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本试验分析研究了:(1)猪卵子体外成熟所需要的培养时间;(2)促性腺激素和猪卵泡液对猪卵子体外成熟的作用;(3)不同体外受精次数对猪卵子体受精率的影响;(4)不同精子获能辅助剂对猪精子体外获能的作用;(5)不同种类猪精液的体外受精能力。研究结果表明,猪卵子体外成熟所需培养时间是32-36小时,在体外成熟培养液中加入0.25IU/ml PMSG(或FSH)和10%猪卵泡液可以促进猪卵子体外成熟,在精子体外获能培养液中加入0.05mg/ml肝素,在体外受精培养液中加入2mg/ml咖啡因可以促进猪精子体外获能并可提高体外受精率,体外成熟后的猪卵子进行2次受精可以获得较高的体外受精率,本试验用新鲜射出精子,冷冻射出精子,新附睾精子,冷冻附睾精子对体外成熟猪卵子进行体外受精,受精后卵裂率(2-4细胞期)分别是24.26%、23.40%,22.65%和24.24%。 相似文献
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猪卵泡卵母细胞体外成熟研究现状孟庆刚李光鹏曹允考(东北农业大学动物科学系150030)1引言随着哺乳动物胚胎工程技术的发展,人们对猪卵母细胞体外成熟的研究也取得了很大的进展。关于猪卵母细胞体外成熟的理论和培养技术也日渐成熟。相信随此项技术的发展,人们... 相似文献
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猪卵母细胞体外成熟作为一种很重要的胚胎生物技术,具有重要的理论和实际意义。本文综述了猪卵母细胞体外成熟培养的发展历程、体外培养影响因素以及优化策略,为猪卵母细胞成熟培养提供参考依据。 相似文献
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将收集的猪COCs置于添加不同浓度(0.0,0.3,0.6,1.2μmol/L)甘草酸单铵盐(monoammonium glycyrrhizinate, MAG)的卵母细胞体外成熟培养液中培养46 h,统计成熟率,通过免疫荧光染色检测成熟卵母细胞ROS表达水平;对成熟卵母细胞体外受精,于胚胎培养液内体外培养48,120 h,分别统计体外受精胚胎卵裂率、囊胚率,并用Hochest荧光染色检测囊胚总细胞数;结合成熟率及IVF胚胎发育囊胚率选定最佳添加浓度,在体外成熟培养液中添加最适浓度MAG,以0μmol/L MAG为对照组,体外培养46 h后,利用免疫荧光染色检测猪成熟卵母细胞的线粒体膜电位水平和细胞凋亡水平。结果显示,与对照组相比,不同浓度MAG处理组猪卵母细胞体外成熟率均有所提高,但差异均不显著(P>0.05);不同浓度MAG添加均可降低猪卵母细胞ROS水平,与对照组相比,0.3,0.6μmol/L组差异显著(P<0.05),1.2μmol/L组差异极显著(P<0.01)。0.3μmol/L添加组显著提高了猪体外受精囊胚率(P<0.05),但不同MAG添加组对... 相似文献
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裸卵的体外培养对于动物繁殖和人类辅助生殖具有重要的意义。实验研究成熟培养基中维生素C和维生素E的添加对猪裸卵(denuded oocytes,DOs)体外发育能力的影响。将维生素C以0、50、100、250、500μmol/L和750μmol/L的浓度,维生素E以0、10、20、50、100μmol/L和250μmol/L的浓度加入成熟液中,比较猪DOs的体外成熟率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率。结果表明:维生素C促进猪DOs的体外成熟和囊胚发育;维生素E对猪DOs的成熟率无影响,增加了囊胚率。综上所述,维生素C和维生素E可提高猪DOs的体外发育能力。 相似文献
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本研究就马尾藻属藻类多糖对猪卵母细胞的体外成熟及凋亡进行了探索:试验一证明,体外培养46h~48h时,成熟液添加马尾藻属藻类多糖能促进卵丘细胞扩展,添加20mg/ml马尾藻属藻类多糖能提高核成熟率(41.8%),与对照组29.3%的核成熟率相比,二者差异显著;试验二证明,添加马尾藻属藻类多糖可延长猪卵母细胞体外存活时问,体外培养第16d,在含有0、5mg/ml、20mg/ml马尾藻属藻类多糖培养液中的猪卵母细胞存活率分别为2.6%、18.9%、23.0%,添加与否差异显著。 相似文献
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维持细胞内钙离子(Ca2+)稳态对维护卵母细胞成熟及植入前胚胎正常发育至关重要。本实验旨在研究Ca2+水平变化对猪卵母细胞体外成熟发育的影响。收集的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分为3组,即对照组、100 nmol/L毒胡萝卜素(TG)组和100 nmol/L TG+300 nmol/L光溜海绵素C(XeC)组,体外培养,分别统计卵丘扩散情况、体外成熟率、胞内Ca2+水平,随后进行孤雌激活(PA)统计各组卵裂率、囊胚率及细胞总数。结果表明:添加XeC可显著改善由TG引起的猪卵丘细胞扩散不完全,卵母细胞体外成熟率、卵裂率和囊胚率降低,以及细胞数减少等现象,并显著降低由TG诱导的胞内Ca2+水平。综上,胞内Ca2+水平对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育具有重要的调控作用。 相似文献
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猪卵母细胞体外成熟培养为胚胎体外生产、体细胞克隆等研究领域提供了大量廉价实验材料。本文就影响猪卵母细胞体外成熟的因素及其研究进展作简要综述。 相似文献
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<正> 自从张明宽(1958)首次报道兔卵子体外受精获得成功,并产下仔兔以来,30多年中,有关哺乳动物的体外受精研究已取得进展。但猪的体外受精研究较晚,直到1986年,台湾郑登贵才首次报道“试管猪”。现在我国许多教学和科研单位也在从事此项课题的研究。本文拟从猪卵母细胞的体外成熟培养、精子的体外获能和体外受精等方面,简述其研究现状。一、猪卵母细胞的体外成熟培养 1.卵子的收集母猪在宰后半小时内摘取卵巢,放入加有抗菌素的生理盐水(35~37℃),2小时内带回实验室。用2.5ml注射器从卵巢中吸取直径为2~8mm卵泡 相似文献
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猪体外胚胎生产的各个技术环节发展较为成熟,但多偏向于研究,少有推广应用。随着我国家畜资源保护与利用的开展,猪体外胚胎保种势在必行。为向相关工作者提供一个完整高效的生产应用体系,综合分析了包括体外成熟、体外受精和体外培养等方面的技术要点,并总结有关猪体外胚胎生产各关键技术环节的发展与应用现状,以期为进一步保障我国猪产业经济的发展,提供理论参考。 相似文献