麦角甾苷及松果菊苷对体外培养大鼠成骨细胞BMP2基因表达的影响

为了观察麦角甾苷和松果菊苷对体外培养大鼠成骨细胞BMP2基因表达的影响.本试验采用酶消化法分离得到大鼠颅骨成骨细胞,在第3代成骨细胞中分别加入含有不同浓度麦角甾苷和松果菊苷的培养液进行培养,在培养的不同时间收集细胞、提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法观察对成骨细胞BMP2基因表达的影响.结果表明,麦角甾苷和松...     

泰拉霉素分离纯化工艺研究

对泰拉霉素粗品的萃取、树脂吸附方法进行分析,通过对萃取剂、萃取pH、相比、萃取次数、树脂类型、树脂吸附温度工艺等进行比较.确定了泰拉霉素的分离纯化工艺为:用乙酸丁酯作为萃取剂,萃取pH值为8.5~9.0,乙酸丁酯与泰拉霉素溶液萃取体积比1:2,进行2次萃取,选择DM-301大孔吸附树脂在30~35℃、pH7~8、用甲醇与水7:3的比例作为洗脱剂、流速40ml/min进行解析.对确定的泰拉霉素分离纯化工艺经过生产验证,产品含量达到96%以上.     

杏鲍菇中多糖提取分离纯化工艺条件研究

试验以苯酚-浓硫酸法测定多糖,微波辅助浸提和乙醇沉淀法对杏鲍菇子实体粗多糖进行提取和分离纯化实验研究。结果表明,杏鲍菇子实体多糖提取的较优工艺条件为提取温度75℃、提取时间12min、料水比1∶35、微波功率400W、提取2次,在此较优条件下杏鲍菇粗多糖的得率达7.348%;纯化工艺条件为用40%氯仿、10%正丁醇、2%甲醇、40%乙醇、0.01%NaCl脱蛋白制精多糖。     

松果菊苷对大鼠成骨细胞胃桥素基因和蛋白质的影响

为了探讨松果菊苷对体外培养大鼠成骨细胞骨桥素(OPN)mRNA和蛋白质表达的影响,选取出生24 h内的SD大鼠颅盖骨,依次用胰酶和胶原酶消化分离培养成骨细胞,用不同浓度的松果菊苷作用于第3代细胞,选取雌二醇为阳性对照,分别在药物作用24、48和72 h后提取细胞总RNA的表达量,用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测细胞中OPN mRNA的表达量;用Western blotting检测细胞中OPN蛋白的表达量。结果显示,各浓度松果菊苷在各个时间段均增加OPN基因的表达,尤其是5×10^-5和5×10^-6 mg/mL松果菊苷在各时间段均具有显著或极显著地促进作用(P＜0.05或P＜0.01);各浓度组在作用48 h时蛋白质的表达量均高于对照组。结果表明,松果菊苷对成骨细胞OPN基因表达有显著的促进作用,同时对OPN蛋白的分泌有促进的趋势。     

锁阳多糖的提取工艺及分离纯化

目的:快捷分析锁阳多糖含量,优化锁阳多糖提取工艺。方法:通过L9(34)正交实验确定锁阳多糖的最佳提取工艺。结果显示,在液料比为1:8,浸提时间为2h,提取温度70℃,提取次数为2次时锁阳多糖含量最高;研究7种不同型号大孔树脂的吸附率及解吸率,确定分离纯化锁阳多糖的树脂类型,结果型号为HPD-450的树脂富集多糖效果最好,其吸附和解吸性能均较好,对锁阳多糖的动态吸附率为56%,动态解吸率为99%。结论:本项研究所建立的实验方法可快捷有效的完成锁阳药材中的多糖提取及分离纯化。     

柑橘渣中柚皮苷的提取纯化工艺

研究柑橘渣中柚皮苷的提取纯化工艺,为增加柚皮苷产量提供参考方法,以期大量应用于饲料生产中。采用乙醇提取和超声波辅助提取柑橘渣中的柚皮苷,通过单因素试验和正交试验得到两种方法的最优工艺参数。通过吸附试验,获取最适宜纯化柚皮苷的大孔树脂及最优工艺参数。乙醇提取法的最优工艺参数为:提取时间3.5 h、料液比145 g/ml、乙醇体积分数65%、提取温度80℃,在此条件下,柚皮苷提取率为15.09 mg/g。超声波辅助提取法的最优工艺参数为:乙醇体积分数70%、料液比160 g/ml、提取时间90 min、提取温度80℃、超声波频率500 W,在此条件下,柚皮苷提取率为24.15 mg/g。HPD600具有良好的吸附和解吸效果,HPD600的最优工艺条件为:吸附时间4.0 h、样品pH值4、上样流速2 BV/h、洗脱液浓度0.05 mol/l、解吸流速2 BV/h。乙醇提取和超声波辅助提取成本低,无毒害,易操作,适用于工业生产。HPD600是最适合用于柚皮苷分离纯化的大孔树脂。乙醇或超声波辅助提取,结合大孔树脂纯化工艺,可以提高柑橘渣中柚皮苷的提取效率。     

板栗花粉总黄酮的分离纯化工艺研究

AB-8大孔吸附树脂柱层析分离纯化板栗花粉总黄酮,理想的分离纯化工艺参数为：有效柱体积20mL,黄酮液上样量6mL,水洗液10BV,洗脱液乙醇浓度为75%,洗脱速度1mL/min,洗脱液用量为树脂床6BV时,黄酮物质基本被洗脱下来,HPLC表征板栗花粉黄酮得到分离纯化。     

绿豆芽中SOD的分离纯化研究

采用硫酸铵盐析,透析,抽真空,DEAE-纤维素A-52柱层析,从绿豆芽中提纯了超氧化物歧化酶,酶的纯 化程度达到每毫克蛋白2 855U,总酶活回收率为38.4％,纯化倍数为27.5。     

绿豆芽中SOD的分离纯化研究

采用硫酸铵盐析,透析,抽真空,DEAE-纤维素A-52柱层析,从绿豆芽中提纯了超氧化物歧化酶,酶的纯化程度达到每毫克蛋白2 855U,总酶活回收率为38.4%,纯化倍数为27.5.     

大孔吸附树脂分离纯化山丹鳞茎中皂苷的工艺研究

为了研究大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷静态吸附和解吸性能,筛选出纯化效果较好的树脂,试验采用静态吸附筛选树脂和动态吸附确定工艺参数的方法来研究大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷的分离纯化工艺。结果表明:D101大孔吸附树脂对山丹鳞茎中皂苷的纯化效果较好,在上样原液浓度为6 mg/m L、pH值为8的条件下进行吸附,解吸条件为乙醇浓度70%、洗脱流速0.5 BV/h。在此条件下对山丹鳞茎中皂苷进行纯化,皂苷纯度提高了4.35倍。说明D101大孔吸附树脂对山丹鳞茎皂苷有较好的富集、纯化效果。     

紫花松果菊提取物对肉仔鸡血清中抗氧化性能指标的影响

本试验选用180只健康1日龄艾维茵肉仔鸡（公母混养）,采用单因子随机设计,将180只试验雏鸡随机分成6组,每组设3个重复,每个重复10只鸡。紫花松果菊提取物的添加浓度分别为0、5、10、50、100、500 mg/kg,研究添加不同水平的松果菊提取物对肉仔鸡生长性能、抗氧化性能的影响。试验结果表明,在玉米 豆粕型肉仔鸡日粮中添加紫花松果菊提取物,添加量为50 mg/kg时,明显提高了生长前期肉仔鸡血清中SOD、GSH Px的活性,同时降低了血清MDA的含量（P＞0.05）;而添加紫花松果菊提取物对生长性能有一定的改善作用,但效果不显著。     

蜂蜡中二十八烷醇的分离纯化技术研究

以蜂蜡为原料分离纯化二十八烷醇,研究萃取剂及其用量、萃取温度、萃取时间以及萃取时所加蒸馏水为萃取影响因素,正交试验及其方差分析结果确定最优萃取条件为:萃取剂120#汽油,萃取时间50min,萃取温度70℃,萃取剂用量150mL,蒸馏水用量75mL,可得42.89%的粗醇制品,其中二十八烷醇的含量为15.35%。三氯甲烷/正己烷(3∶1),固液比1∶15,重结晶温度20℃,结晶6次时,可以制得最高纯度为57.28%的二十八烷醇。     

松果菊的生物学特性及其在畜牧业中的应用

松果菊别名紫松果菊,又名紫锥菊,因头状花序似松果而得名。为菊科松果菊属,多年生草本植物,株高60~150 cm,全株具粗毛,茎直立;基生叶卵形或三角形,茎生叶卵状披针形,叶柄基部稍抱茎;头状花序单生于枝顶,或数多聚生,花径达10 cm,舌状花紫红色,管状花橙黄色。花期6~7月。原产北美     

天然牛磺酸提取及分离纯化研究

牛磺酸作为营养强化剂已在食品中,尤其是婴幼儿食品、保健品中得到广泛的应用.综述了天然牛磺酸提取及分离纯化方法研究的最新进展,以期为牛磺酸的深入研究提供参考.     

初乳中乳铁蛋白的分离纯化及鉴定

乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)是一种具有许多独特生理功能的铁结合糖蛋白,主要存在于哺乳动物的各种外分泌物中,如乳汁、眼泪等,乳汁尤其是初乳中Lf的含量很高。因此,从来源丰富的牛初乳中提取Lf,把它作为功能性成分应用于食品和畜牧生产中,具有广阔的前景。本试验通过等电沉淀、盐析和层析分离等方法从牛初乳中分离Lf,并用SDS-PAGE、Western Blot检测和鉴定,结果我们得到了80 ku的乳铁蛋白,其纯度90%,符合工业化生产要求。本试验建立的方法简便、经济、安全,可用于乳铁蛋白的工业化生产。     

重组Troponin I分离纯化工艺的建立

美国波士顿儿童医院科学家在研究抗癌新方法及寻找新血管生长抑制剂的过程中,从无血管且具有抗癌作用的软骨提取物巾分离纯化到Troponin I,并证明Troponin I能够抑制血管内皮细胞生长和血管形成,阻断新血管生长及抑制实体瘤的生长与转移,其生物活性比目前已进入临床试验的所有的同类血管形成抑制剂包括endostatin和angiostatin要强10～100倍,是一种极具研究和开发价值的新型抗肿瘤药物.我们在构建重组表达质粒pET22b( )-Tn I的基础上,拟建立了Troponin I的纯化工艺方案,这为明确它的临床药理学性质及开发出其临床药用价值奠定了基础.     

重组TroponinⅠ分离纯化工艺的建立

美国波士顿儿童医院科学家在研究抗癌新方法及寻找新血管生长抑制剂的过程中,从无血管且具有抗癌作用的软骨提取物中分离纯化到TroponinⅠ,并证明TroponinⅠ能够抑制血管内皮细胞生长和血管形成,阻断新血管生长及抑制实体瘤的生长与转移,其生物活性比目前已进入临床试验的所有的同类血管形成抑制剂包括endostatin和angiostatin要强10～100倍,是一种极具研究和开发价值的新型抗肿瘤药物。我们在构建重组表达质粒pET22b（＋）-TnⅠ的基础上,拟建立了TroponinⅠ的纯化工艺方案,这为明确它的临床药理学性质及开发出其临床药用价值奠定了基础。     

牛蒡苷元的提取及纯化

探索了一种从牛蒡子中提取、纯化牛蒡苷元的方法。将脱脂牛蒡子粗粉用含5%盐酸的50%乙醇溶液回流5 h,过滤后,药渣用50%乙醇溶液重复提取1 h,合并滤液后用5 mol/LNaOH溶液调节至中性,氯仿萃取2次,减压旋转蒸干后得牛蒡苷元粗品。粗品用硅胶柱层析纯化2次,获得类白色粉末,HPLC法进行分析。结果表明,牛蒡苷元样品保留时间与对照品保留时间一致,约为12.1 min,其相对百分含量为99.3%。牛蒡苷元总提取率为1.1%。该方法是一种有效的、简便的、能满足常规实验室设备要求的牛蒡苷元制备方法。     

光滑爪蟾皮肤抗菌肽的分离纯化及活性检测

通过高效液相色谱法,对光滑爪蟾皮肤分泌物进行分离纯化,得到具有抗菌活性的光滑爪蟾皮肤抗菌肽。通过最小抑菌浓度（MIC）试验、溶血活性试验及癌细胞抑制试验,对其体外生物活性进行研究。结果表明,经过纯化得到2个纯度高且具有活性的抗菌肽（AMP1和AMP2）,质谱鉴定结果得出其相对分子质量分别为1 082.78和2237.34。MIC结果表明,AMP1对S.aureus ATCC25923、Escherichia coli ATCC25922的MIC值分别为23.63、8.71mg/L,对MRSA无抑菌作用。AMP2对S.aureus ATCC25923,Escherichia coli ATCC25922、MRSA的MIC值分别为4.94、10.7、86.6mg/L。溶血试验显示AMP1,AMP2具有极弱溶血活性,且对癌细胞SW480具有抑制作用。     

蚕蛹虫草中虫草素的提取及纯化工艺研究

本实验主要对蚕蛹虫草中虫草素(3’—脱氧腺嘌呤核苷、学名3’—Deoxyadenosine)进行纯化及纯度鉴定。结果表明:经过对蚕蛹虫草子实体及菌丝的粉碎、石油醚脱脂、80℃水浴10小时、调节等电点沉淀、732-NH_4离子交换树脂的分离、浓缩、5℃下低温结晶,可得到一定纯度的虫草素晶体。