大豆果实发育过程中荚皮和种子超氧化物岐化酶同工酶的变化

大豆荚皮中具有至少9条SOD同工酶带:Mn—SODa_1、a_2;Cu—Zn—SODb_1、b_2、b_3;Cu—Zn—SODc_1、c_2、c_3及与澳酚兰前沿混在一起的一条酶带。在果实发育过程中荚皮各酶带没有发育先后顺序的差异,只是酶带强弱的程度稍有变化。种子也至少有9条酶带,但c_3与溴酚兰前沿混在一起。发育过程申各同工酶出现的顺序有差异,最先出现的是a_1带,最后出现的是c_3带。果实发育各期荚皮SOD的各条同工酶带均比种子中相应的酶带活性强。实验表明:电泳方法的改进将会分离出更多的SOD同工酶带。     

O3浓度升高和UV-B辐射增强对大豆叶片抗氧化酶活性及POD同工酶的影响

以大豆品种铁丰29为材料,利用开顶式气室(OTCs)研究了O3浓度升高和UV-B辐射增强单独胁迫及复合胁迫下大豆叶片抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性及POD同工酶谱带的变化.结果表明:O3处理大豆叶片SOD、CAT和POD活性均低于对照;UV处理下,大豆叶片SOD、CAT、POD活性也均低于对照,但基本高于O3处理;O3及UV复合处理下,加剧了SOD、CAT、POD活性的减弱.对POD同工酶研究发现,在分枝期,O3处理产生Ⅰ条新谱带,开花期和结荚期均比分枝期多2条谱带,并且受胁迫处理的POD酶谱带与对照相比颜色较浅,说明在整个生育期,胁迫处理下的大豆叶片POD同工酶活性受到抑制.     

超氧物歧化酶在大豆不同节位叶片和种子中的分布

大豆不同节位叶片中的超氧物歧化酶(SOD)、同工酶酶谱相同,但活性差异明显,中部叶片的酶活性高于上部和下部的叶片.SOD同工酶在不同节位叶片中的分布有差异,SODa(Mn—SOD)在中下部叶片中占的比例较大,SODb_1b_2b_3(Cu—Zn—SODb)随着叶片节位的升高而增加,SODc_1c_2c_3(Cu-Zn-SODc)在分枝叶片中活性较高.SOD在不同节位种子中的分布不同,下部种子SOD活性最高,随着结荚部位升高SOD活性降低,至植株顶端又有所增加.     

萌发过程中野生大豆(G. soja)和栽培大豆(G.max)超氧物岐化酶的变化

对萌发过程中野生和栽培大豆SOD同工酶分析表明:1.供试野生大豆和栽培大豆的SOD同工酶谱带明显不同,野生大豆含有M_n—SOD_a、C_u—Z_n—SODb_1b_2b_3和C_u—Z_n—SODc_1c_2c_3,栽培大豆缺失C_n—Z_n—SODb_1b_2谱带,而且两种类型的C_u—Z_n—SODc_1c_2c_3谱带的迁移率也不完全一致。2.萌发过程中,以单位鲜重计算的SOD活性的变化进程为,萌发初期迅速降低,然后逐渐增加。3.萌发过程中,SOD活性及活性的变化程度均表现野生大豆>栽培大豆。     

橡胶种子超氧物歧化酶及其同工酶的研究

橡胶种子提取液对氮蓝四唑(NBT)的光化还原起抑制作用,说明橡胶种子中有超氧物歧化酶(SOD)的存在。以SOD的活性而言,橡胶种子中以胚为最高,而幼苗却以芽为最高。用激素处理的橡胶种子,其SOD活性有所提高,以乙烯利较为明显。经聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明,橡胶种子粗提取液其SOD具有7～8条同工酶谱带,而且种子各组成部分及幼苗各组成部分,其同工酶的活性及酶谱带数目都有较明显的差异。用氯仿——乙醇及氰化钾对橡胶种子的胚、子叶和外胚乳的处理,证明它们的同工酶谱带中,迁移率较低的五条谱带属于Mn—SOD类型,而迁移率较高的三条谱带属于Cu—ZnSOD类型。用不同pH、不同温度及各种变性剂处理橡胶种子外胚乳提取液,其结果是SOD活性以及同工酶谱带数目都发生明显变化,表明橡胶种子SOD适应于偏碱性,且较耐高温,变性剂能使SOD发生降解甚至活性消失。     

油菜超氧物歧化酶活性及其同工酶的研究

本文探讨了油菜苗期植物体内超氧物歧化酶(SOD,Ecl.15.1.1)和过氧化氢酶局性与品种抗寒性的关系以及SOD活性及其同工酶,维生素C和丙二醇(MDA)含量在叶片自然衰老过程中的变化.实践结果表明:在低温(4℃)下,SOD和过氧化氨酶活性比在常温(25℃)下分别提高5—20.13％和6—51％.抗寒性强的品种提高较大. 油菜叶片在其自然衰老过程中,伴随着SOD活性和维生素C含量下降,MDA含量显著增加.油茶叶片SOD活性可被KCN抑制,但不受氯仿—乙醇影响,表明油菜叶片SOD为Cu一Zn—SOD.样品的提取液经聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳及用氮蓝四唑(NBT)的酶活性染色,稀水油菜白和甘油5号各有4条谱带,腊油菜(陕西)有6条谱带.     

含ipt融合基因的根癌农杆菌转化大豆萌动种胚的研究─Ⅰ苗期子叶的同工酶分析

本实验以大豆萌动种胚为受体，用含有３５Ｓ启动子—Ｇｕｓ基因—ｉｐｔ基因—Ｎｏｓ基因的融合基因根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４进行转化。通过对转化及对照植株苗期子叶的过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶分析，结果表明酶谱有明显差异，过氧化物酶同工酶有两条差异带：Ｒｆ０．５０９及Ｒｆ０．７１２；酯酶同工酶有一条差异带：Ｒｆ０．５３１。综合分析，上述三条差异带都显示的转化植株占所分析的转化植株的１４．４％。此法可作为转基因植株早期筛选的方法之一。     

大豆种间的同工酶比较分析

比较了栽培、半野生、野生大豆4种同工酶的表现,初步认为:1.3个大豆种的过氧化物酶同工酶叠加酶带共有25条,其中7条为共有的基本酶带,其余酶带的出现频率和活性,因种不同而存在差异。2.有7条过氧化物酶同工酶酶带在野生大豆中不出现,而在另两个种以一定的频率出现,尤其是其中4条酶带的出现频率,随进化程度的提高而呈递增趋势。3.ATP酶、苹果酸酶及过氧化氢酶同工酶都呈现种间差异。尤其是ATP酶,不仅酶带清晰、带次分明,而且种间易于区别。因此,除了过氧化物酶同工酶外,还可在幼苗期用根、幼茎和子叶作材料,以3条ATP酶同工酶酶带AP—11、AP—12及AP—13来反映进化程度不同的3个大豆种之间的差异。     

大豆疫霉菌与其它几种疫霉菌同工酶电泳比较研究

本对大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）的15个菌株及其它7种疫霉的8个菌株进行了4种同工梅电泳比较研究。结果表明，大豆疫霉菌种内菌株间4种同工酶基本一致。疫霉属种间酯酶（EST）和超氧化物歧化酶（SOD）酶谱存在明显差异，表现为酶带的多少和Rf值的不同；淀粉酶（DIA）和过氧化氢酶（CAT）同工酶酶谱差异不很明显，与某些疫霉种酶谱相似，只表现为酶带强度上的差异。本首次报道了大豆疫霉菌的SOD、CAT和DIA同工酶，并指出EST和SOD同工酶在P.sojae种的鉴定上具有重要意义，在P.sojae种的鉴定提供一个辅助性手段。     

含ipt融合基因的根癌农杆菌转化大豆萌动种胚的研究：Ⅰ苗期子叶的…

本实验以大豆萌动种胚为受体，用含用３５Ｓ启动子－Ｇｕｓ基因－ｉｐｔ基因－Ｎｏｓ基因的融合基因根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４进行转化。通过对转化及对照植株苗期子叶过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶分析，结果表明酶谱有明显差异，过氧化物酶同工酶有两条差异带：Ｒｆ０．５０９及Ｒｆ０．７１２；酯酶同工酶有一条差异带：Ｒｆ０．５３１。综合分析，上述三条差异带都显示的转化植株占所分析的转化植株的１４．４％。此法可作为转基     

大豆各生育期叶片过氧化物酶和过氧化氢酶的变化

本文测定了不同生育期大豆叶片的过氧化物酶及过氧化氢酶,结果表明:过氧化物酶活性及同工酶谱总活性随生育进程而呈增强趋势,过氧化氢酶的活性高峰出现在盛花期。品种间过氧化物酶同工酶谱的差异主要表现在C区的C_3、C_4酶带。     

大豆与灰斑病菌互作早期防卫酶及可溶性蛋白的表达特征

用大豆同一品种与不同灰斑病菌生理小种和不同品种与同一生理小种互作，测定了大豆叶片防卫酶及可溶性蛋白的表达特征。结果表明，大豆品种与不同亲和性的小种互作后POD和SOD活性都有增强，但非亲和互作中防卫酶活性增加的速度和强度显著高于亲和互作。POD和SOD同工酶谱带仅发生强弱变化，未见有数量改变，说明POD和SOD活性的增加与同工酶活生的增强有关。可溶性蛋白电泳图谱显示，在非亲和或亲和互作中大豆某些可溶性蛋白谱带有所增强，是一些病程相关蛋白。而大豆不同品种与灰斑病菌同一生理小种互作后POD快速而显著表达也与大豆和灰斑病菌的非亲和性相关。上述结果表明防卫酶POD和SOD活性的快速而显著增高是大豆与灰斑病菌非亲和互作的特征。     

热冲击对Soja亚属萌芽大豆种子下胚轴酯酶的影响

为探索热冲击(Heat Shock,简称HS下同)对soja亚属野生大豆(G.Soja)、半野生大豆(G.gracilis)、栽培大豆(G.max)三个不同进化类型大豆萌芽种子下胚轴酯酶同工酶的影响。本试验采用了6个不连续的骤变温度HS处理。研究结果表明:1)在45℃(2h)、40℃(1h)→45℃(2h)、40℃(2h)→26℃(2h)→45℃(2h)三种HS处理条件下,酶谱C区主谱带半野生大豆第5带、栽培大豆第6带均消失;野生大豆的酶谱C区的主谱带第6带幅明显变窄,色度明显减弱;三种大豆酶谱C区其它谱带有不同条数的消失;三种大豆酶谱C区在其主谱带上方均出现一条新谱带。2)三种大豆酶谱A区和B区谱带对所有HS反应均不敏感。3)在26℃(对照)、35℃(2h),40℃(2h)三种HS处理条件下,酶谱C区野生大豆主谱带第6带的色度从低温HS处理到高温HS处理逐渐减弱,而半野生大豆主谱带第5带则相反,栽培大豆C区主谱带第6带的变化没有明确的规律。     

大豆抗感病毒病品种过氧化物酶同工酶的初步比较研究

利用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电脉研究了10个抗、感病毒病(SMV)大豆品种和5个品种各自健株与病株过氧化物酶同工酶的变化。结果表明,感病品种比抗病品种的过氧化物酶同工酶活性明显加强,且增加一条酶带。同一品种病株也比健株过氧化物酶同工酶活性强。可见,大豆抗、感病毒病不同的品种与过氧化物酶同工酶有密切关系。     

黑龙江省主要大豆品种同工酶酶谱分析

利用淀粉凝胶电泳,对黑龙江省主要大豆品种进行硫辛酰胺氧化—还原酶、乌头酸酶、肽链内切酶同工酶分析,结果表明,大豆种子的这三种酶谱带清晰,品种间有一定差异。     

梨多酚氧化酶同工酶组成及其对茶黄素合成的影响

用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶的方法,研究了不同品种梨（丰水梨、贡梨、雪梨、水晶梨、香梨）果实多酚氧化酶同工酶的酶带特征。结果表明,不同品种梨多酚氧化酶同工酶具有相似的酶带,但酶带数目、驸值及相对分子质量均存在种间差异;丰水梨有11条同工酶带,贡梨7条,雪梨5条,水晶梨和香梨分别为6条和4条;     

橡胶死皮树过氧化物酶同工酶和超氧化物歧化酶同工酶的研究

比较了无性系GT1正常树与死皮树的过氧化物酶同工酶谱,看到死皮树无论是树皮或胶乳,其过氧化物酶同工酶快带部分的活性都比正常树高得多,其余谱带差异不明显。无性系RRIM600死皮树与正常树的胶乳过氧化物酶同工酶的差异很明显,死皮树有3条谱带,酶谱带宽,显色快,染色深,表明活性较高,而正常树只有2条,活性很弱。GT1死皮病灶部位的树皮过氧化物酶活性特别高,过渡区其次,健康皮较弱,显示出距离病灶愈近,酶活性愈高的趋势,似乎死皮的诱发与过氧化物酶活性的诱导是同步发生、发展的。RRIM600的结果与GT1一样。此测定结果与同工酶电泳结果相符。死皮病灶的超氧化物歧化酶(SOD)活性比健康树皮低。RRIM600健康树皮的胶乳可分离出6～8条SOD酶带,死皮树皮的胶乳只分离出4～5条,而且活性减弱,显示出某些同工酶带缺失。本文还认为橡胶树死皮是一种自卫性的愈伤反应。     

不同抗性大豆品种感染大豆花叶病毒后一些生理生化性状的变化

本文采用聚丙烯酰胺直板凝胶电泳等方法测定不同抗性大豆品种接种SMVI—1毒株后叶绿素含量及过氧化物酶同工酶谱及酶活性。结果表明,感病品种和中感品种比健林分别多2条和1条酶带。感病品种的过氧化物酶活性最强,是对照的14.5倍,其次是中感品种和抗病品种。感病品种叶绿素含量明显下降,仅为对照的18.57％,抗病品种为74.43％。     

大豆杂种后代过氧化物酶同工酶谱类型及其与亲本关系的分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法分析有亲缘关系的37个品种(包括15个品种的亲本来源)萌发6天的大豆子叶POD同工酶谱。结果表明,不同品种POD同工酶谱共显示5～10条酶带,分A、B、C三区。以B区酶带色度深浅及数目变化为分类标准,可分为四种酶型:PB_1型、PB_2型、PB_3型和PB_4型。根据此酶型分析了每一个组合的品种与其两亲本。其中6个品种呈现偏父本酶型,6个品种呈现新酶型,2个品种的酶型与父母相同,1个品种呈现偏母本酶型。同时测定了13个组合的36个品种的POD比活力,结果指出:后代品种POD比活力都低于或介于父母本之间,后代比双亲POD比活力有逐渐降低的趋势。     

病毒病抗性不同的大豆品种及其F_1代过氧化物酶酯酶同工酶分析

本研究对大豆病毒病抗性不同的大豆杂交亲本及F_1代,接种SMV_1号株系后的过氧化物酶和酯酶同工酶的变化进行了分析。结果表明,抗病与感病亲本及其F_1代接种后的同工酶谱带存在着明显的差异。感病亲本及F_1代酶的活性增强,酶带数较多,而且部分酶带变宽,颜色变深。抗病亲本则不发生变化。各组合F_1代的酶谱与双亲有关,抗病×抗病的F_1代酶谱与双亲完全相同,抗病×感病的F_1代酶谱偏向抗性亲本,感病×感病的F_1代产生一个双亲所不具备的小分子新杂种酶带。未接种的感病亲本酶谱与抗病亲本相同。植株内部同工酶的变化与成株抗性相一致。因此,我们认为过氧化物酶同工酶,可作为鉴定大豆抗感病毒病的生化指标之一。