不同培养基对东北红豆杉愈伤组织诱导的影响

[目的]研究不同培养基对东北红豆杉（Taxus cuspidate Sied.et Zucc.）愈伤组织诱导的影响。[方法]研究了不同基本培养基、不同植物生长调节剂种类及水平对东北红豆杉愈伤组织诱导的影响。[结果]东北红豆杉愈伤组织诱导最好的基本培养基是WPM培养基,其次是B5培养基;生长素2,4-D的诱导效果在MS培养基上优于NAA,而在B5培养基上不如NAA;在MS培养基上,细胞分裂素KT对愈伤组织诱导起促进作用,2,4-D＋0.1mg/L KT、NAA＋1.0mg/L KT的诱导效果最好,6-BA不利于东北红豆杉叶片愈伤组织的诱导。[结论]该研究可为进一步研究东北红豆杉的组织和细胞培养以及快速繁殖提供依据。     

南方红豆杉愈伤组织诱导的研究

以南方红豆杉的嫩茎和针叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同种类基本培养基及不同激素水平诱导愈伤组织的能力。结果表明,嫩茎作为外植体较针叶有利于南方红豆杉愈伤组织诱导;B5培养基较MS培养基有利于愈伤组织诱导。嫩茎诱导愈伤组织的最适培养基为B5+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。     

维生素氨基酸对石刁柏愈伤组织生长和多糖含量的影响

报道了３种维生素（Ｂ６、烟酸、肌醇）和４种氨基酸（精氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺和天冬氨酸）对石刁愈伤组织生长和多糖含量的影响。烟酸（１．０ｍｇ／Ｌ）对愈伤组织生长和多糖含量的提高均有促进作用，肌醇（２００ｍｇ／Ｌ）对多糖含量提高较显著，Ｂ６（１．０ｍｇ／Ｌ）对生长和多糖含量的提高有抑制作用。烟酸浓度以２ｍｇ／Ｌ最佳。４种氨基酸对生长和多糖含量提高均有促进作用。当浓度＜５ｍｇ／Ｌ时，谷氨酰胺促进生长作     

不同诱导子对曼地亚红豆杉紫杉醇含量的影响

将曼地亚红豆杉愈伤组织接种在添加不同浓度的硫酸铜、水杨酸、茉莉酸甲酯3种诱导子的试验优化B5继代培养基上,黑暗培养30 d,研究不同诱导子对紫杉醇含量的影响。结果表明:随着诱导子浓度提高,各处理的愈伤组织细胞生长不同程度地受限制。当硫酸铜浓度为0.10 mg/L时,紫杉醇含量最高达到0.57‰;当水杨酸浓度为1.0 mg/L时,紫杉醇含量最高达到0.72‰;当茉莉酸甲酯浓度为100μmoL/L时,紫杉醇含量最高达到0.87‰。     

南方红豆杉愈伤组织培养研究

对南方红豆杉叶、茎的愈伤组织诱导条件及最适培养基组成成分进行了探讨.结果表明:2,4-D浓度2.0 mg/L比0.5 mg/L或1.0 mg/L处理的叶、茎愈伤组织诱导率高;嫩茎愈伤组织的诱导率因不同类型的激素组合以及激素不同质量浓度而不同,培养基MS 2,4-D 2.0mg/L,MS 2,4-D 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L,MS 6-BA 1.0 mg/L IAA 1.0 mg/L,1/2 MS NAA 2.0 mg/L IBA 1.0 mg/L,茎诱导率分别为100%,90%,75%,75%,相对其比较对象而言,这些培养基的诱导率最高.     

激素对东北矮紫杉愈伤组织中紫杉醇积累的影响

为了利用植物生长调节剂组合促进东北矮紫杉愈伤组织生长和紫杉醇的积累,以东北矮紫杉幼茎为材料诱导愈伤组织,分析不同种类和水平植物生长调节剂条件下愈伤组织的增殖速度和紫杉醇含量.结果表明,东北矮紫杉愈伤组织在24 d的培养过程中基本呈"S"型;细胞生长对数期,紫杉醇积累下降或上升缓慢,进入生长稳定期,紫杉醇的含量达到最高值.适宜浓度的2,4-D和NAA均能促进东北矮紫杉细胞的生长,以1.5 mg/L 2,4-D组合最有利于东北矮紫杉愈伤组织的增值;6-BA组合有利于紫杉醇积累,其平均含量在100 μg·g-1之上.因此,利用植物生长调节剂促进东北矮紫杉愈伤组织生长及紫杉醇的积累是可行的.     

激素对杜仲幼茎愈伤组织诱导及生长的影响

以MS为基本培养基,添加不同浓度的2,4-D,NAA,IBA,BA,KT或其组合,研究杜仲嫩茎愈伤组织的诱导及生长情况。结果表明,3种生长素均可100%诱导出愈伤组织,以0.5mg/L2,4-D,0.5～1.0mg/LNAA,1.0mg/LIBA效果较好;2,4-D和BA及KT的组合均不利于愈伤组织诱导,低浓度的BA与NAA和IBA组合能促进愈伤组织的诱导和生长,其中1.0mg/LNAA+0.3～0.5mg/LBA,1.0mg/LIBA+0.5mg/LBA诱导出的愈伤组织生长旺盛,富有光泽,适合进一步继代培养,而高浓度则起抑制作用;KT的加入对愈伤组织的诱导及生长均起抑制作用。     

茶树愈伤组织诱导和组织培养

茶树愈伤组织诱导培养中,外植体类型、培养基种类、激素对愈伤组织的诱导均有影响。通过对培养条件的优化,得到了愈伤组织生长的适宜培养基：MS 2,4-D 1．0 mg/L NAA 1．0 mg/L 6-BA 0．5 mg/L。同时测定了愈伤组织在45 d内的生长曲线,在培养的第39 d,愈伤组织生长可达到最大值,其鲜重最大增殖倍数为4．14倍。     

除虫菊愈伤组织的诱导和继代

以除虫菊茎尖为外植体,MS培养基为基本培养基,对除虫菊愈伤组织的诱导和继代进行了系统研究。结果表明:外源激素2,4-D与KT的9种配比中,1.0与0.4mg/L的激素组合对除虫菊愈伤组织的诱导率可达88.0%;当蔗糖质量浓度为10～40g/L时,蔗糖质量浓度的大小与愈伤组织增长量成正比,与褐变开始时间呈负相关关系,当质量浓度为25g/L时,愈伤组织日平均生长量可达0.127g;适宜的光照时间可延长愈伤组织保存期并维持良好的组织结构,光照时间为4h/d时,愈伤组织褐化开始时间保持在27d左右。     

我国3种红豆杉各部位紫杉醇含量的比较

建立红豆杉试样制备方法和紫杉醇液相色谱分析条件.分析了红豆杉不同品种、不同部位的植物原料中紫杉醇含量存在明显差异.其中树干皮、根部皮、树叶、木材和枝叶的紫杉醇平均含量分别为2.94×10-4、3.11×10-4、4.30×10-5、3.08×10-5和5.59×10-5.建议以红豆杉枝叶为原料提取、分离紫杉醇,以保护和合理开发红豆杉资源.     

生长素对烟草愈伤组织中尼古丁,氨基酸含量及GOT活性的影响

在吲哚乙酸（ＩＡＡ）和２，４－二氯苯氧乙酸（２，４－Ｄ）增减基上生长的烟草愈伤组织，互相转移后进行继代培养，结果表明，ＩＡ能促进尼古丁的生成；每１００ｇ干重的愈伤组织中谷氨酸、天冬氨酸和脯氨酸的含是蛔３４．８６，３４８．２１和６０４．０１ｍｇ，２，４－Ｄ对尼古丁的生成起抑制作用；每１００ｇ干重的愈伤组织中总氨基酸下降含旦２１９１．８５ｍｇ。谷氨酸草酰乙酸转氨酶（ＧＯＴ）活性在黑暗条件下，随ＩＡＡ浓     

油菜素内酯对卷丹愈伤组织生长及分化的影响

以百合科草本植物卷丹为试材，研究了油菜素内酯(BL)对卷丹(Lilium lancifolium Thurb)愈伤组织生长及分化的影响。结果表明：MS 6-BA 1．0mg/L NAA0．1mg/L培养基中添加不同质量浓度的BL(0．001～1．000mg/L)，与对照相比，其愈伤组织鲜重增加率、愈伤组织分化率均有显著提高，浓度为0．010mg/L处理愈伤组织鲜重增加率最高，是时照的249％；浓度为0．100mg/L处理愈伤组织分化率最高，是对照的441％。处理组愈伤组织叶绿素含量、蛋白质含量与对照相比均有不同程度的提高，其中最有效的BL质量浓度是0．010mg/L。处理组愈伤组织过氧化物酶活性与对照相比均稍有降低，但差异并不显著。表明BL能促进卷丹愈伤组织的增殖及分化并有保绿作用。     

不同培养基对杜仲愈伤组织诱导和生长的影响

以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、WPM为基本培养基,分别添加1.0 mg/L NAA+0.3 mg/L BA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织诱导的研究;以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、1/2 MS为基本培养基,分别添加0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L BA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织继代培养的研究.结果表明,MS培养基有利于杜仲幼茎愈伤组织的诱导,而B5培养基不仅对叶的愈伤组织诱导有利,对茎和叶愈伤组织的继代培养也是最理想的.     

乙酸对杜仲愈伤组织胶含量的影响

对培养基中影响杜仲愈伤组织胶合成的前体物质乙酸浓度进行了研究。结果表明,以S4代杜仲愈伤组织为原料,随着培养基中乙酸浓度的增加,杜仲愈伤组织中胶含量不断提高,但过高浓度的乙酸会抑制愈伤组织的生长;最适乙酸添加浓度为1.0~1.5 mm o l/L,此时,不会影响愈伤组织的生长,且其平均增长率为1 977.97%,其平均含胶量达原植株的81.20%,从而提高了杜仲愈伤组织的含胶量。     

金银花愈伤组织诱导及绿原酸含量测定

优化金银花愈伤组织诱导主要条件,建立愈伤组织培养体系并测定其绿原酸含量。结果表明,金银花芽为最佳的诱导外植体,经过70%酒精30 s、5%的次氯酸钠10 min消毒处理,接种于激素配比为NAA 1.5 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.75 mg/L+6-BA 0.15 mg/L的MS培养基中,暗培养9 d后再进行光、暗交替培养,可诱导出淡黄色,疏松、生长旺盛的愈伤组织;愈伤组织生长曲线呈S型,24 d生长量为(21.62±0.54)g/瓶;通过高效液相检测,愈伤组织每100 g样品含有绿原酸57 mg。经验证金银花愈伤组织诱导条件稳定,含一定的绿原酸为进一步建立细胞悬浮培养体系高效生物积累金银花细胞及绿原酸功能成分奠定基础。     

红豆杉细胞中的酚类化合物含量与紫杉醇产量之间的关系

研究了在真菌诱导子诱导红豆杉细胞时酚类化合物与紫杉醇产量之间的关系。结果表明：真菌诱导子处理提高了细胞的G6PD、PAL的活性和酚类化合物含量;真菌诱导子和谷氨酸的联合处理也可提高细胞中G6PD、PAL的活性,且联合处理后的酶活性较真菌诱导子单独处理的要高。联合处理后紫杉醇产量与酚类化合物的变化相似,均是前期低于真菌诱导子处理,后期高于诱导子处理;PAL的抑制剂AOA显著降低真菌诱导子处理的酚类化合物和紫杉醇的产量,同时细胞死亡明显增加。因此认为,酚类化合物与细胞诱导时的紫杉醇产量有关,细胞诱导时保持一定浓度的酚类化合物有利于紫杉醇产量的提高。     

旱稻愈伤组织培养研究

以旱-1(H-1)和秦爱(QA)两种旱稻种子为材料,研究了不同培养基以及不同浓度的激素对旱稻愈伤组织培养的影响。结果表明,NB培养基可明显提高旱稻愈伤组织的出愈率,对旱-1而言,当2,4-D浓度为4.0mg/L、6-BA浓度为1.0mg/L时的愈伤组织出愈率最高;对秦爱而言,当2,4-D浓度为2.0mg/L、6-BA浓度为1.0mg/L时的愈伤组织出愈率最高。     

抗生素对新疆棉花愈伤组织诱导和生长的影响

通过抗生素对新疆３个棉花品种愈伤组织形成和生长影响的试验,结果表明头孢霉素和羧苄青霉素对其都有影响,其中羧苄青霉素的抑制作用较强,头孢霉素作为抑制农杆菌的抗生素较为适宜。     

植物生长调节剂对甘蓝型油菜愈伤组织诱导和生长的影响

利用植物组织培养方法,探讨甘蓝型油菜种子的最佳消毒方式以及叶片和茎段在附加不同质量浓度KT,6-BA,NAA,2,4-D的MS培养基中愈伤组织诱导的影响。结果表明,对于不同品种甘蓝型油菜种子采用2种消毒方式进行培养,污染率都较低。B1,B10,A5品种的第Ⅱ种消毒方式(75%酒精2 min+0.1%HgCl220 min)较好;B4品种的2种消毒方式(75%酒精2 min+0.1%HgCl2 20 min和75%酒精3 min+0.1%HgCl230 min)差别不大。B1,B4,B10,A5品种的甘蓝型油菜叶片和茎段愈伤组织诱导的结果表明,不同激素组合对叶片和茎段愈伤组织诱导及生长都有很大的影响,其中,MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于愈伤组织诱导及生长。     

黑莓愈伤组织细胞悬浮培养条件研究

为获得黑莓细胞悬浮培养的最佳条件,以黑莓品种Kiowa无菌苗叶片、叶柄产生的质地疏松的嫩黄色颗粒状愈伤组织为初始材料,考察了培养基种类、糖种类、蔗糖浓度、激素种类、2,4-D浓度、水解酪蛋白浓度对细胞悬浮培养效果的影响。结果表明:以MS为基础液体培养基、30 g/L蔗糖为碳源、附加1.0 mg/L2,4-D和200 mg/L水解酪蛋白处理愈伤组织,悬浮培养的效果最佳,可以获得最大生物量。