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本文就胚胎玻璃化冷冻保存的原理、冷冻保护剂的作用和冷冻方法及近期国内牛胚胎玻璃化冷冻的研究进展情况进行了详细的综述. 相似文献
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自1985年胚胎玻璃化冷冻(v itrification)保存技术发明以来,玻璃化法先后在小鼠、兔、绵羊、牛、猪、山羊等动物胚胎上获得成功,近年来有关哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的研究主要集中在冷冻和解冻方法上,相继发明了一些新的玻璃化冷冻方法:冷环玻璃化法(cryo loop)和开放式细管法(open pu lled straw,OPS),并且对解冻后细管内直接脱除防冻剂进行了广泛深入的研究,使得冷冻胚胎移植更易于在生产上推广应用。现将胚胎玻璃化冷冻的原理、冷冻保护剂、冷冻方法、解冻后保护剂脱除方法的最新研究进展作一综述。 相似文献
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牛胚胎冷冻保存的研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
目前,牛的胚胎冷冻保存巳成为一种较成熟的常规技术,广泛应用于牛的繁殖科研与生产。本文回顾了牛胚冷冻保存技术的发展概况,对牛胚胎的常规冷冻技术、直接冷冻法及玻璃化冷冻技术的进展作了简要论述。 相似文献
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本综述阐明了胚胎玻璃化冷冻原理,比较了玻璃化冷冻技术各种方法及其优缺点,分析了胚胎玻璃化冷冻的影响因素,展望了玻璃化冷冻技术的应用前景。 相似文献
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胚胎玻璃化冷冻保存技术及其在牛和猪应用的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
1 前言胚胎冷冻保存是胚胎移植技术真正走向商业化应用的关键环节。自从英国学者Whit tingham等人在 1 972年首次报道利用慢速冷冻法保存小鼠胚胎获得成功以来 ,胚胎冷冻保存技术即受到人们的广泛关注 ,并投入了大量的人力和物力进行研究开发利用。随后 ,牛、兔、绵羊、大鼠、山羊、猪和人等的胚胎冷冻保存研究也相继获得成功。冷冻方法也在不断改进。1 977年 ,Willadsen发明了快速冷冻方法 ,将原先需要大半天的冷冻过程缩短在 2h以内 ;超快速冷冻技术的出现 ,又使冷冻过程缩短在 1h之内。 1 985年Rall玻璃化冷… 相似文献
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澳洲波尔山羊胚胎3种冷冻方法对其胚胎移植效果的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
在25℃室温下,采用细管法(一步法、二步法)和OPS法,以不同浓度的EFS、EDFS为玻璃化冷冻液,对澳洲波尔山羊致密桑椹胚和囊胚进行玻璃化冷冻保存。同时利用1.5mol/LEG为抗冻保护剂对胚胎进行常规法冷冻保存。分别将上述3种方法冷冻解冻后的胚胎移植于同期发情后6~7d的云南黑山羊受体。结果表明,细管法胚胎玻璃化冷冻保存效果均以EFS40组为佳,解冻后胚胎移植产羔率分别为40.54%(15/37;一步法)和51.35%(19/37;二步法)。与新鲜胚胎移植产羔率(52.50%,21/40)和常规法冷冻保存的胚胎移植产羔率(45.16%,14/31)相比无显著性差异(P>0.05)。另外,用EDFS30玻璃化溶液,OPS法冷冻解冻后的胚胎移植产羔率高达51.43%(18/35),为整个玻璃化冷冻试验的最佳值。玻璃化冷冻方法简便、迅速,无论是细管法还是OPS法均获得了比较理想的胚胎移植效果。 相似文献
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简单而有效的哺乳动物胚胎玻璃化冷冻方法 总被引:2,自引:0,他引:2
简单而有效的哺乳动物胚胎玻璃化冷冻方法王海彦朱士恩译1前言如果胚胎可以有效地进行冷冻保存,那么这项技术将可应用在多种哺乳动物如家畜、实验动物、野生动物以及人。然而,在胚胎冷冻和解冻过程中都存在好多会使胚胎受到损伤的因素。如:抗冻保护剂的毒性;冷冻损伤... 相似文献
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本研究采用不同来源的体外生产胚胎(屠宰场卵巢IVF胚胎,OPU-IVF胚胎,SCNT胚胎),系统研究了不同冷冻方法对水牛体外生产胚胎冷冻效果的影响,以完善水牛体外生产胚胎冷冻方法,进一步提高胚胎冷冻效果。试验选用6~7日龄囊胚分别用不同的冷冻液和不同冷冻方法进行胚胎冷冻。玻璃化冷冻液分别为40%EG、25%EG+25%DMSO和20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖;程序化冷冻液分别为10%甘油和0.05 mol/L海藻糖+1.8 mol/L EG+0.4%BSA。结果表明:(1)在玻璃化冷冻中,无论何种胚胎不同冷冻液的冷冻效果有明显的差异,但均以20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻液的冷冻效果最好,并且高于程序化冷冻的存活率;而对于程序化冷冻,用10%甘油作为冷冻液,屠宰场卵巢IVF胚胎的冷冻后存活率略高于用0.05 mol/L海藻糖+1.8 mol/L EG+0.4%BSA的冷冻后存活率,但差异不显著(P>0.05)。(2)VF胚胎利用程序化冷冻胚胎解冻后,在0~24 h内有76.5%胚胎复活,高于玻璃化冷冻的复苏率(48.9%)(P<0.05);而与此相反,在24~48 h内,玻璃化冷冻胚胎的复苏率(42.6%)则高于程序化冷冻(23.5%)(P<0.05)。综上所述,各种来源的水牛体外生产胚胎均可进行冷冻保存,应用玻璃化冷冻的效果好于程序化冷冻,且以20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻液进行玻璃化冷冻效果最好,但程序化冷冻后的胚胎复苏速度明显快于玻璃化冷冻的速度。 相似文献
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探讨程序化冷冻与玻璃化冷冻对小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎的复苏率及其发育潜能的影响。通过小鼠的卵母细胞与早期胚胎的不同冷冻方法的比较,为后续阿旺绵羊的胚胎冷冻保存提供参考。采用程序化冷冻与玻璃化冷冻技术,分别冷冻小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎,复苏后培养,比较不同冷冻处理后的复苏率、成熟率与囊胚率。小鼠GV期卵母细胞程序化冷冻复苏率(48.00%±5.29%)显著低于玻璃化冷冻复苏率(65.00%±5.00%),有统计学差异(P=0.0147<0.05);而程序化冷冻后复苏卵母细胞的发育成熟率略高于玻璃化冷冻组,但无统计学意义。小鼠二细胞期胚胎程序化冷冻组复苏率(76.00%±2.00%)显著高于玻璃化冷冻组复苏率(70.00%±2.00%),有统计学差异(P=0.0213<0.05);冷冻后复苏胚胎发育的囊胚率程序化冷冻略低于玻璃化冷冻及对照组,但无统计学意义。 相似文献
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牛胚胎玻璃化冷冻保存研究初报 总被引:11,自引:0,他引:11
传统的胚胎冷冻方法需诱发结晶,按一定速率降温,不仅程序复杂费时间(需几小时),而且还得使用价值昂贵的胚胎冷冻仪。为此,1985年Rall等人首先发明了玻璃化冷冻法[1],不使用冷冻仪,将冷冻时间缩短(约为30min)。但他们选用的是以大约7mol/L二甲基亚砜为主的抗冻剂,因其化学毒性大,对胚胎的存活带来一定影响[2,3]。1986年Scheffen等人,利用丙三醇及丙二醇为抗冻保护剂,因化学毒性仍较大,冷冻保存后的胚胎成活率仍不稳定[4]。针对化学毒性问题,1990年Kasai等人利用化学毒性… 相似文献
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猪胚胎冷冻保存研究现状 总被引:1,自引:0,他引:1
猪胚胎超低温冷冻对地方猪种的长期保存意义重大。长期以来,由于猪胚胎脂质含量较高等原因,进展一直较为缓慢(相对于牛、羊等动物)。近年来,由于玻璃化冷冻技术(特别是OPS玻璃化冷冻技术)的突破,使胚胎超低温冷冻保存成功率大幅度提高。本是法国国家农业科学院Francoise Berthelot教授对该领域的最新研究进展作的总结。 相似文献
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为了创立在用户庭院就能应用的玻璃化保存性别控制胚胎的冷冻剂稀释处理方法,采用细管内3种不同液体层构成(A、B、C)法,对新鲜分割胚一步法稀释后的存活能力进行了研究;其次用特定细管最小容量冷却法与上述3种不同液体层构成中效果较好的B法对玻璃化冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚进行一步法稀释后的存活能力予以对比。结果,3种不同液体层构成间胚胎的存活能力无显著差异,B法较高;应用特定细管最小容量冷却法在冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚一步法稀释后的存活能力均显著高于B法。结果表明,特定细管最小容量冷却法是更有效的保存方法。 相似文献
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1 玻璃化冷冻的基本原理 所谓的玻璃化冷冻就是在完全的玻璃化状态下冷冻保存细胞、组织或器官.为了在一定冷冻速度下形成玻璃化,需要使用高浓度的可渗透性低温保护剂. 玻璃化冷冻法是根据物理学原理,将高浓度的低温保护剂(约7 mol/L)在超低温环境下凝固,形成无规则的玻璃化固体,这种固态物质能保持液态时的正常分子与离子分布,因而在细胞内发生玻璃化起到保护作用.这种方法不仅大大简化了冷冻过程,而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤.此外,这种方法采用迅速通过临界温度区,从而减轻了一些动物胚胎冷冻中常见的冻伤现象. 相似文献