梅花鹿Myf5基因的cDNA克隆及表达分析

为获得梅花鹿生肌调节因子(Myf5)基因编码区序列(CDS),并探讨该基因在雌雄梅花鹿及其不同部位的肌组织间差异表达情况,以成年健康雌雄梅花鹿心肌、背最长肌、股四头肌、臀大肌、肋间肌组织为试验材料,以臀大肌组织cDNA为模板克隆获得Myf5基因CDS,运用生物信息学软件进行测序及分析,并利用实时荧光定量PCR技术检测Myf5基因在不同部位的肌组织间相对表达量。结果表明：克隆得到的梅花鹿Myf5基因CDS全长为768 bp;与GenBank上公布的家牛(Gene ID:281335)Myf5基因CDS的同源性为99.61%;梅花鹿与家牛的遗传距离最近,聚为同一支;梅花鹿Myf5蛋白氨基酸组成中丝氨酸含量最高,占氨基酸总量的13.3%;Myf5蛋白具有较强的亲水性,其蛋白二级结构包含α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和β-折叠;荧光定量结果分析表明,梅花鹿Myf5基因在雌、雄梅花鹿及其不同部位的肌组织间均有差异性表达。     

梅花鹿在南方的饲养技术研究

野生梅花鹿主要分布于东北的长白山、小兴安岭及四川、台湾等地;驯养的梅花鹿则分布于各地的动物园及驯养场.我国人工养殖梅花鹿历史悠久,由于鹿肉、鹿血、鹿茸等产品营养丰富,具有人体必需的38种营养成分,因此成了近年来兴起的特种养殖项目.为适应农业产业结构的调整和发展海宁市的观光农业,提供优质鹿产品,特进行了南方饲养梅花鹿的技术研究.     

梅花鹿BST-2真核表达质粒的构建和表达

为研究梅花鹿BST-2蛋白的生物学功能,使用特异性引物扩增梅花鹿BST-2基因,构建真核表达载体并表达,利用生物信息学软件对梅花鹿BST-2序列进行分子特性分析。结果表明,梅花鹿BST-2基因CDS区为480 bp,编码159个氨基酸,其氨基酸序列与人,马、牛、羊、猪等物种BST-2氨基酸序列同源性分别为37. 8%、30. 1%、67. 3%、74. 2%和53. 1%。梅花鹿BST-2蛋白含有两个跨膜结构,胞外段具有两个潜在的糖基化位点和三个潜在的二聚化位点。构建真核表达质粒,在其胞外段插入HA标签,转染293T细胞发现梅花鹿BST-2蛋白能在细胞中正确表达,并且可定位在细胞膜上。对其潜在的糖基化位点进行突变可见糖基化现象减弱。本研究为今后进一步研究梅花鹿BST-2蛋白的抗病毒机制奠定了基础。     

梅花鹿毛发基因组DNA提取效果的分析

为了研究以梅花鹿毛发作为试验样本进行遗传多样性分析的可行性,试验以梅花鹿为试验材料,分别取5,10,20根毛发,采集血液和提取组织DNA,以微卫星位点2AL2为引物进行PCR扩增,对产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明:毛发DNA与血液和组织DNA的数量和质量并无明显差异,10根毛囊DNA的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳均可观察到清晰条带,毛发DNA可作为梅花鹿遗传多样性分析的试验材料。     

梅花鹿感染产气荚膜梭菌的诊断及中西医结合治疗

2020年5月25日,贵州省某动物园的梅花鹿(Cervus nippon)出现精神沉郁、食欲减退、腹部胀大等症状,截至5月29日已发病死亡6头。为查明发病原因,采集发病梅花鹿的血样及发病死亡梅花鹿的组织样品送检。根据临床症状和病理剖检结果,初步诊断该动物园发病梅花鹿疑似产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)和支原体混合感染,经细菌分离培养、生化特性鉴定确诊为产气荚膜梭菌感染。结果显示,造成该动物园梅花鹿发病死亡的原因为产气荚膜梭菌的感染,并根据其症状进行中西医结合治疗。     

基于高通量测序的梅花鹿卵巢衰老的转录组分析

【目的】获取青年梅花鹿和老年梅花鹿卵巢组织的转录组信息,为深入研究梅花鹿卵巢衰老的潜在机制提供依据。【方法】以4岁龄青年梅花鹿和10岁龄老年梅花鹿卵巢作为试验样本,对样本进行石蜡切片、苏木精-伊红染色和卵泡计数;用Trizol法提取卵巢样本RNA构建转录组文库,应用Illumina HiSeq^TM2000测序平台测序,对测序结果进行差异表达基因、GO功能、KEGG通路和蛋白互作网络分析,并挑选部分差异表达基因进行实时荧光定量PCR验证。通过RIPA裂解液提取卵巢样本蛋白并对组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)蛋白在青年和老年梅花鹿中的表达情况进行Western blotting检测。【结果】组织学分析结果表明,老年梅花鹿的卵巢卵泡数显著低于青年梅花鹿(P<0.05),而闭锁卵泡数极显著高于青年梅花鹿(P<0.01)。转录组学分析结果表明,老年和青年梅花鹿卵巢间共有1 477个差异表达基因,其中表达上调基因503个,表达下调基因974个。GO功能和KEGG通路富集结果表明,免疫系统过程、转录、DNA损伤修复、炎症反应、凋亡等生物事件与卵巢衰老有关...     

梅花鹿结核分枝杆菌的分离与鉴定

目的探讨梅花鹿结核病的诊断方法,以及进行结核病的病原学的调查研究。方法利用病理学诊断方法、微生物分离方法以及分子生物学技术对患病梅花鹿进行疾病诊断。结果确定所分离的分枝杆菌是结核分枝杆菌,PCR法扩增出结核分枝杆菌特异的225bp片段,证实梅花鹿感染了结核分枝杆菌。结论结核病的诊断可以通过微生物分离诊断方法进行,分子生物学技术在结核病的诊断中的应用逐渐成为必不可少的诊断方法,它将有利于病原分离困难的小块病变组织的诊断。     

武胜县做大做强“中国蚕桑之乡”的对策与建议

为了加快蚕桑产业化的进程,做大做强“中国蚕桑之乡”,针对武胜蚕桑产业发展的现状与成效、蚕桑产业发展模式的经验、蚕桑产业发展的制约因素,提出了进一步完善政策做强产业、进一步完善机制降低风险、着力促进产业融合多元发展、继续加强宣传打造品牌的发展对策与建议,以促进武胜县蚕桑产业的可持续发展。     

梅花鹿α干扰素全基因的克隆与分子进化分析

根据GenBank中牛干扰素-α(IFN-α)基因序列(A00145),设计并合成了一对引物,以梅花鹿肝脏组织DNA为模板,采用PCR技术扩增梅花鹿IFN-α全基因,并克隆、测序。结果表明,梅花鹿IFN-α基因全长570bp,编码189个氨基酸,含有6个与二硫键形成有关的半胱氨酸;序列比较分析发现,梅花鹿IFN-α基因序列与GenBank发表的17种IFN-α基因核苷酸序列同源性为29.6%～93.7%,氨基酸序列同源性为18.4%～91.1%;梅花鹿与其他17种动物的IFN-α基因序列分析和系统进化树分析表明,IFN-α基因存在种属特异性,亲缘关系越近,同源性越高。梅花鹿INF-α基因的成功克隆,为进一步研究梅花鹿INF-α基因表达、生物学活性和应用奠定了基础。     

梅花鹿肝脏的形态及组织结构观察

梅花鹿是我国一级保护动物,具有极高的观赏和经济价值。用大体解剖与常规石蜡切片、HE染色等方法,对梅花鹿肝脏的形态及组织结构进行了观察。结果表明,梅花鹿的肝脏具有反刍动物的共同点,分叶不明显,但亦可分为右、中、左三叶,但无胆囊。其组织结构也和其他反刍动物相似,肝小叶间结缔组织不发达,分界不明显。被膜较薄,肝细胞体积较大,内皮连续、有基膜,内皮之间有枯否氏细胞,窦状隙中可见血细胞。门管区的小叶间静脉、小叶间动脉和小叶间胆管结构均清晰。     

小企业如何做强做大

为何有的小型企业徘徊不前?有的小型企业能够快速做强做大?本文对两个企业进行比较,解剖企业失败和成功的原因,找到差距,同时探讨小企业如何做强做大的道理。A公司成立于2003年,制造杀虫、杀菌制剂,2004年销售额为1500万元,2005年销售额为2500万元,之后销售额连年徘徊在3000万元,利润不断下降,库存指标却从2005年的440万元,增长到2008年的700多万元,考虑库存因素,企业其实在亏损。     

日月山梅花鹿公鹿血清生理指标研究

对日月山养鹿场围栏放牧的10头梅花鹿公鹿的7项血清生理指标进行了测定,并与祁连白唇鹿、祁连马鹿、祁连梅花鹿的某些生理指标进行比较。结果表明,日月山梅花鹿血清总蛋白显著低于祁连白唇鹿、祁连马鹿及祁连梅花鹿(P<0.01);日月山梅花鹿血清无机磷显著低于祁连白唇鹿(P<0.01),其他血清生理指标无显著差异(P>0.05)。     

1例梅花鹿异位生鹿茸样组织的结构分析

在湖北鄂州一梅花鹿养殖场中发现1头雄性梅花鹿的左眼下部长出一块疑似鹿茸角的组织，将该组织取下，分离消化培养细胞，并对细胞进行茜素红、阿利新蓝、番红固绿、TRAP染色鉴定。将取下的该组织各部位制成切片进行HE染色，在光镜下观察各部位组织的病理组织学变化。结果表明：该组织外形与鹿茸角相似，表面光滑，无分叉，内部组织分层界限明显，分层情况及特征与正常鹿茸顶端组织结构相似，但组织已经骨化，可能与取样较晚有关。     

梅花鹿饲养管理的技术研究

梅花鹿作为一种特种经济动物,其鹿血、鹿鞭、鹿茸、鹿肉等都具有极高的食用价值和药用价值,相关产品的发展前景较为广阔.养殖户为保证自身经济效益,应在梅花鹿饲养管理方面加强重视,全面提升梅花鹿产品的质量.为此,本文从饲养环境、分类饲养、适时配种和科学收茸等三个方面分析梅花鹿的饲养管理,希望能够提升梅花鹿的繁殖率和经济价值.     

鹿茸尖端组织核心蛋白多糖基因全长cDNA的克隆及其表达分析

为了进一步了解鹿源DCN基因的结构与功能,揭示该基因在鹿茸尖端不同组织层的表达规律,本研究从梅花鹿鹿茸尖端组织cDNA文库中首次克隆具有完整编码区的DCN基因全长cDNA序列,并结合生物信息学方法和实时荧光定量RT-PCR技术对该基因的氨基酸序列结构和表达特征进行分析.结果表明,梅花鹿DCN基因cDNA全长为1 831 bp,编码360个氨基酸;其编码蛋白具有N端信号肽,相对分子质量为39.9 ku,理论等电点为8.8,其一级结构中亮氨酸所占比例最高(12.5%);梅花鹿与绵羊DCN氨基酸序列的相似性最高(98%).实时荧光定量RT-PCR分析表明,DCN在间充质层的表达显著高于其他3层组织,提示DCN的抗纤维化活性可能是维持鹿茸间充质层快速生长的重要调节因素.     

全国梅花鹿养殖状况调查

中国野生动物保护协会于2005年6～12月,在全国31个省(区、市)开展了梅花鹿养殖情况调查.调查数据显示,截止到2004年底,全国31个省(区、市)共有9 465家养殖场,圈养繁殖梅花鹿452 355头.其中养殖梅花鹿数量最多的是吉林省,养殖场5 985家,目前存栏量278 000头.2004年全国生产梅花鹿鹿茸73 t,吉林省居全国首位,年产量约为21 t,占总数的28.8%.本文以调查数据为基础,提出我国梅花鹿养殖中存在的问题和改进建议.     

天山马鹿起源与分子进化的研究

马鹿(Cervus elaphus)属偶蹄目鹿科鹿亚科,又名红鹿、赤鹿、白臀鹿.马鹿由梅花鹿分化而来,与梅花鹿亲缘关系非常近,在自然条件下可与梅花鹿杂交延续后代.     

《建筑电气控制技术》课程“教学做”一体化教学实践

"教学做"一体化教学模式在经历的10年的建立、构建和发展,其核心内容仍然是围绕组织和形式展开。作者在《建筑电气控制技术》课程的教学改革中,经历了从教学方法、教学模式等多方面的探索和实践。本文针对"教学做"一体化教学模式在该课程实践应用、改进策略进行研究和探讨。     

阜阳做大做强生猪产业路径探析

猪粮安天下.习近平总书记多次强调,中国人要把饭碗端在自己手里,而且要装自己的粮食.多年来,生猪产品作为我国人民餐桌上的"主角",在内外发展环境变幻莫测、产业结构偏紧、产销矛盾突出的新形势下,如何提升生猪"适应力""免疫力""抵抗力",并牢牢端紧"猪肉盘子",是亟待解决的问题.笔者以解剖麻雀的方法,剖析安徽省阜阳市生猪产...     

中国家养梅花鹿种质资源特性及其保存与利用的途径分析

作者以"种质资源"为中心,论述了中国家养梅花鹿的遗传背景,分析比较了以东北梅花鹿为基础人工育成品种(品系)的特征及生产性能,并对家养梅花鹿与马鹿种间杂交的生物学基础、杂交后代的遗传性状和生产性能进行了分析。针对目前中国家养梅花鹿资源现状,提出了中国家养梅花鹿的种质资源保存与合理利用的途径。