草莓主栽品种高效再生体系的建立

以2个主栽草莓品种森嘎拉、戈雷拉为试材,研究影响草莓不定芽再生的各种因素,建立离体叶片高效再生系统,为草莓的遗传转化研究与应用奠定基础。试验结果表明：对某一特定的品种来说,外植体基因型和外源激素种类及其合适浓度是决定再生的主要因子。MS＋TDZ2．0mg／1＋2,4-D0．2mg／1最适合“森嘎拉”不定芽的分化,再生频率达74．1％MS＋TDZ2．0mg／1＋IBA0．1mg／l＋2,4-D0．1mg／l最适合“戈雷拉”不定芽的分化,再生频率迭21．8％。10-30d叶龄的叶片再生能力较强。     

两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立

以Sunrise和Geo两个蓝莓品种试管苗叶片为外植体材料,以改良的WPM为基本培养基,研究了暗培养时间、叶片放置方式和不同浓度激素组合（ZT、IBA、TDZ）对2个蓝莓品种叶片不定芽再生的影响。结果表明：最适的暗培养时间为14d,近轴面放置效果最好,不同基因型不定芽再生能力不同,Sunrise品种在WPM＋4．0mg／L ZT＋0．3mg／L IBA＋1．0mg／L TDZ＋20g／L蔗糖＋6g／L琼脂培养基中生长最好,离体叶片不定芽再生频率达100％,再生不定芽数可达4．5个以上;Geo品种最适宜培养基为WPM＋4．0mg／LZT＋0．3mg／LIBA＋20g/L蔗糖＋6g／L琼脂,叶片不定芽再生频率达到100％。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

长白山笃斯越桔离体器官再生不定芽的研究

以长白山笃斯越桔组培苗为试材,研究了外植体类型、培养基种类、植物生长调节剂组合、暗培养时间对笃斯越桔不定芽再生的影响。结果表明,以组培苗叶片为外植体的再生不定芽效果好于叶柄和无芽茎段,基本培养基中以改良MS最为适合,1／z改良MS、1／4改良MS培养基均不利于不定芽的再生,培养基中添加ZT的诱导效果好于TDZ、IBA。改良MS为基本培养基附加ZT2．0mg／L和IBA0．3mg／L,暗培养14d后转到光下培养30d,可以使再生频率达到78％,再生芽数达到12．6。     

桉树再生系统的研究

通过试验，获得了桉树4种再生系统：①芽繁芽离体培养快繁。以侧枝木桩萌芽做外植体，6-BA1．0mg／L和NAA0．5mg／L作诱导激素．通过腋芽萌动、增殖而获得大量的再生芽；②愈伤组织芽器官发生。以子叶、胚轴等作外植体．改良MS培养基附加6-BA1．0mg／L和NAA1．5mg／L诱导愈伤组织，再转到TDZ(0．1～0．5mg／L)或6-BA(1．0～2mg／L)加NAA(0．2-0．5mg／L)的组合中诱导芽的分化；③胚状体发生。用以上方法获得愈伤组织后．选择适宜的材料转到TDZ1．0mg／L和Casein 1g／L的组合中培养．形成胚状体并发育成不定芽；④叶片直接成芽再生。用种子苗或离体培养中的嫩叶作外植体，用0．4mg／LTDZ和3．0mg／LNAA作诱导激素，可直接形成不定芽。同时．在相同的再生途径中，不同的外植体来源或不同的激素组合对桉树的再生有着一定的影响。     

虎眼万年青离体快繁体系及无糖生根培养

以虎眼万年青的叶片为外植体，对不同激素浓度的愈伤组织和不定芽的诱导情况以及再生芽的无糖培养情况进行了研究。结果表明：适于愈伤组织诱导及不定芽分化的培养基为MS BA1．0mg／L NAA0．1mg／L，适宜的继代培养基为MS BA0．5mg／L NAA0．1mg／L)用无糖培养体系进行生根培养时，基质中NAA浓度为0．1mg／L时，再生芽的生根率达94％，种苗质量优于常规组培。     

‘丰香’草莓叶片再生体系的建立

以草莓(Fragaria ananassa Duch.)主栽品种‘丰香’叶片为外植体,就不同质量浓度生长激素对叶片外植体成活率、愈伤组织、不定芽的诱导率和再生芽生根培养的影响进行了研究,并建立了再生体系.结果表明:MS+1.5 mg/L噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)+0.4 mg/L吲哚乙酸(3-indolebutyric acid,IBA)培养基最适于叶片不定芽分化,再生芽在1/2MS+0.1 mg/L IBA培养基上生根效果最好.     

棉花子叶离体培养与植株再生

以棉花无菌苗子叶为外植体，就激素对其不定芽的分化及植株再生的影响进行了研究。实验结果表明，BA对子叶不定芽的诱导效果最好；TDZ次之，ZT和KT不能诱导子叶形成不定芽，IAA与BA配合使用，叶片不定芽分化频率明显提高；NAA与BA配合使用叶片不定芽分化频率有所下降；2，4－D对子叶不定芽分化有明显的抑制作用。在分化培养基中添加1．5mg/L GA3有利于芽的伸长。不定芽伸长后在不含激素的MS或MS＋0．5mg/L NAA培养基上诱导生根，形成完全植株。     

影响冬枣叶片再生不定芽的主要因素

为给冬枣的遗传改良提供依据,以冬枣组培苗叶片为试材,研究了影响其叶片再生不定芽的主要因素,包括基本培养基、pH值、激素种类和浓度配比以及培养条件。结果表明:适宜冬枣叶片分化的基本培养基为MS,适宜的pH值为5.8~6.0,TDZ为诱导冬枣叶片不定芽再生的最佳激素;冬枣叶片不定芽再生的适宜培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,平均再生率达到92.52%,平均出芽数4.64个。接种后暗培养14 d有利于叶片分化。     

罗汉果叶片培养及其不定芽形成的细胞学观察

以罗汉果叶片为外植体,探讨了不同基本培养基、不同培养方式、不同植物生长调节剂对不定芽分化的影响,并对不定芽的形成进行了细胞组织学观察。结果表明：基本培养基以改良MS较为适宜,在附加6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L的固体培养基中,平均每块愈伤组织再生芽高达5．6个。叶片正面接触培养基的培养方式芽分化率达到90．3％。芽苗在1／2MS＋NAA0．2mg／L＋IBA0．5mg／L＋蔗糖20∥L的固体培养基中诱发生根效果最好。硝酸银对不定芽分化具明显效果,分化率达到86．7％。细胞学观察发现,不定芽起源于叶片紧密愈伤组织表层。     

玉米自交系幼胚高效再生系统的建立

以22份玉米自交系为试验材料,以幼胚为外植体,研究基因型、诱导（分化）培养基、继代次数、Ag-NO3浓度对玉米幼胚胚性愈伤组织的诱导、保持和植株分化的影响。结果表明,玉米幼胚培养能力受基因型、培养基及二者互作效应的影响,基因型是主要的影响因子。3 mg/L的2,4-D对胚性愈伤组织诱导和保持起关键作用;0.5 mg/L 6-BA抑制胚性愈伤组织的发生;8-12 mg/L AgNO3明显改善部分基因型愈伤组织质量,提高胚性愈伤组织诱导率。分化培养基中添加1 mg/L的KT和0.5 mg/L的IBA促进绿苗的分化和根系的生长。胚性愈伤组织继代3-5次后调整到最佳状态。确定了玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为N6＋3 mg/L 2,4-D＋8-12 mg/L AgNO3＋0.2 mg/L IAA,最佳分化培养基为N6＋1 mg/L KT＋0.5 mg/L IBA。     

唐菖蒲离体直接再生技术的研究

以唐菖蒲品种Advanced red的籽球、无菌根为外植体,研究了不同植物生长激素种类和浓度、硝酸银、籽球切割方式等因素对唐菖蒲离体直接再生的影响.结果表明:籽球切片直接再生植株的能力最强,无菌根次之.籽球切片直接诱导不定芽再生的最佳培养基为MS 2,4-D 0.6 mg/L 6-BA 1.1 mg/L AgNO3 1.5mg/L,不定芽再生率为85.95%,平均再生芽数为14.10;籽球接种方式以横切为宜,正反面对不定芽再生均无影响,而纵切接种只产生不定根;最佳生根培养基为MS IBA 0.5 mg/L,生根率达到91.81%,单苗根数为18.97.     

白菜类作物子叶高频再生体系的建立

以大白菜品种北京80号、油青矮脚45天菜心、四季菜心王的带柄子叶为外植体,研究不同基因型、苗龄、激素组合、预处理条件及琼脂质量浓度对不定芽再生的影响。结果表明,北京80号的最佳培养基为MS+5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+2mg/L AgNO3,再生频率为83.6%;油青矮脚45天菜心和四季菜心王的最佳培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+1 mg/L NAA+2 mg/L AgNO3,再生频率分别为73.1%和83.2%。3个基因型的带柄子叶在0.5～1mg/L 2,4-D中预处理3d,再生频率达84%以上。4～5d苗龄的外植体诱导不定芽效果较好。琼脂的质量浓度以12g/L为宜。通过不定芽继代培养和生根驯化建立白菜类作物较高再生频率的再生体系。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

甘蓝型黄籽油菜高油品系下胚轴再生体系研究

为获得甘蓝型油菜高含油量双低恢复系,育成高含油量双低油菜杂交种,以2个不同甘蓝型黄籽油菜高油双低品系(GY1、GY2)下胚轴为外植体,采用正交设计,研究了预培养基中2,4-D和6-BA质量浓度、预培养时间、分化培养基中NAA和6-BA质量浓度组合以及AgNO3质量浓度5种不同因素对其下胚轴芽苗再生的影响。结果表明,除AgNO3质量浓度外,其他4种因素对2个油菜品系下胚轴芽苗再生均具有显著或极显著影响。2个油菜品系间和不同处理间的芽苗再生频率差异均达显著水平,且油菜品系与处理间存在明显互作效应。4d苗龄,在MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 0.5mg/L预培养基上预培养3d后,在添加NAA 0.05mg/L+6-BA 2.0mg/L的分化培养基中芽苗再生频率最高,GY1和GY2的下胚轴芽再生频率分别为45.2%和41.7%。初步建立了甘蓝型油菜高油品系的下胚轴再生体系,为高含油量油菜遗传转化奠定了基础。     

马蹄金愈伤组织诱导及植株再生研究

以马蹄金无菌苗的下胚轴、子叶和叶片作为外植体，结合不同植物生长调节剂组合和不同基本培养基，探讨了马蹄金离体培养的方法和影响因素。结果表明，不同植物生长调节剂组合的培养基对愈伤组织诱导频率有显著影响，以MS培养基作愈伤组织诱导的基本培养基效果较好，使用MS 1．0mg／L2，4-D 0．2mg／L 6-BA或MS 1．0mg／L2，4-D 0．2mg／L KT作为愈伤组织诱导培养基，对3种外植体愈伤组织诱导的效果均较好，出愈率均为100％，而且愈伤组织质地好、生长旺盛，再用MS 0．1mg／L2，4-D 2．0mg／L 6-BA 3．0mg／L AgNO3作愈伤组织分化培养基出苗效果最佳，愈伤组织分化频率达20．7％。     

夏威夷菠萝高效再生体系研究

采用菠萝试管苗的叶片、叶鞘、茎段和茎薄片作外植体,以MS或1/2 MS为基本培养基,应用正交试验设计方法研究了不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA和AgNO3对夏威夷菠萝不定芽的诱导效果,并在添加不同激素组合的培养基中进行芽的增殖和生根培养研究.结果表明,茎段为诱导不定芽的最佳外植体,6-BA是影响不定芽产生的最主要因素.其中MS 6-BA 5.0 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L AgNO3 2.0 mg/L为不定丛芽诱导的最佳培养基,诱导率为83.3%;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L为芽增殖的最佳培养基,可分化成绿色小苗;1/2 MS IBA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L为小苗生根的最佳培养基,生根粗壮,生根率达100%.     

玉米自交系幼胚再生体系建立的研究(英文)

以玉米自交系幼胚为外植体,研究了不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、BA浓度对苗分化和IBA对试管苗生根的影响。结果表明:2,4-D对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为N6+2,4-D2mg/L+水解酪蛋白(CH)500mg/L+脯氨酸(Pro)500mg/L+AgNO310mg/L;苗分化适宜的培养基是N6+BA0.5mg/L+水解酪蛋白500mg/L;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

苜蓿植株再生和农杆菌遗传转化条件的研究

[目的]建立苜蓿植株再生体系和农杆菌遗传转化体系。[方法]以"猎人河"苜蓿品种为受体材料,对影响苜蓿植株再生和遗传转化的相关因素进行了研究。[结果]最佳愈伤诱导培养基为改良SH+4.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA,最佳继代培养基为MSO+0.5mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L AgNO3,而最佳分化培养基为MS,苜蓿植株再生的最佳外植体是下胚轴。苜蓿农杆菌遗传转化的选择压确定为60 mg/L卡那霉素(Kan),最适宜的抗菌素为350 mg/L羧苄青霉素(Carb),农杆菌菌液的最适OD600为0.6,最佳侵染时间为10 min。[结论]该研究为今后苜蓿的基因工程研究奠定了基础。     

甘蓝型油菜下胚轴离体培养再生植株研究

[目的]为进一步通过基因转化获得预期优良性状的甘蓝型油菜提供借鉴。[方法]以甘蓝型油菜的下胚轴为外植体,研究不同苗龄、不同基因型、不同预培养条件以及各种生长调节剂组合对油菜外植体高频率再生的影响。[结果]试验中,7 d苗龄的甘蓝型油菜下胚轴再生频率可达35.83%;经3 d预培养处理的油菜下胚轴芽再生频率可提高至57.78%,油菜品种史力丰下胚轴的芽分化率较高,达35.00%,其次是N481-1,而N370-1的芽分化率最低;其最高分化率的激素组合为6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L,达38.89%。史力丰品种6~8 d无菌种子实生苗的下胚轴在预培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L上预培养3 d,在最适分化培养基MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.5 g/L中培养,再生频率最高。[结论]建立了甘蓝型油菜下胚轴离体培养高频率再生植株模式。