深层发酵用高产灵芝胞内多糖菌株的筛选

对41个杂交灵芝(Ganoderma lucidum)菌株进行深层发酵培养,评价其菌丝体干重、胞内多糖含量和得率,及胞内多糖分子量分布特征和刺激巨噬细胞释放NO的活性,结果表明:杂交菌株的菌丝体干重、胞内多糖含量和得率与亲本相比有不同程度的差异,与两个亲本相比,菌丝体干重提高的有29个菌株,胞内多糖含量显著增加的有3个...     

灵芝胞外多糖高产菌株筛选及其深层发酵培养基的优化

运用反馈抑制理论构建了耐灵芝胞外多糖 (EPS)反馈抑制的筛选模型。添加在筛选培养基中的其指示因子同源胞外多糖浓度为 2 .34g/L。将实验室保藏的 37株灵芝菌株输入该模型 ,即可检出耐灵芝胞外多糖反馈抑制作用最强、产胞外多糖能力最强的菌株GL0 2 9。然后在基础培养基的基础上用正交试验方法优化GL0 2 9深层发酵培养基。结果表明 ,组合碳源和组合氮源培养基最适合该菌株深层发酵生产灵芝胞外多糖。深层发酵培养基配方为 :蔗糖 10 g/L ,玉米粉15 g/L ,蛋白胨 2 g/L ,酵母膏 1g/L ,KCl 0 .5g/L ,KH2 PO4 ·7H2 O 0 .5 g/L ,pH自然。于 30℃、12 0r/min摇瓶培养 9d ,该菌株的胞外多糖产量高达 3.0 7g/L。     

深层发酵灵芝高产菌株筛选初探

将从各地收集到的24个灵芝菌株进行深层发酵培养，通过比菌丝生长速度和发酵生物量，筛选出8个优良菌株。根据菌株间拮抗反应及蛋白酶同工酶分析结果，确定8个菌株中的G2和G15、G33和G27为同一菌株，属同株异名，进一步比较8个菌株的菌丝发酵生物量，胞内，胞外多糖含量等指标，确认菌丝发酵生物量，胞内多糖含量较高的灵芝0770为液体深层发酵首选菌株。     

灵芝多糖发酵工艺优化

研究了灵芝多糖发酵中碳源、氮源、pH对多糖积累的影响。结果表明,葡萄糖、玉米粉、蛋白胨均有利于菌丝的生长和多糖的形成。其对发酵影响顺序为碳源>氮源>pH。通过正交优化实验确定了灵芝多糖最佳发酵培养基:葡萄糖3%、玉米粉3%、蛋白胨0.3%、麸皮5%、(NH4)2SO4)0.2%、MgSO4.7H2O 0.05%、KH2PO40.1%。在10L发酵罐上灵芝多糖最高达14.2g/L。     

光照对灵芝液体发酵胞外多糖合成的影响

以灵芝为试验材料,采用干质量法测定生物量,苯酚-硫酸法测定胞外多糖产量,研究了单色LED光照处理对灵芝菌丝体液体发酵合成胞外多糖的影响。结果表明:在80μmol·m^-2·s^-1 LED光照12h条件下,不同LED光照处理均能促进细胞生长和胞外多糖合成,其中白光LED最有利于细胞生长,蓝光LED最有利于胞外多糖合成。综合考虑生物量和胞外多糖产量,以100μmol·m^-2·s^-1蓝光LED光照10h效果最佳,生物量和胞外多糖产量分别为15.16g·L^-1和3.102g·L^-1,比黑暗处理提高了45.91%和109.74%。光照对灵芝细胞生长和胞外多糖合成具有调控作用,为灵芝液体发酵合成胞外多糖的高效定向生产提供指导。     

营养和培养参数对深层培养灵芝生产多糖的影响

研究了各种营养成分和培养参数(pH,温度,氮源可利用性,C∶N,搅拌速度,接种量)对在生物反应器可控条件下利用合成培养基深层培养灵芝生产多糖的影响.所生产的多糖大部分(通常80%以上)为胞外多糖(EPS),分泌到培养液中,菌丝多糖(MAP)只占不到20%.在pH5.0条件下,总多糖(EPS和MAP)生产量和菌丝生长量最高.在28～34℃范围内,多糖产量在34℃培养条件下最高,并随着温度降低而下降.低氮条件下,菌丝生长较弱,多糖产量较低.多糖生产量(主要是胞外多糖)随着接种量的增加而提高,菌丝多糖的生产则相反.利用高效液相色谱(HPLC)凝胶层析法分离出两个胞外多糖组分,其洗脱时间为26.5和36.5 min,分子量分别为137和4.7 kDa;菌丝多糖有一个大的峰(40 min)和一个很小的峰(28 min),其分子量分别为1.57和76.6 kDa.菌丝多糖的HPLC凝胶层析色谱和从灵芝子实体中提取的多糖相似.本研究所采用的各种培养条件下生产的多糖(EPS和MAP)具有可重复性的HPLC色谱.     

糙米为主要原料的灵芝深层发酵条件优化

对以糙米浆、麦芽汁和黄豆芽汁为培养基组成的灵芝深层发酵条件进行优化,结果表明：灵芝深层发酵的起始pH5．5、接种量10％、装液量40mL和接种菌龄5d时可以获得最大灵芝菌丝干重。方差分析表明装液量和接种菌龄对灵芝生长有显著影响。在优化发酵工艺条件下,发酵第7d胞外多糖产量达到5．7g／L。     

赤芝G2深层发酵优化模式的研究

以菌丝体生物量为主要指标,研究了发酵培养基中不同碳源、氮源、C/N比、无机元素等营养因子和接种量、装液量、初始pH、转速等非营养因素对赤芝G2菌丝生长的影响。研究结果表明,赤芝G2规模发酵最适培养基配方为：豆饼粉2％,玉米粉3％,KH2PO40．1％和MgSO40．05％。发酵76h,菌丝体生物量最高(1．15g/100mL);发酵62h,胞内多糖含量最高(22．15％);发酵60h,胞外多糖含量最高(3．16％)。赤芝G2菌丝深层发酵的优化条件为：起始pH自然,种子液摇瓶装量40％,规模培养装液量20％,接种量10％,发酵培养时间76h。     

金地灵芝液体发酵产胞外多糖的营养条件优化

以金地灵芝为试材,探究了碳源、氮源及无机盐对其液态发酵产胞外多糖量的影响,通过单因素试验并运用Design Expert软件设计响应面试验优化发酵培养基的组分,以得到金地灵芝液态发酵产灵芝多糖的最优培养基配方。结果表明:优化后的最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为蛋白胨,最佳辅助无机盐为MgSO_4·7H_2O,最优培养基配方为3.98%玉米粉,0.68%蛋白胨,0.21%MgSO_4·7H_2O,0.05%K_2HPO_4,0.05%KH_2PO_4,0.001%维生素B_1。优化后胞外多糖得率提高了30.14%。     

灵芝多糖液体发酵条件优化

从一系列灵芝(Ganoderma sp.)菌种中筛选出多糖产量高、生长快的紫灵芝菌株(G.japoncium),研究了不同氮源、碳源及金属离子对紫灵芝产多糖的影响。结果表明,以2%的蔗糖为碳源,0.2%的豆饼粉为氮源,0.2%的FeSO4为培养基可获得较高多糖。发酵罐放大实验表明,采用同样的培养基,每100mL发酵液胞外粗多糖含量可高达181.7mg,每100mL发酵液菌丝体含量可高达151.0mg,发酵过程中pH值的变化比较缓和,相对摇瓶生长,发酵生产可获得更多的灵芝多糖。     

赤芝深层培养及营养液研制

分别以赤芝（Ganoderma lucidum）深层发酵液和菌丝体提取液为主料，配伍以几种中药材和调味料，正交方法设计配方，配制两种赤芝营养液。分别从27个样品中初选5个色、香、味、形均较佳的样品，进一步进行理化指标的测定和感观鉴定评分，所获数据通过计算机编程统计分析。获得最佳配方设计。     

树舌灵芝复合诱变选育漆酶高产菌株

以一株产漆酶树舌灵芝的菌丝片段为试材,利用紫外线和硫酸二乙酯逐级诱变;采用愈创木酚显色圈初筛突变菌株,并通过摇瓶复筛对优势菌株产酶能力进行验证,以期选育稳定高产漆酶菌株。结果表明:最终诱变获得一株遗传稳定的高产突变株,与原始菌株相比,漆酶活性提高63.3%,同时发酵周期缩短1 d。     

灵芝多糖的药理和保健作用及应用前景

灵芝多糖是灵芝中的主要有效成分之一。它作为一种重要的生物免疫调节剂,具有广泛而显著的药理活性,能提高机体免疫力、抑制肿瘤,是目前最有开发前途的药用资源和保健食品添加物。     

三种药用灵芝摇瓶发酵营养生理的比较研究

本文比较研究了赤芝Ganoderma lucidum,紫芝Ganoderma sinense,甜芝Ganoderma sp.等3种不同物种灵芝的液体发酵的营养生理特性结果表明：供试灵芝在不同碳源、氮源的液体培养基中进行深层振荡发酵，分别获得不同产量的菌体细胞、胞外多糖、胞内多糖试验发现3种灵芝均以玉米淀粉为最佳碳源，检定的3种目标代谢产物量均显著高于葡萄糖、麦芽糖等碳源，但不同物种灵芝在特定碳源条件下表达的菌体生物量与胞外多糖、胞内多糖产量之间的相关性呈现不同规律试验还对不同氯源条件进行比较，结果显示：3种灵芝均在以酵母粉为有机氯源的培养基中产生较高量的菌体细胞和胞内多糖．但发酵产生胞外多糖的最适氮源不尽相同．赤芝为酵母粉，而紫芝和甜芝则为无机氮源(NII4)2SO4上述主要结果对灵芝类药用成分的发酵生产工艺具有参考价值。     

六种灵芝子实体多糖含量的对比分析

采用超声波辅助热水提取法研究了6种灵芝子实体多糖的含量。结果表明:4号九龙山灵芝子实体多糖含量最高;正交实验所得灵芝子实体多糖最佳超声提取条件为:提取温度70℃、提取时间35 min、料液比1∶40。在精密度试验中,RSD在0.21%～0.61%之间,表明精密度较好;在稳定性试验中,RSD在0.70%～4.63%之间,表明在0～8 h之间的稳定性较好。     

西藏野生灵芝粗多糖提取工艺研究

采用正交试验,对影响灵芝多糖提取的4个主要因素（料水比、提取温度、提取时间、醇析浓度）进行了最佳工艺条件研究。结果表明,提取灵芝子实体粗多糖采用水提醇沉法,最优工艺条件为：料水比1∶50,提取温度90℃,提取2次,每次提取2h,90%乙醇醇析,3000r/min离心30 min取沉淀,sevage法除游离蛋白,离心取上层液即为灵芝粗多糖溶液。苯酚-硫酸法测定灵芝子实体粗多糖含量约为0.734%,这一含量在全国灵芝子实体多糖含量中处于中等水平,还有待于进一步的研究和开发利用。