姜黄素修饰的纳米金棒抑制胃癌细胞SGC-7901的作用

恶性肿瘤严重威胁着人类的健康。合成了姜黄素修饰的纳米金棒(Cur@Au NRs),并考察其对胃癌细胞(SGC-7901)的作用,采用MTT法测试其对5种肿瘤细胞株的体外增殖活性的影响,同时观察其对SGC-7901形态学的影响;利用实时x CELLigence细胞分析系统(RTCA)检测不同浓度Cur@Au NRs对SGC-7901增殖能力及迁移能力的影响;利用划痕愈合实验及血管形成实验检测Cur@Au NRs对细胞的迁移及血管形成的抑制作用;采用腹腔注射Cur@Au NRs后与正常小鼠内脏组织切片的对比,对其进行毒理学研究。研究结果表明,Cur@Au NRs具有良好的抗肿瘤活性,尤其对SGC-7901,且其IC50值明显低于姜黄素,并且能够抑制SGC-7901的增殖和迁移。毒理学研究表明即使在高剂量下也不具有明显的毒性。     

落叶松单宁原位固化及其对AU(Ⅲ)吸附性能的研究

以富含单宁的落叶松树皮为原料制备吸附材料,研究了该吸附材料对水溶液中Au(Ⅲ)的吸附特性.结果表明:以甲醛作为交联剂可以实现落叶松树皮中单宁的原位固化;当温度为303 K,pH=4.0,Au(Ⅲ)的初始浓度为5223 mg/L时, 该吸附材料对Au (Ⅲ)的平衡吸附量达到Au(Ⅲ)1 821.9 mg/g,而且平衡吸附量随温度的升高进一步增大.pH对吸附容量的影响较大,最佳pH 为4.0.该吸附材料对Au(Ⅲ)的吸附平衡符合Langmuir方程,吸附动力学可以用拟二级速度方程来描述.固定床吸附实验表明,当原料液的浓度为Au(Ⅲ)239.2 mg/L,流出液的体积约为117个床层体积时才达到穿透点.分析表明,原位固化落叶松单宁对Au(Ⅲ)的吸附为氧化-还原吸附.      

基于聚铁氰酸钴/苝四甲酸二酐衍生物复合膜固定辣根过氧化物酶生物传感器的研究

采用循环伏安(CV)法在金电极表面电聚合一层铁氰酸钴(CoHCF),利用苝四甲酸二酐衍生物(PTC NH2)成膜能力强又带有许多氨基功能团的特点将其固定在CoHCF表面,再通过静电吸附和共价键合作用将纳米金和辣根过氧化物酶(HRP)的复合物制得过氧化氢生物传感器[HRP Au/PTC NH2/CoHCF/Au].考察了该传感器对过氧化氢的电化学特性,实验表明,该传感器具有良好的生物催化活性,响应电流与过氧化氢浓度在2.0×10-6～1.6×10-3 mol/L范围呈良好的线性关系,检出限为7.28×10-7 mol/L.     

白介素-6在人结肠癌LoVo细胞奥沙利铂耐药中的作用

目的 探讨白介素-6(IL-6)在人结肠癌细胞株奥沙利铂(L-OHP)耐药中的作用.方法 通过L-OHP诱导建立人结肠癌L-OHP耐药细胞株LoVo/L-OHP,分别用MTT法、免疫荧光及蛋白印迹检测细胞生长、IL-6表达.L-OHP联合IL-6或IL-6R抗体作用后,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖.结果 与LoVo细胞相比,LoVo/L-OHP细胞的耐药指数为10.4,IL-6表达上调.阻断IL-6可增强L-OHP对耐药细胞的杀伤作用,但阻断IL-6R后耐药细胞对L-OHP敏感性无明显改变.结论 IL-6过表达与LoVo细胞L-OHP耐药相关,阻断IL-6而非IL-6R可增强耐药细胞对L-OHP敏感性.     

基于功能化Au@Ag纳米棒的表面增强拉曼光谱检测汞离子

建立了1种基于功能化Au@Ag纳米棒(Au@Ag NRs)的表面增强拉曼光谱(SERS)技术来实现溶液中Hg~(2+)的定量检测。Hg~(2+)存在下,其与Au@Ag NRs表面的2,5-二巯基-1,3,4-噻二唑(DMCT)发生配位作用引起SERS检测探针聚集,产生"热点"效应,致使DMCT在1 360 cm~(-1)处的SERS信号增强。在0.1～10μg/L质量浓度区间内线性关系良好:Y=195.49384X+1676.23663(R~2=0.991),检出限为17 ng/L,低于世界卫生组织(WHO)规定饮用水中Hg~(2+)的限量(1μg/L)。在实际水样中进行Hg~(2+)加标回收检测,回收率为100.1%～106.5%,相对标准偏差为1.23%～7.99%。     

普鲁士蓝对养殖液中亚甲基蓝的光热催化降解

【目的】探究亚微米普鲁士蓝(Submicron Prussian blue,smPB)的光热转化效果对其光芬顿催化降解亚甲基蓝(Methylene blue, MB)污染物的促进作用。【方法】以亚铁氰化钠和聚乙烯亚胺为主要材料,在酸性条件下,通过水热缓慢结晶法,利用聚乙烯亚胺链上的氨基基团控制普鲁士蓝(Prussian blue, PB)的结晶过程,制备出具有光热及光芬顿催化降解能力的smPB。使用扫描电子显微镜(SEM)、紫外-可见漫反射吸收光谱(UV-Vis)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶红外分光光度计(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)等测试仪器对smPB进行结构和形貌表征。利用太阳光模拟器照射的阳光测试了smPB在水溶液中的光热转化效果。在不同的催化条件下,测试了smPB的芬顿、光芬顿以及光热芬顿催化降解效率。【结果】smPB的光热转化率约为90%。太阳光模拟器以1个太阳光功率照射1 h的情况下,含有smPB 20 mg的100 mL水溶液温度上升8.8℃左右。在光热的条件下,使用20 mg的smPB对100 mL的MB溶液(ρ=20 mg/L)进行光热芬顿催化降解,在40...     

矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)组织培养技术研究

实验以矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)的花瓣为培养材料,在MS培养基中附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA),进行矮牵牛快速繁殖技术研究。结果表明,MS+6-BA(2.0 mg.L-1)+NAA(0.1mg.L-1)培养基愈伤组织发生的较早,数量多,培养基为最佳分化培养基,不定芽发生早,粗壮,数量多,玻璃化程度很小;诱导不定根时,1/2 MS+NAA(0.5 mg.L-1)培养基诱导生根的时间较早,不定根发生率达100%。     

柴胡皂甙-d对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期的影响

目的 探讨柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响.方法 (1)常规培养人肝癌HepG2细胞;(2)噻唑蓝(MTT)实验观察不同质量浓度SSd处理HepG2细胞72 h后以及10mg/L的SSd作用HepG2细胞不同时间对HepG2细胞生长指数的影响;(3)流式细胞术(FCM)检测SSd处理HepG2细胞48h后细胞周期的分布.结果 SSd能明显抑制HepG2细胞的增殖,以10mg/L的SSd作用48h的抑制作用最明显.FCM检测显示SSd作用48h后实验组处于S期的细胞数较对照组明显减少(P<0.01).结论 SSd对人肝癌HepG2细胞的体外增殖具有抑制作用,并能使细胞周期中处于S期的细胞数减少.     

大樱桃“吉塞拉”试管苗优化培养基的筛选

以大樱桃矮化砧木吉塞拉6号为实验材料,研究了不同生长调节剂配比对大樱桃茎芽再生形成不定芽的诱导效应.结果表明:(1)大樱桃不定芽的再生存在腋芽再生与基部丛芽再生两种基本方式;(2)当培养基中生长调节剂组配为6-BA(1mg/l) +KT(0.5mg/l)+ IBA(0.2mg/l)时,大樱桃茎芽外植体的分化水平达到最高;(3) MS+6-BA(1mg/l)+ KT(1mg/l)+ IBA(0.3mg/l)是大樱桃不定芽高频再生的最佳培养条件.     

化学诱变甘薯新品种甬紫薯1号的选育

采用化学诱变育种手段选育紫薯新品种,分别用0,0.5%,1.0%,1.5%叠氮化钠(Na N3)对亲本澳大利亚Au1990sp紫甘薯胚性细胞团进行诱变处理6 h。结果表明,0.5%NaN_3处理6 h效果最好,将0.5%Na N3处理6 h胚性细胞团进行再分化,共分化出植株125株,2003年移栽后获得99株系,当年入选14株系,秋天收获时其中有3株系高产,编号为CA06产量达到43.98 t·hm~(-2),CA11产量达到40.03 t·hm~(-2),CA17产量达到43.84 t·hm~(-2),对照组Au1990sp产量为4.95 t·hm~(-2)。诱变后的株系在植株表型、特征、特性与亲本相比有很大的不同。对亲本Au1990sp用NaN_3诱变后的株系进行AFLP分析,发现有明显差异,对该品种进行12年的选育,命名为甬紫薯1号,2012年12月获得浙江省非农作物新品种的审定。     

小鼠胚胎嵌合的研究

选用昆白.CI_(57)及B/L_(615)三个品系小鼠,对其8细胞期(8C),桑椹期(M)和囊胚期(B)的全胚和半胚(半)进行聚合,培养和移植试验。8细胞期及桑椹期胚胎的聚合发育率显著高于囊胚期(P<0.05),全胚聚合的发育率显著高于半胚(P<0.05)。将同品系和不同品系的8细胞期,桑椹期和囊胚期胚胎嵌合移植给27只受体,9只妊娠,妊娠率分别为17％(1/6),40％(6/15)及33％(2/6),平均为33％(9/27),共产仔35只,其中不同品系胚胎的嵌合胚移植,产仔15只,4只为皮毛嵌合体。     

抗水稻白叶枯病原细菌(Xanthomonas oryzae)单克隆抗体建株

以江苏农科院提供的纯化水稻白叶枯病原细菌(X.oryzae)菌株K-S-6—6免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞,应用杂交瘤与骨髓瘤细胞SP2/0融合。经培养、筛选和克隆化,得到分泌抗X.oryzae单克隆抗体的杂交瘤细胞株K_(1-2)、K_(1-6)和K-2。对K_(1-2)已从六个方面进行鉴定: (1)稳定分泌特异抗体的性能:融合细胞、克隆化细胞、液氮中冻存7周后复苏的细胞培养上清,经ELISA法和免疫荧光抗体法检测,结果均对相应抗原K-S-6-6表现阳性。     

β-伴大豆球蛋白通过p38/JNK MAPK信号通路引起IPEC-J2细胞损伤

采用细胞体外培养技术,研究不同浓度7S(β-伴大豆球蛋白)对IPEC-J2(猪小肠上皮细胞)的影响。实验分为6组,A(对照组)、B(1 mg·m L~(-1)7S)、C(5 mg·m L~(-1)7S)、D(10 mg·m L~(-1)7S)、E(5 mg·m L~(-1)7S+1μmol·L~(-1)SP600125)、F(5 mg·m L~(-1)7S+1μmol·L~(-1)SB202190),24 h后,用CCK-8法检测细胞存活率,收集细胞用ELISA法检测NO、5-HT、IL-6和IL~(-1)0含量,用Western blot法检测p-JNK、p-p38、Bcl-2蛋白表达量,用PCR法检测Bad、Bax、Bcl-2、Bcl-xL和Caspase-3 m RNA相对表达量。检测结果表明:C组和D组的IPEC-J2细胞活性极显著降低(P 0. 01),E组和F组的细胞活性显著高于C组(P 0. 05),说明7S促进炎性细胞因子NO、5-HT和IL-6的分泌,降低IL~(-1)0的分泌,添加抑制剂使细胞因子NO、5-HT和IL-6分泌减少,IL~(-1)0的分泌增多;同时7S促进p-JNK、p-p38蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,添加抑制剂可抑制p-JNK、p-p38蛋白表达,使Bcl-2蛋白表达增高。Bcl-2/Bax m RNA比值随7S浓度增加而降低,Bax/Bcl-xl比值随7S浓度增加而升高,Caspase-3 m RNA相对表达量随7S浓度增加而升高。添加抑制剂后Bcl-2/Bax比值增高,Bax/Bcl-xl比值降低,Caspase-3 m RNA降低。结果表明,7S通过p38/JNK MAPK信号通路引起仔猪肠上皮细胞损伤。     

姜黄素对高转移人肺癌细胞亚系生物学行为的影响

目的 :观察姜黄素对克隆化人肺癌高转移细胞亚系 (PGCL3)生物学行为的影响。方法 :用 6 0 μ mol/ L的姜黄素处理 PGCL 3细胞 ,通过制备生长曲线及软琼脂集落形成能力试验来评价药物对细胞生长的影响 ,以对层粘连蛋白的粘附试验、通过 Boyden小室聚碳酸酯膜的运动试验和降解穿过基底膜胶的侵袭降解试验来评价细胞侵袭能力的改变。结果 :在 6 0μ mol/ L姜黄素作用下 ,PGCL 3细胞的生长速度及软琼脂集落形成能力、以层粘连蛋白为粘附基质的粘附能力、穿过重建基底膜的侵袭降解能力及趋化运动能力均显著降低 (P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论 :姜黄素可抑制 PG-CL 3细胞的恶性表型 ,为治疗转移性恶性肿瘤提供了实验依据。     

佛波酯对人外周血CD4+T细胞产生IL-17的影响

观察不同浓度佛波酯(Phorbol myristate acetate,PMA)及不同刺激时间对慢性乙型肝炎患者外周血CD4+T细胞产生IL-17的影响.实验运用流式细胞仪检测不同浓度的PMA及不同刺激时间作用于人CD4+T细胞后其产生IL-17的差异.不同的PMA浓度对CD4+T细胞产生IL-17的能力不同,其中PMA 50 ng/mL组可产生较多的IL-17,而25 ng/mL组和100 ng/mL组产生量较少.不同的刺激时间对IL-17产生量也有显著影响:刺激3 h后IL-17的产生量增加不明显,而刺激至6 h及12 h时,IL-17的产生明显上升,且6 h与12 h无明显差异.运用流式细胞仪检测发现,CD4+T细胞IL-17的产生量与PMA既非浓度依赖又非时闭依赖关系,建议50 ng/mL PMA刺激6 h为淋巴细胞最佳活化方案.     

接种密度对牛颗粒细胞形态及相关基因表达的影响

牛卵巢颗粒细胞是雌激素(Estrogen,E₂)合成的主要来源,具有E₂活性的牛颗粒细胞体外模型的建立是研究E₂合成与分泌过程中潜在调控机制的重要工具,该细胞模型的建立可为E₂合成分子调控机制及牛卵巢卵泡发育机制的研究提供理论与技术支持。细胞接种密度是颗粒细胞体外培养模型的关键因素,高密度可引起细胞生理及分子的显著变化。研究通过不同接种密度下的形态变化和基因表达筛选牛颗粒细胞体外培养最优接种密度,采用长期无血清法培养牛原代颗粒细胞,培养液中添加FSH及IGF-1以诱导E₂的合成。培养7 d后,采集6孔板中高(3.0×10⁶个细胞/孔)、中(2.0×10⁶个细胞/孔)、低(1.0×10⁶个细胞/孔)3种不同接种密度的细胞图像进行观测,并利用qRT-PCR技术检测3种不同接种密度中相关基因的表达情况。结果表明,低密度(1.0×10⁶个细胞/孔)接种细胞呈现成纤维细胞样外观,细胞无聚集倾向;中密度...     

不同磷浓度下氮磷比对小球藻生长的影响

通过室内试验研究不同磷浓度条件下氮磷比对小球藻(Chlorella vulgaris)生长的影响。结果表明,在低磷浓度(0. 05mg/L、0. 1mg/L、0. 2mg/L)和中磷浓度(0. 4mg/L、0. 6mg/L)下,随着氮磷比值增大,小球藻密度逐渐升高。在高磷浓度(0. 8mg/L、1mg/L)下,小球藻密度随着氮磷比增大呈先升高后下降趋势。磷浓度为0. 8mg/L条件下,N∶P=40∶1时,小球藻细胞密度达到最大值;磷浓度为1mg/L条件下,N∶P=30∶1时,小球藻细胞密度达到最大值。以上研究结果表明,小球藻生长既受氮磷营养盐浓度水平影响又受氮磷比值影响。     

Au纳米粒子对ZnO分级结构的气敏特性影响

采用化学浴法制备了花形ZnO纳米棒簇，将平均粒径约40 nm的Au纳米粒子引入ZnO表面得到不同Au修饰量的Au/ZnO复合结构.Uv-vis吸收光谱表明，在Au和ZnO之间存在着作用力使Au的吸收光谱产生红移，这种作用力的存在使复合结构的气敏性能得到了较显著的改善.当Au修饰的质量分数为6%时，复合材料的气敏性能最高，对丙酮气体的灵敏度较纯ZnO提高了约17倍.     

白玉簪离体快速繁殖的研究

以白玉簪(Hosta plantaginea Aschers)茎芽为外植体,MS为基本培养基,通过添加不同质量浓度的细胞分裂素(6-BA、ZT)和生长素(NAA)进行离体繁殖.结果表明:培养基中添加6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L不定芽增殖率最高,增殖倍数达到3.9,玉米素(ZT)对幼芽的增殖效果不如6-BA;NAA质量浓度0.05～1.0 mg/L都能诱导白玉簪生根,生根率达93%以上.     

二氢卟吩载药胶团的制备及体外光动力效应研究

[目的]研究二氢卟吩e6（Ce6）载药胶团的体外光动力疗法（PDT）对子宫颈癌Hela细胞的杀伤作用.[方法]合成壳聚糖硬脂酸聚合物二氢卟吩e6载药胶团（CSO-SA/Ce6）和叶酸修饰聚合物的二氢卟吩e6载药胶团（FA-CSO-SA/Ce6）后,通过荧光显微镜观察载药胶团对细胞的毒性.以游离的Ce6、壳聚糖硬脂酸聚合物（CSO-SA）为对照组,应用MTT法检测Ce6载药胶团对Hela细胞的毒性作用;同时采用波长630 nm的半导体激光垂直照射到24孔培养板上,照射时间为180 s/孔,继续孵育细胞24h,应用MTT法检测载药胶团在光照条件下对Hela细胞的光动力杀伤效率.[结果]荧光显微镜显示,Ce6载药胶团不影响细胞的数量和形态,对Hela细胞毒性较小;MTT法表明,Ce6包载后,对Hela细胞的PDT杀伤作用显著强于Ce6.[结论]Ce6载药胶团对Hela细胞具有良好的光动力杀伤作用,且PDT杀伤效率优于Ce6.