某规模化猪场母猪子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及耐药性分析

为了研究某规模化猪场子宫内膜炎病原菌的类型及筛选可用于临床的敏感药物,试验对该猪场的4头母猪子宫脓液进行病原的分离、鉴定和药敏试验。结果表明:从4份脓液中共分离到4株细菌,经培养特性、生化鉴定和动物试验鉴定为溶血性不动杆菌1株、铜绿假单胞菌1株、产碱杆菌2株,且均有较强的致病性;15种药物中,溶血性不动杆菌仅对先锋霉素、头孢氨噻和痢特灵高度敏感,铜绿假单胞菌和产碱杆菌对左氧氟沙星、氟哌酸和恩诺沙星高度敏感,对其他药物的敏感度各不相同。     

发酵床养猪模式中垫料的主要菌群分析

为研究南方高热高湿地区发酵床养殖模式的微生态菌群分布,以四川邛崃、遂宁两大发酵床养猪场为研究对象,采集不同年龄阶段猪只肠道内容物及不同饲养阶段发酵床垫料进行细菌分离,对分离菌株进行动物致病性试验,并对致病菌进行耐药性分析。结果表明,不同年龄猪肠道以及发酵床分离细菌种类相同,但是细菌含量存在差异。主要分离菌有大肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌、黏液性枯草芽孢杆菌、普通枯草芽孢杆菌。小鼠致病性试验显示,大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌为致病菌,黏液性枯草芽孢杆菌与普通枯草芽孢杆菌为有益菌。病原菌耐药性分析结果显示,分离到的4种病原菌仅对第3代头孢类药物(头孢曲松钠、头孢吡肟)敏感,对其他药物不敏感或敏感性低。可见,发酵床养猪模式的环境中存在大肠杆菌、葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌等致病菌的威胁,且致病菌的耐药性严重,一旦发病很难用药物控制。本试验结果可为发酵床养猪模式细菌性疾病控制提供参考。     

6株猪源芽孢杆菌的分离鉴定及其益生性研究

本研究旨在通过高温处理和常规厌氧菌分离法从健康肥猪粪便中分离芽孢杆菌,并通过培养性状、生化试验、PCR、肠道耐受、抗菌活性和接种试验动物等方法鉴定筛选性状稳定、优良的益生性芽孢杆菌。结果显示,共分离到6株芽孢杆菌,其中1株巨大芽孢杆菌、1株死谷芽孢杆菌、2株解淀粉芽孢杆菌和2株枯草芽孢杆菌;分离菌对多黏菌素和青霉素耐药性较强,对其他12种常用药物较敏感,对致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好;4种芽孢杆菌均可在酸性、高胆盐和高温条件下生存,特别是巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌耐受能力较强;分离的芽孢杆菌对小鼠均无致病性,其中巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌有较明显的促进试验动物生长的作用。结果提示,巨大芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌可作为益生性芽孢杆菌的初步选择。     

枯草芽孢杆菌的分离与初步鉴定

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种短杆状、无荚膜、能运动的革兰阳性细菌,内生芽孢,其分布非常广泛,在土壤、湖泊、海洋、动植物体表等处皆能发现。枯草芽孢杆菌是我国农业部允许作为饲料添加剂的两种芽孢杆菌之一,因其制剂是无毒、无残留、无污染的绿色添加剂,故具有广阔的发展前景,并在饲料添加剂、污水处理、生物农药、疫苗载体等各方面已经得到了广泛的应用[1-3],显示了巨大的社会效益和生态效益。试验自土壤中分离得到1株枯草芽孢杆菌,并对该菌株进行了鉴定,旨在为枯草芽孢杆菌基因功能的研究以及进一步开发利用奠定基础。     

大肠埃希氏菌和蜡样芽孢杆菌致犊牛腹泻的诊治

为了对某肉牛场发生的犊牛腹泻进行诊断和治疗,采集了发病犊牛的肝脏和脾脏,通过细菌分离鉴定和小鼠致病性试验对其进行诊断。最终分离到1株蜡样芽孢杆菌和1株致病性大肠埃希氏菌,致病性试验发现所分离的蜡样芽孢杆菌和致病性大肠埃希氏菌接种小鼠会使其分别在36 h和24 h全部死亡。同时,结合发病犊牛的临床表现确诊为致病性大肠埃希氏菌混合蜡样芽孢杆菌感染引起的腹泻。药敏试验结果显示致病性大肠埃希氏菌对头孢噻呋钠、硫酸庆大霉素和复方磺胺氯达嗪钠敏感,蜡样芽孢杆菌对庆大霉素、氟苯尼考、万古霉素和恩诺沙星敏感。对发病犊牛进行隔离,参考药敏试验结果配合中药处方等措施,犊牛病情得到有效控制。     

牦牛源枯草芽孢杆菌分离培养与鉴定

为得到稳定性高、抗逆性强的枯草芽孢杆菌，试验从健康牦牛的新鲜粪便中分离、纯化枯草芽孢杆菌，分离出4株枯草芽孢杆菌。之后进行形态学鉴定、多项生化鉴定、琼脂糖凝胶电泳试验。结果表明，革兰氏染色为蓝色棒状或杆状菌，生化鉴定符合枯草芽孢杆菌生化反应，确定为枯草芽孢杆菌，编号为BS-1,BS-2,BS-3,BS-4。通过耐胆盐、耐高温等耐受性试验，结果显示，BS-3整体耐受特性最好，在4株菌株中稳定性最高、抗逆性最强。结合试验目的，推断BS-3作为枯草芽孢杆菌益生菌制剂潜力较高。     

枯草芽孢杆菌细菌素的分离、表达及稳定性分析

旨在分离枯草芽孢杆菌及其所产细菌素,并分析重组表达后的细菌素的抑菌活性和稳定性。通过牛津杯扩散法筛选羊驼粪便中高产细菌素的芽孢杆菌;借助16S rRNA鉴定分离菌;采用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、SDS-PAGE、质谱分析等技术获得细菌素的氨基酸序列;利用大肠杆菌表达系统对细菌素进行体外表达,并利用牛津杯扩散法测定其抑菌活性和稳定性。结果显示,分离菌是一种枯草芽孢杆菌,命名为枯草芽孢杆菌SXAU18,其可产生抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌生长的细菌素;枯草芽孢杆菌SXAU18所产细菌素可能是分子量为10～20 ku的DarA蛋白和两种未知蛋白,属于类细菌素的范畴,将未知蛋白分别命名为BLIS SXAU181和182;经原核表达的BLIS SXAU181和182主要以可溶性上清蛋白形式表达,纯化后为单一条带;重组BLIS SXAU181蛋白没有抑菌活性,重组BLIS SXAU182蛋白具有良好的抑菌活性,且具有耐高温、耐酸碱、耐人工胃液和肠液的的特性。综上,本研究从枯草芽孢杆菌SXAU18分离到具有抑制革兰阳性菌生长活性的细菌素,且重组表达后的BLIS SXAU18...     

蜜蜂球囊菌的分离鉴定及体外抑菌试验

蜜蜂白垩病在世界各地呈现稳定高发态势,为了找到防治该病的有效方法,对疑似白垩病虫体进行真菌分离鉴定及体外抑菌试验。用点种法对虫体进行真菌分离培养;用显微观察法对分离菌进行形态学鉴定;用PCR扩增法,对分离菌菌丝进行分子生物学鉴定;用PDA液体试管培养法,做枯草芽孢杆菌抑制分离菌菌丝试验;用PDA平板培养法,做枯草芽孢杆菌抑制分离菌菌斑生长及孢子萌发试验。结果得到4株分离株;分离菌菌丝直径、孢子球直径、孢子长宽比均与蜜蜂球囊菌的大小一致;分离菌约580bp处出现目的条带,16S r DNA基因序列同源性与蜜蜂球囊菌最高;在PDA液体试管中,分离菌菌丝停止生长;在PDA平板上,分离菌菌斑逐渐萎缩消失;在PDA平板上,分离菌孢子不萌发。结论分离菌为蜜蜂球囊菌;枯草芽胞杆菌可抑制蜜蜂球囊菌生长,可用于蜜蜂白垩病的防治。     

一株猪A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

对东营某猪场送检猪病料进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、生化试验、药敏试验、致病性试验和PCR鉴定.结果成功分离到一株血清A型多杀性巴氏杆菌,该菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株.     

重庆动物园麋鹿蜡样芽孢杆菌的分离及鉴定

为了确定重庆动物园麋鹿死亡的病因,试验首先对死亡麋鹿进行解剖,采集肝脏于血琼脂培养基上,分离培养得到1株菌株,进行形态观察、革兰氏及芽孢染色、生理生化试验、PCR鉴定及致病性的检测。结果表明:成功分离1株病原菌株,该菌株菌落呈灰白色,不透明,表面粗糙似融蜡状,边缘呈扩散状;革兰氏染色,两端着色多,呈短链或长链状排列;芽孢染色可见芽孢呈椭圆形,位于菌体中央或偏端,与蜡样芽孢杆菌特征相同;生理生化特征与蜡样芽孢杆菌一致;PCR检测及序列分析,证实为蜡样芽孢杆菌;该分离菌能致死小鼠,说明该菌具有致病性。     

一株鸡源芽孢杆菌的分离鉴定和益生性研究

芽孢杆菌是家禽微生态制剂中应用最多的益生菌,对家禽消化道保健具有很好的临床功效。为了筛选出鸡源芽孢杆菌用于临床肉鸡养殖保健,试验从肉鸡的盲肠中分离获得一株芽孢杆菌,并对其理化特性和益生性进行了研究。结果显示:芽孢杆菌的染色、菌落和生化性质符合枯草芽孢杆菌的特征。益生试验显示枯草芽孢杆菌具有耐酸、耐高温、产酶的特性。药敏试验显示枯草芽孢杆菌对抗生素敏感。说明分离到的枯草芽孢杆菌具有临床应用的价值。     

猪粪高效除臭菌群的组合筛选研究

本研究为了使除臭菌可以高效的在猪粪实际堆肥中使用,在筛选出的枯草芽孢杆菌、米曲霉、生香酵母、细黄链霉菌4种除臭菌的基础上,采用L8(27)正交试验,设计高效除臭菌组合进行堆肥试验。结果表明:"米曲霉+枯草芽孢杆菌"为最优组合,0~15 d对NH3的去除率与其他组合相比差异显著;与空白对照相比,"米曲霉+枯草芽孢杆菌"对NH3和H2S有显著提高。     

规模化猪场副猪嗜血杆菌的部分生物学特性研究

为了查明流行于新疆北部部分地区部分规模化养猪场副猪嗜血杆菌的存在情况及其部分生物学特性,本试验以新疆北部地区几个规模化猪场为研究对象,从可疑副猪嗜血杆菌病病料中分离目标菌,采用微生物学与免疫学的试验手段,调查其主要流行株的生物学特性,包括生理生化特性、培养特性及分子特性,并对分离株进行了药敏试验及对小白鼠的致病性试验。试验结果表明,该地区规模化猪场中已普遍存在副猪嗜血杆菌病的感染,5株分离株对小白鼠均有较强的致病性,而且对硫酸庆大霉素和盐酸土霉素已经产生了耐药性。     

发酵床养猪模式中猪肠道与垫料间的菌群相关性分析

为研究发酵床养殖模式的菌群分布,采集发酵床猪场不同饲养阶段的猪肠道内容物和发酵床垫料进行细菌分离,检测菌株的致病性与耐药性。结果表明,从各阶段猪的肠道内容物和垫料中均可分离到大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌和普通枯草芽孢杆菌,在各垫料样品中分离到了黏液性枯草芽孢杆菌,但同种细菌在不同样品中的含量不同;分离到的大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌和葡萄球菌中均存在耐药性严重的致病菌株。研究结果显示,发酵床的垫料和猪肠道内容物中含有的细菌种类基本相同,但含量差异较大,表明细菌与环境之间具有双向的选择性和适应性。     

雁门关地区奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定及其致病性

为给黄土高原舍饲养殖场科学防治奶牛子宫内膜炎提供理论依据,对该地区2市4县13个规模奶牛场和5个自然村,共77头患子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物进行细菌分离鉴定,并对致病性不明的主要分离菌进行了大鼠子宫致病性试验。结果分离鉴定出12个菌属、23个菌种、108株细菌,主要细菌为芽孢杆菌(30.56%)、大肠埃希菌(14.81%)、肠球菌(12.96%)、葡萄球菌(9.26%)、乏养球菌(9.26%)、链球菌(6.48%)等;对主要分离菌的致病性研究发现除缺陷乏养球菌外,凝结芽孢杆菌、大肠杆菌(O20)、屎肠球菌等均可引起子宫内膜炎。表明引起该地区奶牛子宫内膜炎的致病菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、化脓链球菌、不动杆菌、凝结芽孢杆菌、大肠杆菌(O20)、屎肠球菌,可为有效治疗本地区奶牛子宫内膜炎提供可靠的理论基础。     

猪多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

从黑龙江省某猪场发生的以呼吸道症状为特征的病死猪脏器中分离到3株细菌,通过触片镜检、细菌分离培养、常规生化试验和小鼠致病性试验等对该菌进行了初步鉴定,并进行了药敏试验检测。结果表明,分离菌为多杀性巴氏杆菌,对氟哌酸、丁胺卡那霉素、庆大霉素、红霉素、氯霉素敏感。     

新疆石河子地区部分规模化猪场猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

本试验选择了石河子地区部分规模化猪场为研究对象,采集疑似由呼吸道引起死亡的仔猪病变组织共36份,进行该细菌的分离鉴定,同时采用纸片扩散法（K-B法）对分离株的耐药性进行了检测。经过对组织病料进行分离鉴定,结果共分离出猪多杀性巴氏杆菌共12株,该菌的检出率33.3%,经过对其中4株菌分别为XNC001、XNC002、XNC003、XNC004进行了小鼠接种试验,结果4株菌致死率分别为25%、100%、100%、75%,表明该地区各个规模化猪场流行的猪多杀性巴氏杆菌致病有差异显著,同时对该地区分离的12株猪巴氏杆菌药敏试验可知,该菌对先锋Ⅵ,环丙沙星,氯霉素敏感性较强,其敏感率分别为83.3%、75%、75%,而该细菌均对其他几种抗生素的耐药性较强,该细菌对四环素的耐药率达到了66.7%。     

猪粪除臭菌不同组合的堆肥试验

为了使除臭菌可以高效在猪粪实际堆肥中使用,在前期筛选出的枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、生香酵母、米曲霉4种除臭菌的基础上,采用L_8(2~7)正交试验,优化设计其高效除臭组合,进行堆肥试验。结果表明,"枯草芽孢杆菌+米曲霉"为最佳组合。     

一株疑似胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验

从湖南长沙某猪场疑似胸膜肺炎放线杆菌感染的病料中分离到一株革兰氏阴性球杆菌,经V因子依赖试验、生化试验、PCR鉴定及致病性试验等,确认该菌为胸膜肺炎放线杆菌,并且具有较强的致病性.药敏试验结果表明,该菌对恩诺沙星、奈替米星、氧氟沙星等高度敏感,对阿奇霉素不敏感.     

一株产抗单增李斯特菌细菌素的枯草芽孢杆菌C3产芽孢条件的优化

枯草芽孢杆菌C3可产抗单核细胞增生李斯特菌的细菌素,有良好的抗逆性,具备开发为微生态饲料制剂的潜力。为提高该菌的芽孢数量和产孢率,对其产芽孢条件进行优化。通过单因素试验及正交试验对枯草芽孢杆菌C3的产孢培养基和培养条件进行研究。结果表明,优化后的产芽孢培养基为麸皮1.0%,花生饼粉1.0%,CaCl_2 1.0%,pH 7.5;优化后的培养条件为装液量50 m L/250 m L,接种量2.0%,摇床温度40℃,160 r/min,培养时间36 h。在优化条件下,芽孢数达41.60亿CFU/m L,产孢率为91.42%。