明:细极链格孢菌蛋白激发子诱导后显著提高了棉成铃数,且不同程度提高了株高、单铃重、衣指、子指和衣分,降低了单铃壳重,特别是促进了棉花早熟,获得了较高的产量。以浸种处理的籽/皮棉产量最高,分别达到3 800.60和1 598.15 kg/hm2,比对照提高了22.15%和26.11%;纤维的主要品质性状指标与对照间差异均达到了极显著水平,浸种 现蕾期喷雾处理的综合值比对照提高6.1%,为最高;诱导后POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)及NR(硝酸还原酶)的酶比活性增强,其中POD酶比活性均值最高为(502.00±1.10)μmol/(g.min),SOD为(378.36±0.43)μmol/(mg.min),NR为(168.96±2.30)μg/(g.h);而MDA(丙二醛)含量降低,最低为(2.814±0.090 9)μmol/g。     

一株灰葡萄孢黑色素缺失突变体的获得及其生物学特性

黑色素是许多植物病原真菌致病因子,为明确灰葡萄孢黑色素在致病及抗逆过程中的作用,本试验采用PEG介导的原生质体转化的方法获得了1个黑色素缺失突变体,并通过基因扩增及分子杂交对其进行鉴定。对突变菌株的致病力进行测定,结果显示突变菌株的致病力明显下降,并且与野生型相比突变菌株的生长速度下降和对紫外线敏感性加强。说明黑色素在灰霉致病性及抗逆中起关键作用,这为今后以灰霉黑色素为靶位点设计杀菌剂进行防治奠定了基础。     

一种蛋白激发子产生菌细极链格孢菌的生物学特性研究

[目的]探讨蛋白激发子产生菌链格孢菌的基本生物学特性。[方法]研究不同温度、湿度、pH值、碳源及氮源对该菌菌丝生长及分生孢子萌发的影响。[结果]该菌菌丝生长最适温度28℃,最适pH值7~8 孢子萌发的最适温度28℃,最适相对湿度98%,最适pH值7~8。葡萄糖为最适碳源,最适氮源为蛋白胨,硫酸胺和氯化胺等会抑制菌丝生长。[结论]中温高湿环境利于链格孢菌的生长及孢子萌发,不同营养条件对该菌菌丝生长有显著影响。     

西瓜专化型尖孢镰刀菌FonSIX6缺失突变体的构建

病原菌和植物相互作用时分泌效应蛋白（effectors）抑制植物的防卫反应。枯萎病是由尖孢镰刀菌引起的真菌病害,尖孢镰刀菌和寄主相互作用时分泌几个特定的富含半胱氨酸的小分子量蛋白（15.8～29.9 kD）进入木质部启动致病力,称为SIX（secreted in xylem）蛋白,其中,SIX6蛋白是一个效应蛋白。西瓜枯萎病是由西瓜专化型尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f. sp.Niveurn,Fon）引起的真菌病害。为了明确FonSIX6在侵染西瓜时的作用,克隆了该基因的上下游序列,以潮霉素为筛选标记构建了该基因的缺失突变体载体pDH\|SIX6;将构建好的基因缺失载体转入农杆菌AGL\|1中,通过农杆菌介导的遗传转化和转化子的筛选获得了FonSIX6基因的缺失突变体。     

细极链格孢菌蛋白激发子对棉株光合特性的影响

以湘杂棉3号F1为对象,用Li-6400光合作用测定仪测定了细极链格孢菌蛋白激发子(PEAT)诱导下的光合速率、气孔导度、蒸腾速率、外界光合作用有效辐射等指标.结果表明,PEAT诱导可以提高棉花生长功能叶的叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、外界光合作用有效辐射等,延缓叶片的衰老和光合功能衰退,延长了叶片的光合功能期,使光合速率维持在一个较高的水平.     

天然低谷蛋白水稻突变体的筛选

以初步筛选出的10份低谷蛋白含量水稻种质为材料,经SDS-PAGE测定发现：细老鼠牙的谷蛋白含量明显低于对照品种W3660,冷水糯、迟白谷的谷蛋白含量与对照相似。经考马斯亮蓝G．250法测定：迟白谷、细老鼠牙、冷水糯这3个品种与对照品种W3660,谷蛋白在总蛋白中的含量分别为42．33％、43．96％、37．71％、46．42％。低谷蛋白含量水稻种质可以为功能稻的培育和研究提供重要的物质基础。     

增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP在大肠杆菌中的表达与纯化

增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP(EGFP／V163A／S175G)是一种发光能力更强、更稳定的新型绿色荧光蛋白。为了获得大量高纯度的蛋白,将mUT4EGFP基因插入原核表达载体pTWINl中,使之与几丁质结合域(CBD)-内含肽(intein)融合,获得原核表达质粒pTWIN-M4。将pTWIN-M4转化大肠杆菌BL21(DE3)plyss,IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示,CBD-intein-mut4EGFP融合蛋白在BL21(DE3)plysS中获得高效表达并以可溶性蛋白的形式存在。进一步采用几丁质柱纯化系统对表达产物进行纯化,得到了高纯度的mut4EGFP．     

筛选水稻贮藏蛋白突变体的方法研究

根据水稻种子及其贮藏蛋白特性 ,结合普通实验室条件 ,对分离水稻种子全蛋白及其各蛋白组分的方法进行改进 ,建立了筛选水稻种子贮藏蛋白突变体的新方法。讨论了抽提水稻种子全蛋白时试剂加入的最佳方式以及各蛋白组分分级分离时的最佳条件。新方法简便易行 ,快速高效 ,重复性好。将该法用于种子资源库筛选 ,得到了较满意的结果。     

交链格孢菌EST-SSR信息分析与分子标记通用性评价

为了弄清交链格孢菌(Alternaria alternata) EST数据库中的SSR信息资源,并开发可用于研究近缘种细极链格孢(Alternaria tenuissima)遗传多样性的EST-SSR分子标记。从NCBI数据库下载A.alternata表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)共727条,经过研究分析发现,A.alternata EST中SSR含量非常丰富,每5.343 kb含有1个SSR位点。根据SSR两端保守序列,设计合成13对EST-SSR引物,对来自新疆不同地区不同寄主的38株A.tenuissima进行通用性检测。检测结果显示共有5对引物能扩增出多态性条带,扩增多态率为55.56%。因此,基于A.alternata EST数据库开发的SSR分子标记,在开展近缘种A.tenuissima遗传多样性研究时具有较好的通用性。     

甜瓜抗链格孢侵染病程相关蛋白及苯丙烷代谢酶的变化

【目的】分析常温贮藏期间(25℃)不同甜瓜果皮与果肉组织病程相关蛋白和苯丙烷代谢相关酶的差异,探究甜瓜在常温贮藏下的内源抗病性。【方法】甜瓜果实损伤接种链格孢,贮藏期间分离甜瓜果实外果皮、内果皮和果肉组织,测定不同贮藏天数时甜瓜不同组织的病程相关蛋白和苯丙烷代谢相关酶,分析其不同组织抗病能力的差异性,分析不同贮藏温度对甜瓜抗病性的影响。【结果】贮藏期间伽师瓜的病斑直径小于86-1甜瓜,染菌后16 d, 86-1甜瓜的果皮和果肉病斑分别是伽师瓜的1.55倍和1.38倍;在此期间甜瓜内几丁质酶(Chitinase, CHT)、β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-Glucan, GLU)、甜瓜4-香豆酰辅酶A连接酶(Coumaroyl-CoA,4CL)、苯丙氨酸解氨酶(L-Phenylalanin Ammo-Nialyase, PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(Cinnamic Acid 4-Hydroxylase, C4H)活性呈先升高后下降趋势,伽师瓜酶活性高于86-1甜瓜,两种甜瓜的酶活性均为外果皮>内果皮>果肉组织,伽师瓜比86-1甜瓜更快到达酶活性高峰。【结论】损伤接种链格孢...     

细极链格孢菌蛋白激发子对棉花种子萌发及幼苗生长的影响

探讨了激活蛋白对棉花种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,蛋白激发子处理棉种能促进棉种萌发,提高发芽率,尤以处理浓度3μg/mL,浸泡6h的处理效果最好。激活蛋白能明显促进根系发育,表现为根重增加、根长增长、茎增粗。     

细极链格孢菌蛋白激发子对棉花种子萌发及幼苗生长的影响

探讨了激活蛋白对棉花种子萌发及幼苗生长的影响.结果表明,蛋白激发子处理棉种能促进棉种萌发,提高发芽率,尤以处理浓度3μg/mL,浸泡6 h的处理效果最好.激活蛋白能明显促进根系发育,表现为根重增加、根长增长、茎增粗.