北京地区荷斯坦牛脊椎畸形综合征的调查研究

脊椎畸形综合征（Complex Vertebral Malformation,CVM）是由常染色体上SLC35A3基因单碱基突变（G→T）引起的隐性遗传疾病,该基因隐性纯合（CV/CV）时奶牛致死,但CVM携带者表现正常,所以CVM携带者公牛可以通过人工授精技术传播CVM缺陷基因。本研究利用PCR-SSCP方法对北京地区242头公牛样品和403头母牛样品进行了检测分析,研究结果表明,在所检测的样本中,荷斯坦种公牛和母牛CVM携带率分别为8.82%和5.71%,CVM基因频率分别为4.41%和2.85%。通过系谱追踪发现,CVM遗传缺陷的共同祖先是美国名牛＂Penstate Ivanhoe Star＂（USA.1441440,CV）。通过剔除CVM携带者公牛可以有效地控制CVM遗传缺陷的传播,但是,我国许多CVM携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以有效地监控CVM携带者在奶牛群中的状况对CVM防控计划是有益的。     

荷斯坦牛脊椎畸形综合征分子诊断方法的建立与应用

脊椎畸形综合征(Complex Vertebral Malformation,CVM)是由常染色体上SLC35A3基因单碱基突变(G→T)引起的隐性遗传疾病,该基因隐性纯合(CV/CV)时奶牛致死,但CVM携带者表现正常,所以CVM携带者公牛可以通过人工授精技术传播CVM缺陷基因。本研究自行设计检测CVM特异性PCR引物,扩增长度为173bp,然后利用PCR-SSCP方法对186个公牛样品和140个母牛样品进行了检测分析,该方法简便快捷、准确率高,使用样品宽泛,适合大样本筛选。研究结果表明,在所检测的样本中,荷斯坦种公牛和母牛CVM携带率分别为11.3%和12.1%,并通过系谱追踪发现,CVM遗传缺陷的共同祖先是美国名牛"Penstate Ivanhoe Star"(USA.1441440,CV)。通过剔除CVM携带者公牛可以有效地控制CVM遗传缺陷,但是,我国许多CVM携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以,有效地监控CVM携带者在奶牛群中的状况对CVM防控计划是有益的。     

荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征焦磷酸测序检测方法建立与应用

为建立一种快速高通量的荷斯坦奶牛脊柱畸形综合征（complex vertebral malformation,CVM）的分子检测方法,根据CVM是由于SLC35A3基因第4外显子559位处发生G→T突变的遗传学基础,利用Assay Design SW软件设计了1对PCR引物和1条测序引物对三种不同基因型的基因材料进行测序分析,建立焦磷酸测序检测方法。对55份进境荷斯坦奶牛血样进行检测,发现有1例为隐性基因携带者,将PCR产物进行测序,其DNA序列与焦磷酸测序检测结果一致。研究表明该方法是一种有效的新方法,可用于荷斯坦奶牛脊椎畸形综合征的检测。     

加拿大荷斯坦牛与中国荷斯坦牛生产性能对比

黑龙江省八五二农场１９９０年底从加拿大引进１１０头荷斯坦育成母牛,平均１２月龄,现已全部投产。为了解加拿大荷斯坦牛在中国北方地区的适应性及其生长发育情况和生产性能,与当地中国荷斯坦母牛进行了对比饲养试验。１材料和方法１．１供试牛选择：试验组为加拿大荷...     

中国荷斯坦牛白细胞粘附缺陷病遗传分析

荷斯坦牛白细胞粘附缺陷病（BLAD）是一种遗传性免疫缺陷病，患病牛出生后，生长发育差，绝大多数在1年内死亡，且不具繁殖和哺育能力。该病的遗传基础为CD18基因编码区383位的A／G点突变导致白细胞表面的β2整合素表达缺陷。目前欧美等奶牛业发达国家都已经建立了完善的BLAD分子检测方法和跟踪监控体系。中国长期从国外进口荷斯坦公牛精液、胚胎或活体，由此可能引进了BLAD基因。本研究采用PCR—RFLP方法对116头可疑中国荷斯坦牛进行了检测．确定了2头BLAD携带者公牛和8头携带者母牛．未发现隐性纯合个体．     

河北地区中国荷斯坦牛的品系繁育

河北地区中国荷斯坦牛的品系繁育￥河北省石家庄市牛奶管理站＠冯文中河北地区中国荷斯坦牛的品系繁育○河北省石家庄市牛奶管理站（０５００４１）冯文中品系繁育是促进畜种不断提高和发展的一项重要措施。我省荷斯坦牛的整体质量还不高,要改变这种状况,在一些大型、示范奶牛...     

特别报道——一种新的荷斯坦牛遗传缺陷：短脊椎综合征（Brachyspina）

近期国际互联网广泛报道了一种新的荷斯坦牛遗传缺陷——短脊椎综合征。2006年7月丹麦科学家报道了第一例畸形犊牛的尸检结果．因父母有血缘关系怀疑有遗传原因。2007年5月8日丹麦和荷兰科学家发表了另外三例的详细尸检结果．并结合第一例进行了全面分析。追踪出四例畸形犊牛与犊牛脊椎畸形综合征（CVM）不同的共同祖先，指出这可能是荷斯坦牛正在出现的一种常染色体隐性遗传疾病。     

中国荷斯坦牛泌乳曲线拟合研究

为了解南方大型奶牛场中国荷斯坦牛泌乳曲线及其影响因素,利用5种泌乳曲线模型(Wood模型、Nelder 逆多项式模型、WIL模型、混合对数模型和Ali-Schaeffer模型)和4种时间间隔方式(天、周、旬和泌乳月),对海丰奶牛场2009-2010年度980头第1～5胎具有完整泌乳期的中国荷斯坦牛296 895次日产奶量记录进行泌乳曲线拟合,并进一步分析不同模型、时间间隔和胎次3个因素对泌乳曲线拟合度及其参数的影响.结果表明,5种模型泌乳曲线拟合度变化范围为0.839 7～0.954 1,不同模型和胎次极显著影响泌乳曲线拟合度(P＜0.01),时间间隔对泌乳曲线拟合度无显著影响(P＞0.05).Ali-Schaeffer模型拟合度最高,Nelder逆多项式模型拟合度最低;不论哪种泌乳曲线模型,第一胎拟合度均显著高于第三胎.不同模型、时间间隔和胎次均极显著影响参数a值(P＜0.01),模型极显著影响参数b值(P＜0.01),时间间隔显著影响参数b值(P＜0.05).模型和胎次均极显著影响高峰产奶量和产奶高峰日(P＜0.01).综合各方面情况,确定Ali-Schaeffer模型为适合于海丰奶牛场奶牛的最佳泌乳曲线模型.     

应用Ea玫瑰花环抑制试验检测奶牛血清EPF活性

应用人淋巴细胞玫瑰花环抑制试验，对河南省奶牛育种中心20头奶牛进行了EPF活性检测。结果表明，18～30月龄初配妊娠母牛血清RIT值为12．84±0．59（n=6），31月龄～5岁经产妊娠母牛RIT值为13．01±0．36（n=8），两者差异显著（P〈O．05）：母牛在妊娠6～28d的RIT值为12．58±0．26（n=6），妊娠1～2个月的RIT值为13．13±0．34（n=6），妊娠3～4个月．RIT值为13．60（n=2），三者相互之间均差异显著（P〈0．05）。妊娠与空怀奶牛的RIT值分别为12．96±0．46（n=14）和8．48±0．29（n=6），两者差异极显著（P〈0．01）。经产牛血清EPF活性高于初配妊娠母牛；在6～28d、1～2个月、3～4个月3个妊娠期，母牛血清中EPF活性增加；未妊娠奶牛血清中不存在EPF活性，妊娠母牛的RIT〉12。说明应用人淋巴细胞玫瑰花环抑制试验进行奶牛的早期或超早期妊娠诊断是一种有效可行的方法。     

玫瑰花环抑制实验检测肉牛早孕因子(EPF)活性

[目的]为了根据早孕因子活性的检测作为依据来判断肉牛妊娠状态.[方法]本实验采集不同孕期的肉牛的血样,同时进行了妊娠诊断,通过玫瑰花环抑制实验检测活性.[结果]实验表明,未怀孕牛和怀孕牛花环抑制滴度差异显著(P<0.05),不同孕期的早孕因子活性差异不显著.[结论]玫瑰花环抑制滴度高于8可以确认牛怀孕,低于4为未怀孕.     

妊娠相关糖蛋白(PAG)在奶牛早期妊娠诊断上的应用现状

妊娠相关糖蛋白(pregnancy associated glycoproteins,PAG)是反刍动物妊娠后外周血液出现的特异性蛋白,在妊娠过程中发挥着重要的作用。目前,在生产上通过检测PAG在血清中浓度能够进行奶牛的妊娠诊断。作者综述了PAG的发现、分离纯化及其在奶牛体内的代谢水平和近年奶牛早期妊娠诊断上的应用情况。     

奶牛早孕诊断技术研究进展

高繁殖率是提高奶牛场经济效益的重要保障,而早孕诊断又是提高奶牛繁殖率的重要手段之一。传统的妊娠诊断方法较难在配种后21 d内确定奶牛妊娠状态,而近年研发的新型妊娠诊断技术可以对奶牛进行有效早孕诊断。本文综述了多普勒彩超技术,中红外线光谱技术及妊娠相关蛋白、循环核苷酸、干扰素τ诱导基因检测等技术在奶牛早孕诊断中的研究进展,比较分析了这些技术的实际应用效果及优缺点,并对新的奶牛早孕诊断技术进行了展望,以期为开发和应用新型高效奶牛早孕诊断技术提供思路和借鉴。     

奶牛早期妊娠诊断技术研究

该文应用直检和B超对奶牛配后16~21 d进行卵巢检测,根据可参配母牛发情时的卵泡和配后黄体发育的状态与质量,对是否妊娠做出综合判断,进而减少和缩短母牛空怀期,提高奶牛生产效益。     

早孕因子的研究进展及应用前景

早孕因子(EPF)是一种免疫抑制性的调节因子,目前普遍认为它是热激蛋白家族成员伴侣蛋白10 的同系物,是最早确认妊娠的生化标志之一,可用花环抑制试验做生物学鉴定。EPF的可用于预测早期胚胎发育情况,帮助了解妊娠母体对胚胎的识别,免疫耐受等机制。早孕因子的发现及研究在生殖生物学领域中具有非常重要的意义。     

奶牛布鲁氏菌病的检测报告

本文通过对全县310头奶牛进行布鲁氏菌病的血清学的检测，及时发现了疫情，探讨了疫情的扩散。说明了实验室检测的必要性和重要性。     

奶牛早孕因子重组蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体.本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对重组蛋白及抗体进行检测.结果显示,成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,重组蛋白分子质量约37 ku,表达量约占菌体总蛋白的48.6%,纯化后目的蛋白纯度可达93%,重组蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1:12 800.结果表明,本研究成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,为研究奶牛早孕诊断奠定基础.     

应用EPF抗血清进行奶牛超早期妊娠诊断的研究

为了建立一种快速、高效的奶牛早期和超早期妊娠诊断的方法,采用多肽合成仪合成了早孕因子(EPF)的部分肽段(MC29),将MC29与载体蛋白BSA连接后免疫Balb/C小鼠,制备EPF抗血清,用EPF抗血清阻断ELISA对6头奶牛进行超早期妊娠诊断。结果表明:妊娠10～21d的4头奶牛血清检测均为阴性,2头未妊娠奶牛血清均为阴性,该结果与输精2个月后的直肠检查和B超鉴定的结果相一致。说明应用EPF抗血清进行阻断ELISA可以准确的进行奶牛超早期妊娠诊断。     

Early Detection of Pregnancy and Embryonic Loss in Dairy Cattle by ELISA Tests

Over a 25-month period 8118 blood samples were assayed for the presence of the serum pregnancy specific-protein B (PSPB) and progesterone (P4) concentrations on three Hungarian large-scale dairy farms. Pregnancy (n = 4085) was checked by BioPRYN assay at 30-36 days post-insemination (PI). Samples from all cows that tested not pregnant and from cows with an optical density (OD) reading in the BioPRYN test that was between 0% and 30% above the cutoff OD value were tested for serum P4 concentration. According to serum P4 concentration, cows were assigned to three categories: high (>4 ng/ml), medium (2-4 ng/ml) and low (<2 ng/ml) serum progesterone. The authors predicted a presumed (low) or possible (medium) late embryonic loss (LEL) or maintenance of the pregnancy (high). A total of 710 LELs were detected (17.4%) and 31.8% of them were predicted because of a low OD value at 30-36 days after insemination. Lower PSPB serum level significantly refers for LEL (p < 0.0001). The prediction rate for the true embryonic loss was 31.8% when OD cutoff from 0% to + 30% of cutoff was examined while it was 62.5% when the threshold was OD cutoff of 0% to 10% of cutoff. The authors conclude that BioPRYN was useful for prediction of a part of LEL in dairy cows and serum P4 concentration in these cows related to the rate of LEL.