抗雌二醇单克隆抗体的制备与鉴定

活化雌二醇(E2)C3处的酚-OH,与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备得E2的完全抗原,利用完全抗原免疫动物,采用单克隆抗体技术,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生腹水等过程,最后获得了E2的单克隆抗体,对纯化的单克隆抗体的性质鉴定,结果显示:其抗体效价为1:106,抗体属于IgG2a型;分子量为179000Da;E2单克隆抗体的亲和常数K2.9108L/mol。     

抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的制备

【目的】制备抗Zhangfei蛋白的单克隆抗体,并鉴定其特性。【方法】用Zhangfei融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合,筛选出阳性克隆,应用有限稀释法筛选抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤株;采用腹水诱生法制备单抗腹水,用饱和硫酸铵法纯化腹水抗体;采用间接ELISA、单克隆抗体亚型检测试剂盒、免疫印记技术、曲线拟合方案等分别鉴定单抗效价、亚型、特异性和亲和力等特性。【结果】免疫小鼠的血清抗体效价达1∶5 000以上,细胞融合克隆率为98.96%,阳性克隆率为30.18%,筛选出2株抗Zhangfei蛋白的单克隆杂交瘤细胞,其培养上清效价均达到1∶800,腹水单抗效价分别为1∶105和1∶2×105,亲和常数分别为2.5×106和2.3×106。制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体的亚型均为IgG1类型。【结论】制备的抗Zhangfei蛋白单克隆抗体具有较高的效价和较强的亲和力,可用于进一步研究Zhangfei蛋白在机体中的生理作用。     

山羊抗猪脂肪细胞膜蛋白抗体的制备与ELISA鉴定

猪屠宰后,迅速采取其皮下脂肪在３７℃下的膜提取液中的匀浆,于３７℃温箱中孵育３０ｍｉｎ后,用差速离心法和高速离心法提取脂肪细胞膜蛋白,并作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析脂肪细胞膜蛋白与其它组织细胞膜蛋白 差异。从电泳图上看出,脂肪细胞有很多特异膜蛋白,也有一些与其它组织细胞膜蛋白相似的条带。膜蛋白与佐剂充分乳化后主动免疫３只山羊,免疫后７０ｄ取因清,用ＥＬＩＳＡ检测抗体效价为１：６４００。同样,用ＥＬＩＳＡ测定抗体与其它组织细胞膜的交叉反应,结果显示：抗猪脂肪细胞膜抗体与其它组织细胞膜有交叉反应,但反应性不高。     

牛种布氏杆菌单克隆抗体株的建立

作者选用布鲁氏菌地方株牛种Ⅲ型S_(85)A与SP2/0-Ag14细胞融合,获得7株产生单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经鉴定,这些单克隆抗体为IgG_(2b)和IgG_3亚类,其中S_(85)A-A_7株所产生的单克隆抗体效价达1∶25×10~4,它除与S_(85)A呈阳性反应外,与其他强毒株均无交叉反应。     

A型口蹄疫单克隆抗体的研究和实验应用

本试验通过8次细胞融合,获得9株杂交瘤细胞,其中2B_2,B_5,B_5D_9三株杂交瘤细胞分泌的抗体,具有较好的中和活力,所有单抗均属IgM类型,经过2年以上-196℃液氮保存,复苏后抗体滴度不减,仍在1: 5 120ELISA滴度以上.     

非鼠源性单克隆抗体技术及其在兽医学上的应用

单克隆抗体在生物学和医学领域显示了广阔的应用前景。非鼠源性单克隆抗体技术在兽医界更具有得天独厚的条件。本文仅对非鼠源性单克隆抗体的制备,淋巴细胞来源的选择,骨髓瘤融合配体的选择,免疫程序,体外免疫,腹水生产等问题进行简要的综述。     

磺胺间二甲氧嘧啶(SDM)单克隆抗体的制备及初步鉴定

用磺胺间二甲氧嘧啶人工免疫原(BSA-SDM)免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术筛选抗磺胺间二甲氧嘧啶单克隆抗体(SDMmAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SDMmAb,并鉴定其免疫学特性;鉴定结果表明,筛选出3株杂交瘤细胞,单克隆抗体的蛋白亚型为IgG1;分子量为178.1KDa,染色体数目为76～87条。与其他7种磺胺药(SD、SMM、SMZ、SQ、ST、PST、SMT、SPD)有很高的交叉反应性,可用于推广磺胺类药物多残留快速检测试剂盒的研制应用。     

抗牛H—Y抗原单克隆抗体的研制试验

Ｈ－Ｙ抗原是位于Ｙ染色体上的基因位点所编码的细胞膜抗原，能直接或间接地诱导原始性腺分化为睾丸，以牛睾丸组织匀浆作为抗原，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，用杂交瘤细胞技术制备的单克隆缺本６Ｆ，７Ｈ与部分牛精子呈阳性反应。     

单克隆抗体制备的关键因素

单克隆抗体在实验室和临床上有广泛的应用,它是基础免疫研究、诊断测试和疫苗质量控制方面必要的研究工具。本文主要阐述了单克隆抗体生产中的关键步骤,特别是抗原的准备、细胞和动物的考虑(选择)、佐剂及复合物的制备、注射方式、细胞融合和腹水收集方法,以期在单抗制备过程中减少动物的痛苦,获得最佳的免疫反应。     

SEB单克隆抗体的制备

[目的]获取能应用于快速检测致病微生物的蛋白质芯片点印用单克隆抗体。[方法]用金黄色葡萄球菌B型肠毒素（SEB）作为抗原免疫BALB/C小鼠,然后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/O融合,再进行选育、检测、鉴定等。[结果]成功获得了分泌SEB单克隆抗体的杂交瘤细胞。[结论]抗体特异性经酶联免疫吸附测定法检验,单克隆抗体细胞特异性强,能够用作蛋白质芯片点印的材料。     

猪脂肪细胞膜的检测及对小白鼠生长的影响

采用猪脂肪制备脂肪细胞膜抗原 ,免疫兔子制备抗血清 ,注射小白鼠 ,具有促进生长的作用。利用蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)可分离膜蛋白 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)可快速、简单地检测到抗体。     

广西水牛奶和荷斯坦牛奶中蛋白质和氨基酸的含量及组成分析

目的研究不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织CD36基因的表达差异。方法选取同一养殖小区中饲养条件相同的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳成分分析仪测定乳脂率;以乳脂率(7.5±0.5)%为基准,将德宏奶水牛分为高、中、低乳脂率组(分别为H、M、L组),每组选取胎次相同、年龄相近、处于泌乳中期的德宏奶水牛各3头,屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测CD36基因mRNA表达水平,并与乳脂率进行相关性分析。结果H组的CD36基因mRNA表达水平极显著高于M组和L组(P<0.01),M组极显著高于L组(P<0.01)。相关性分析表明：CD36基因表达量与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01)。结论CD36基因表达对德宏奶水牛乳质量可能具有促进作用。     

杜长大商品猪肌内脂肪含量的全基因组关联分析

【目的】通过全基因组关联分析,定位影响杜长大商品猪肌内脂肪含量的相关SNP位点及其重要候选基因,为利用分子生物学方法改良猪肌内脂肪含量提供科学依据。【方法】选取981头杜长大商品猪,包括阉割公猪447头、母猪534头,所有试验猪均在统一条件下饲养至150日龄后进行屠宰测定,屠宰后利用索氏浸提法对肌内脂肪含量进行测定。利用GeneSeek GGP 50K芯片进行基因分型,使用rMVP软件包的FarmCPU模型对肌内脂肪含量性状进行全基因组关联分析。【结果】杜长大商品猪平均肌内脂肪含量达2.27%,其变异系数为34.24%,基因组遗传力(h2)为0.39,属于中等遗传力性状,表明该性状具有较大的遗传改良空间。经质控后,剩余30600个SNPs位点用于全基因组关联分析,共发现有8个潜在SNPs位点与肌内脂肪含量相关,分别分布在2、3、5、11、12、13和14号染色体上。利用Gene Ontology数据库对可能影响肌内脂肪含量的候选基因进行GO功能注释分析,发现这些候选基因参与的代谢通路包括肌肉发育代谢过程、器官生长代谢、基因表达调控及RNA转录等生物学代谢过程,但主要以肌肉生长发育代谢通路为主,表明肌内脂肪含量与肌肉生长发育之间存在紧密联系。【结论】利用高密度芯片进行全基因组关联分析,发现有8个SNPs位点与肌内脂肪含量相关;根据基因生物学功能及相关研究文献,C2orf74、HS6ST3和ROBO2基因主要参与细胞增殖分化及脂肪代谢等生物学过程,可作为影响肌内脂肪含量的重要候选基因。     

甜菜碱对猪生长性能、体脂含量的影响及其机理探讨

甜菜碱是一种天然化合物，其无毒、无害、性质稳定，且在动物蛋白质和脂肪代谢中起着非常重要的作用。甜菜碱为脂肪代谢提供甲基，参与磷脂合成，促进肝脂迁移，抑制脂肪肝的形成；参与磷脂酰胆碱的合成，影响血液脂蛋白浓度；提高肌肉和肝脏中肉碱的含量，促进脂肪酸氧化，从而使动物肉产品的脂肪含量降低，瘦肉率提高，肉质较松，风味更好。甜菜碱可以替代用于甲基供体的蛋氨酸和胆碱，以保证蛋白质和神经递质的合成，提高猪的生长性能。     

ADD1基因PCR-SSCPs标记与猪肌内脂肪含量及背膘厚的关系

采用PCR SSCPs方法在苏太猪脂肪细胞定向分化因子 1(ADD1)基因第 347和 374位点发现单核苷酸多态性(SNP) ,分别为ADD1第 90和 99位氨基酸密码子的第 3位碱基 ,但这两个位点碱基的替换均没有引起氨基酸序列的变化。通过对 10 0头苏太猪肥育猪背最长肌中肌内脂肪含量的相关分析 ,发现杂合子AB肌内脂肪含量最高 ,极显著地高于AA纯合子 (P <0 0 1) ,BB纯合子肌内脂肪含量介于AB和AA之间 ,并有高于AA纯合子的趋势 (P =0 11)。各基因型间背膘厚没有显著差异。提示ADD1基因该位点上的PCR SSCPs可能作为选择肌内脂肪含量 ,而不影响背膘厚的一个辅助选择标记     

蛋白质和脂肪在肥育猪体内的分配沉积规律研究进展

蛋白质和脂肪在肥育猪体内的分配沉积方式与猪的生长性能、产肉性能和肉质性状密切相关.综述了蛋白质和脂肪在肥育猪体内分配沉积规律的研究进展,以期为通过定向调控营养素在肥育猪体内的分配沉积,协调好生长性能和肉质性状的矛盾提供参考.     

猪肉、脂肪品质的评定方法

通过多次猪肉脂品质的测定,我们在此基础上制定了该方法。就分析原理、取样、仪器设备、化学试剂和操做方法做了详细的说明。以保证肉的pH、肉色、组织结构(每平方毫米肌纤维的数量、肌纤维直径、肌大束间距和脂肪球的分布);肉的化学组成(初水分、干物质、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分)、熟肉率;脂肪的出油率、熔点和碘价等项指标的测定,获得更准确的结果。     

妊娠期背膘变化对繁殖性能的影响

母猪的繁殖性能是猪场主要生产指标,而母猪的背膘厚与繁殖性能存在较强的相关性。为研究母猪妊娠期不同阶段调控背膘厚对母猪的繁殖性能的影响,以温氏种猪公司新法系经产大白母猪为研究对象,测定妊娠期各阶段母猪背膘厚及繁殖性能。结果表明：妊娠前期和中期背膘厚调控范围为-2~3 mm母猪繁殖性能最佳;妊娠后期背膘厚调控范围为-2~0 mm母猪繁殖性能最佳。妊娠期母猪背膘厚保持在合适的范围,可以提高其繁殖性能,增加猪场效益。     

Change in the fatty acid composition and physicochemical properties of pig back fat depending on growth rate

It is established that the content of saturated fatty acids increases and that of monounsaturated decreases with increase of growth rate at the finishing stage. The content of polyunsaturated fatty acids is related to growth rate to a lesser degree. The content of water in fat and refractive index decrease with its increase in the first fattening stage. An insignificant increase in high meltability of fat with increase of growth rate in the finishing stage is noted.