地克珠利在鸡组织内的残留研究

研究鸡饮用地克珠利(3mg/l,连续自由饮水9天)后血浆、皮肤 脂肪、肝脏、肾脏、肌肉组织中的残留量,以便制定地克珠利溶液剂的休药期。用甲醇提取血浆中的药物,用乙睛提取组织中的药物,利用高效液相色谱法测定组织中地克珠利的浓度。试验结果表明,饮水中按3mg/l的浓度添加地克珠利在鸡体内休药期为3天。     

鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留HPLC检测方法的建立

建立了同时检测鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的高效液相色谱.经乙腈提取,正己烷脱脂,旋转蒸发浓缩后,以0.05mol/L磷酸/三乙胺(pH3.0):乙腈(40:60)作为流动相,反相高效液相色谱-紫外检测法检测,检测波长240 nm.鸡组织中地克珠利和妥曲珠利的回收率分别为92.0%～102.0%和83.4%～89.0%,变异系数为5.9%～12.2%,地克殊利和妥曲珠利的检测限分别为0.012 mg/kg和0.010 mg/kg,在0.05～1.0 mg/L质量浓度范围内呈良好的线性相关.该法样品处理简单,可同时检测地克珠利和妥曲珠利的残留,且准确度和精密度均符合残留分析的要求.     

地克珠利的新合成方法

地克珠利化学名为氯嗪苯乙氰,最早由比利时扬森公司开发,该药对鸡、火鸡、鸭、鹅、孔雀、鹌鹑、兔等各种球虫具有良好的防治效果。每吨饲料添加1g,能100%控制球虫病的暴发。该药属于非离子型抗球虫药,它与莫能菌素、盐霉素、马杜拉霉素等离子型聚醚类抗生素的抗球虫药及其它合成的抗球虫药均无交叉抗药性,是目前用量小,抗球虫谱广(抗柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美尔球虫和变位艾美耳球虫等),屠宰前不需要停药,使用安全的一种新型抗球虫药。已国内外的广泛重视,参照有关资料,我们已完成条较好的工艺,20世纪90年代以来国内有多家单位和生产厂家进…     

利用鸡胚感染测定柔嫩艾美球虫对磺胺喹恶啉和地克珠利的耐药性

将柔嫩艾美球虫鸡胚适应株（保定株）通过每胚注入1000，500和250ug磺胺喹恶啉及每胚注入5，0．5和0．25ug地克珠利的鸡胚传代，结果，柔嫩艾美球虫鸡胚适应株在注入磺胺喹恶啉500，250ug的鸡胚和注入地克珠利0．5，0．25ug的鸡胚传至第11代时对药物产生了抗药性。     

地克珠利与中药联合应用对鸡球虫病的疗效试验

对中药与西药联合应用防治鸡球虫病的效果进行了试验研究，结果，地克珠利0.5mg/kg 中药5.0g/kg和地克珠利1.0mg/kg 中药5.0g/kg2个联合用药组的抗球虫数（ACI）分别为202．4和202．8，比单独使用地克珠利或中药分别提高了11．89％，12．11％和23．34％，23．58％，表明联合用药防治鸡球虫病是增强药物疗效，减少西药用量，延长药物效用期的有效方法。     

地克珠利在健康鸡及球虫感染鸡体内残留的比较研究

比较研究健康鸡和多型艾美尔球虫混合感染鸡饮水（3mg／L,连续自由饮水9d）地克珠利后在血浆、皮肤＋脂肪、肝脏、肾脏、肌肉组织中的残留量,用甲醇提取血浆中的药物,用乙腈提取组织中的药物,用高效液相色谱法测定。结果表明,感染鸡组织中的残留量比健康鸡组织中的残留量要低,消除更快,说明肉鸡的多型艾美尔球虫混合感染对地克珠利在其体内的残留和消除规律有一定的影响。     

液相色谱-串联质谱法研究地克珠利在家兔组织中残留及消除规律

[目的]建立一种检测家兔组织中地克珠利含量的液相色谱-串联质谱法（LC—MS／MS）,研究地克珠利在家兔组织中的残留及消除规律。[方法]选择48只家兔（雌雄各半）,在饲料中加入10g／1000kg地克珠利混饲,连续饲喂30d。分别于休药后的第0、1、2、3、4、5、6天,每个时间点随机处死6只家兔（雌雄各半）,取肌肉、肝脏、肾脏组织,DMF,乙腈沉淀法提取并用LC—MS,MS法检测地克珠利残留量。[结果]地克珠利在肾脏中的残留量最高（休药0d为912．6μg／kg）,肝脏次之（休药0d为156．μg／kg）,肌肉最低（休药0d为43．1μg／kg）,在肾脏中的消除速度最快。[结论]该方法适于检测家免组织中的地克珠利含量。休药0d即可满足欧盟要求     

0.5%地克珠利可溶性粉剂预防鸡球虫病试验

对0.5%地克珠利(Diclazuril)可溶性粉剂,以0.2×10-6、0.5×10-6、1.0×10-6 3种浓度饮水预防鸡艾美耳球虫(Eimeria)混合种人工感染,并用地克珠利预混剂(商品名球佳)以1.0×10-6浓度饲喂作对照,结果发现0.5%地克珠利可溶性粉剂以0.5×10-6、1.0×10-6两种浓度饮水预防鸡球虫病,具有良好的效果,抗球虫指数均在176.6以上,与地克珠利预混剂以1.0×10-6浓度混饲效果相当,证实0.5%地克珠利可溶性粉剂是地克珠利又一种高效预防鸡球虫病新剂型.     

0.5%地克珠利可溶性粉的制备及检测

采用适当的助溶剂，通过喷雾干燥法制成地克珠利可溶性粉。经检测，地克珠利可溶性粉性质稳定，溶解性好。按0.5-1mg/L饮水给药，能有效防治鸡球虫病。     

阿莫西林在鸡组织中的残留消除规律

本试验旨在研究阿莫西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长358nm、发射波长440nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。该方法测定鸡组织中阿莫西林的检测限为5μg/kg、定量限为13μg/kg。阿莫西林在鸡组织样品中平均回收率为73.64%~88.82%,相对标准差为6.21%~9.63%。各试验组京海黄鸡分别按体质量以30、60mg/kg剂量内服阿莫西林,每天1次,连续给药7d,休药4h后(零休药期)各组织中阿莫西林残留量最高,休药第3天各组织中阿莫西林残留量均迅速降低;休药后第5天阿莫西林残留量低于最高残留限量(50μg/kg);休药第9天所有组织中阿莫西林残留量均低于检测限;休药后相同时间点鸡肌肉中药物残留量最低,肝脏中的药物残留量最高;阿莫西林在鸡肾脏中残留比鸡肌肉、肝脏消除缓慢且消除时间长;阿莫西林在鸡组织中的残留量与给药剂量呈正相关。根据WT1.4软件计算所得,建议黄羽肉鸡按体质量以30、60mg/kg剂量给药,每天1次,连续7d后,其休药期(WT)分别为3、4d。     

鸡组织中氯霉素残留的气相色谱-微电子捕获检测方法研究

建立了鸡肌肉和鸡肝脏组织中氯霉素残留的气相色谱-微电子捕获检测方法。用乙酸乙酯提取样品中的药物，正己烷脱脂，乙酸乙酯液-液分配，氮气吹干后，用Sylon BFT衍生化，进配有微电子捕获检测器（μECD）的气相色谱仪测定，外标法定量。鸡肌肉组织在0．1、0．5、1．0μg／kg三个添加水平，平均回收率为90．2％～94．3％，日内变异系数在4．5％-11．6％之间，日间变异系数在7．8％～14．3％之间，检测限0．05μg/kg，定量限0．10μg/kg。鸡肝脏组织在0．2、0．5、1．0μg/kg三个添加水平，平均回收率为82．9％～90．8％，日内变异系数在7．0％～11．2％之间。日间变异系数在7．9％～14．5％之间，检测限0．10μg/kg，定量限0．20μg/kg。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡组织中氯苯胍残留

研究建立了鸡组织中氯苯胍残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品经酸化乙腈提取后,分别经中性氧化铝柱和HLB固相萃取柱净化,C₁₈柱分离,超高效液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。氯苯胍在10 ng/mL～500 ng/mL的浓度范围内呈线性相关,相关系数为0.994以上。本方法对氯苯胍在鸡组织中的检测限为5μg/kg,定量限为10μg/kg;鸡肉、鸡肝和鸡肾在添加50μg/kg～200μg/kg浓度范围内,其回收率为76.7%～107.6%,鸡脂肪和鸡皮在添加100μg/kg～400μg/kg浓度范围内, 其回收率为81.2%～106.8%, 批内变异系数均在1.4%～19.5%之间,批间变异系数在2.5%～12.8%之间。本方法快速、灵敏、重现性好,各项技术指标均满足国内外相关法规要求,适用于鸡组织中氯苯胍的残留检测。     

Detection of chicken anemia virus DNA in embryonal tissues and eggshell membranes

Chicken infectious anemia virus (CIAV) is a ubiquitous and highly resistant virus of chickens that causes anemia and death in chicks less than 3 wk of age and immunosuppression in chickens older than 3 wk of age. The production of specific-pathogen-free eggs free of CIAV is essential for research and vaccine production. Currently, flocks are screened for CIAV by antibody tests to ensure freedom from CIAV infection. Recent evidence, however, indicates that chickens may carry and vertically transmit CIAV DNA independently of their antibody status. In this study, we tested embryos and eggshell membrane residues by nested polymerase chain reaction (PCR) as a sensitive method of detecting CIAV DNA. CIAV DNA could be detected in the blastodisks and semen obtained from antibody-positive and -negative chickens. Examination of different tissues between 18 and 20 days of incubation indicated that many but not all organs of individual embryos were positive. The lymphoid organs and gonads had the highest incidence of CIAV DNA, which was significantly different (P < 0.05) from the incidence in the liver. Eggshell membrane samples from embryos or newly hatched chicks were an excellent noninvasive source for the detection of CIAV DNA, identifying significantly more positive embryos than did pooled lymphoid organs. The use of dexamethasone injections as a method to improve the detection of carrier birds did not result in an increase of vertical transmission or cause seroconversion in the treated hens. A combination of testing eggshell membrane residues at hatch and periodic testing of blood DNA by nested PCR can be used to identify chickens carrying CIAV DNA and may be used to eradicate carrier birds.     

动物组织中四环素类抗生素残留的ELISA检测研究——土霉素抗体的制备

四环素类抗生素属小分子半抗原物质 ,必须与大分子物质结合才能产生免疫原性。本试验采用重氮化法合成土霉素 牛血清白蛋白 (BSA OTC)及土霉素 鼠血清白蛋白 (RSA OTC)人工抗原 ,用紫外扫描对其进行鉴定。以BSA OTC免疫家兔制备抗血清 ,以RSA OTC为包被抗原 ,采用双向免疫扩散法和ELISA方法对抗血清进行鉴定。结果表明用重氮化法合成的人工抗原对四环素类药物有特异的抗原抗体反应 ,抗血清效价达 1 2 8× 1 0 5,完全能够满足四环素类药物残留的ELISA检测要求     

脱氢乙酸钠在肉鸡组织中的残留消除

研究脱氢乙酸钠作为饲料防霉剂在鸡组织中的残留消除,为其在鸡组织中的残留监控及休药期的制定提供理论依据。黄羽肉鸡连续饲喂200 mg/kg脱氢乙酸钠30 d后,于不同时间分别取肌肉、肝脏、肾脏和皮脂样品,采用反相高效液相色谱(HPLC)方法测定样品中脱氢乙酸钠含量。休药1 d时,鸡肾脏、肝脏、肌肉和皮脂中脱氢乙酸钠残留量分别为0.68、0.59、0.34和0.20 mg/kg。随着休药时间延长,各组织中脱氢乙酯钠的残留量逐渐降低,脱氢乙酸钠在肉鸡各组织中的残留水平依次为肾脏、肝脏、肌肉和皮脂。在组织中的残留消除半衰期分别为肾脏5.86 d、肝脏6.02 d、肌肉8.88 d及皮脂为10.38 d。若以0.2 mg/kg为临时最大残留限量(MRLs),则脱氢乙酸钠在鸡不同组织中的休药期分别为肾脏12.37d、肌肉9.37 d、肝脏9.18 d、皮脂4.16 d。得出结论:200 mg/kg脱氢乙酸钠拌料饲喂肉鸡30 d,在肉鸡各组织中的残留水平较低,均低于0.7 mg/kg;残留消除相对较快。     

地克珠利在獭兔体内的药物动力学研究

选用10只体重为1.8±0.33kg的獭兔按10mg/kg体重单次经口灌服0.2%地克珠利预混剂后,于设定的时间点采血,乙腈提取血样,高效液相色谱法测定血药浓度,3P97药动学软件分析。结果表明,该药在兔体内吸收、分布和消除均较快,半衰期(t1/2ka,t1/2α,t1/2β)分别为0.51h、3.44h、8.8h,最大血药浓度(Cmax)为16.47μg/mL,达峰时间(Tmax)为1.75h,药时曲线下面积(AUC)为159.05μg·h/mL,平均滞留时间(MRT)为9.77h,房室分析表明,其药时数据符合一级吸收的二室模型。     

Detection of chicken anaemia virus DNA from formalin-fixed tissues by polymerase chain reaction

Chicken anaemia virus was detectable from various samples such as cell-free virus, infected cells, unfixed liver homogenates, formalin-fixed liver homogenate or formalin-fixed paraffin-embedded ( ) tissues from experimental or field infected chicks using assay. The detection limit of the first PCR assay was 1 infected cell or 10^−1·5, ₅₀ of cell-free virus (strain A2). The nested assay increased the sensitivity 10- or 100-fold. was detectable in the other 14 Japanese strains isolated from 1976 to 1994 by the assay. All the amplified products were digested with BglII, HindIII, PstI and SacI. These results suggest that the region amplified was highly conserved among the strains. The nested assay was very sensitive. However, was detectable in most field samples using the first assay. Therefore, the nested assay may not always be necessary. In contrast, the nested PCR assay was necessary to detect in tissues or formalin-fixed material. Use of the assay in detection from tissues may be most valuable in diagnosis of diseases caused by or associated with , because it allows detection of both microscopic lesions and .     

盐酸克伦特罗在动物组织中的残留及检测

综述了盐酸克伦特罗(HCl-clenbuterol,CL)在动物体内的残留及消除特性,指出如何合理选择供检靶组织。介绍了目前常用于检测CL的几种方法及国内外禁用CL的情况,提出要防止CL的滥用,必须增强对CL危害性的认识,完善监督检测体系。