鸡新城疫病毒的分离与鉴定

从山东某鸡场的产蛋下降而无其他典型新城疫(Newcastle Disease)症状的高抗体蛋鸡群中分离到一株病毒。经过试验鉴定,该分离株具有血凝性,且可被ND标准阳性血清所抑制和中和,不能被AI(H5亚型与H9亚型)标准阳性血清抑制;该病毒的最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间(h)为50.4 h,1日龄SPF鸡脑内接种分离病毒致病指数(ICPI)为1.85,6周龄SPF鸡静脉接种致病指数(IVPI)为2.42,回归试验鸡出现了新城疫症状和病变,经外源病毒检测及回归试验该病毒株被确定为新城疫病毒,并属强毒型,命名为ShD-5-04。     

鸡新城疫病毒的分离与鉴定

从山东某鸡场的产蛋下降而无其他典型新城疫（Newcastle Disease）症状的高抗体蛋鸡群中分离到一株病毒。经过试验鉴定,该分离株具有血凝性,且可被ND标准阳性血清所抑制和中和,不能被AI（H5亚型与H9亚型）标准阳性血清抑制;该病毒的最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间（h）为50．4h,1日龄SPF鸡脑内接种分离病毒致病指数（ICPI）为1．85,6周龄SPF鸡静脉接种致病指数（IVPI）为2．42,回归试验鸡出现了新城疫症状和病变,经外源病毒检测及回归试验该病毒株被确定为新城疫病毒,并属强毒型,命名为ShD-5-04。     

鸡新城疫病毒的分离与鉴定

<正>鸡新城疫又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟等,是由新城疫病毒(NDV)引起的一种热性、急性、高度接触性、败血性传染病[1]。它传播速度相当快、死亡率非常高,是严重危害养禽业的最主要疾病之一,被国际兽医局称为A类传染病[2]。临床症状主要表现为:精神颓废、呼吸困难、食欲不振、将鸡倒拎时会有许多酸臭味液体从口中流出。病理变化主要表现为十二指肠和肠道粘膜有枣核状出血和坏死;腺胃与肌胃的交接处有大量出血带,腺胃乳头出     

鸡新城疫病毒的分离与鉴定

应用鸡胚接种技术从南宁市郊区一个疑似发生新城疫鸡群采集的样品中分离到一株病毒,经对分离毒株进行血凝试验、血凝抑制试验和RT-PCR鉴定,结果表明分离的毒株为新城疫病毒;对分离株进行毒力测定、致病性试验及对包含裂解位点的F基因部分片段的序列进行测定与遗传进化分析。结果表明,毒株对鸡胚平均致死时间为62.6 h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数为1.56,30日龄易感鸡攻毒后2 d开始出现明显的临床症状,攻毒后5 d内全部死亡,表明该分离株属新城疫强毒株,F基因裂解位点氨基酸基为112RRRKRF117,F基因遗传进化分析发现该毒株属于基因Ⅶ型,与同年从广西发病的白鹭分离的新城疫毒株亲缘关系较近。     

一株鸡新城疫病毒的分离鉴定及HN基因的序列分析

为了检测引发昆明地区某鸡场鸡群疑似新城疫(ND)的毒株基因型,试验将采集到的疑似ND病料接种至9日龄鸡胚尿囊腔,对鸡胚尿囊液进行血凝(HA)试验、血凝抑制(HI)试验和RT-PCR鉴定,对RT-PCR扩增产物进行克隆、测序,然后分析HN基因编码区序列同源性及绘制遗传进化树。结果表明:HA试验凝集价为1∶2~8,HI试验凝集价为1∶2~5,禽流感病毒(AIV)的HI试验均为阴性,初步鉴定分离株为新城疫病毒(NDV),将其命名为KM-16;RT-PCR扩增出的目的条带大小为1 759 bp;KM-16分离株与China-Guangxi14-2002和Japan-SG106-1999的HN基因的同源性为98.6%和98.7%,与经典毒株F48E9和La Sota C5的HN基因的同源性为84.7%和81.9%,与其他参考毒株的HN基因的同源性在95.2%～96.4%之间;KM-16毒株与China-Guangxi14-2002和Japan-SG106-1999等基因Ⅶ型毒株处于同一进化分支上。说明KM-16分离株为基因Ⅶ型NDV毒株。     

3株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及其基因分型

为确定牛呼吸道传染病的病原以及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在临床健康牛群中是否存在持续性感染,本研究采集了内蒙古自治区和黑龙江省两个牛场牛鼻拭子46份及肺脏样品8份,采用MDBK细胞进行病毒分离培养,经BVDV特异性引物RT-PCR检测有3份样品为阳性。利用间接免疫荧光检测3株阳性样品,可以观察到特异性荧光,表明分离得到3株BVDV,分别命名为480、A0583和Lung-6。进一步研究显示480、A0583和Lung-6均为非致细胞病变型。对3株分离病毒的5'端非编码区和Npro基因进化树分析显示3株病毒均属于BVDV1型,其中480株属于BVDV1c亚型,A0583株和Lung-6株同属于BVDV1m亚型。本研究首次在国内同一个牛场分离到BVDV1m(A0583)和BVDV1c(480)两个基因亚型。本研究为我国BVDV-1型不同基因亚型的抗原关系分析及BVDV疫苗的研制奠定了基础。     

几株鸡新城疫病毒的分离鉴定及其基因型分析

从几个发生禽病的地区分离到6株病毒,经过血凝试验、血凝抑制试验、中和试验、分子生物学试验等确定为鸡新城疫病毒;根据GenBank公布的新城疫F基因强弱毒株相关基因序列设计合成1对特异性引物,扩增出的F基因片段长度约为610 bp,测序后进行序列比对,并分析其核苷酸序列和氨基酸序列,结果显示,有3株具有新城疫强毒株特性,同时还具备新城疫Ⅶ基因型特征,另外根据平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)和静脉致病指数(IVPI)指标测定结果,最终判定这3株是新城疫强毒株且属于基因Ⅶ型,其余3株病毒分离株与La Sota的核酸序列同源性与氨基酸序列同源性均为99%。     

鸡新城疫病毒的分离与初步鉴定

近几年,乌鲁木齐周边地区常发生一种以呼吸困难和气管环严重出血为特点的鸡病,各日龄、多品种鸡均可发病,而且没有明显的季节性,治疗效果差,死淘率高,对养殖业危害巨大.为了探求该类疾病与新城疫的相关性,于2011年7～12月期间,以乌鲁木齐周边地区发病三黄鸡群为研究对象,采集有出血病变病死鸡气管环病料,常规研磨处理后,接种鸡胚并收集尿囊液,用血凝与血凝抑制试验检测是否有新城疫病毒,并用血凝阳性尿囊液接种5日龄三黄雏鸡检测是否具有致病性.     

鸡新城疫病毒的分离和鉴定

旨在为发病鸡场找到致病原,本研究利用SPF鸡胚从发病鸡组织中分离到1株病毒,病毒对1%鸡红细胞的血凝价为28,病毒的ELD50为107.83/0.1 m L,病毒可以被新城疫病毒阳性血清特异性中和,攻击该病毒的SPF鸡表现出典型的新城疫病毒感染症状,RT-PCR鉴定显示该病毒为新城疫病毒。     

北京地区犬瘟热病毒分离株H基因的分型

根据发表的犬瘟热病毒(CDV)参考毒株Onderstepoort的序列设计了一对引物,以感染犬瘟热病毒的犬的粪便总RNA为模板,RT-PCR扩增出17株CDV的H全基因1877bp的片段,将这个片段连接到pGEM-Teasy载体上,经酶切鉴定得到阳性克隆,将阳性质粒进行序列测定,并与国内外毒株进行同源性比较和系统发育分析,结果显示17株均为Asia-1型。北京地区流行的毒株主要是America-1型和Asia-1型,其中2007年主要流行America-1(疫苗型),而2008年主要是Asia-1型。     

海安地区鸡新城疫病毒的分离与鉴定

新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起的禽类急性高度接触性传染病,给养禽业造成重大经济损失.2011～2012年间,我们对20个来海安县兽医站就诊的疑似ND发病鸡群进行临床症状和病理变化观察,病鸡以呼吸困难、腹泻和头颈扭曲为主要症状.全身浆膜、粘膜出血,尤其是消化道和呼吸道最明显.腺胃乳头和肌胃角质层下出血,盲肠扁桃体肿大、出血、坏死,肠粘膜出血、纤维素性坏死,形成伪膜及溃疡.采集病料,接种9～ 10日龄的SPF鸡胚,分离到8株有血凝性的病毒.其中5株病毒能够凝集鸡的红细胞,并且血凝性可以被NDV阳性血清所抑制,最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间（MDT）在49 ～60.8 h之间,鉴定为NDV强毒株.     

1株鸡新城疫强毒株的分离与鉴定

1998年 1 0月 ,福州郊县某鸡场的新城疫免疫鸡群发生以呼吸困难、拉黄绿色稀粪、气管出血、盲肠扁桃体出血、头颈歪曲为特征的疫病 ,发病率和病死率分别为 85%和 46 %左右 ,疑为鸡新城疫 ,但用ND I系疫苗紧急接种未能控制疫情 ,故采集病料进行病毒分离和鉴定。结果报告如下。1　材料与方法1 .1　材料　 9～ 1 0日龄鸡胚、雏鸡均来自新城疫HI抗体阴性鸡 ;新城疫标准阳性血清、标准强毒F4 8E8株和弱毒 La Sota株 ,均购自中国兽医药品监察所。1 .2　病毒分离1 .2 .1　病料处理　取病鸡的肝、脾、肾和气管 ,剪碎研磨 ,以 Hank' s液制成 1∶ …     

鸵鸟鸡新城疫病毒的分离和鉴定

鸡新城疫(ND)是由NDV引起鸡、雉鸡、孔雀、鹌鹑等禽类发生的一种呼吸道传染病。新疆某县鸵鸟养殖场饲养鸵鸟400只，发生一起呼吸困难、张口呼吸、腹泻的疫病。笔者对该病进行诊断，现报道如下：     

鸡新城疫CS2株病毒的筛选鉴定

对新城疫病毒Ｉ系株（Ｍｕｋｔｅｓｗａｒ）按其在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上的蚀斑大小进行筛选，经４次克隆之后，选出了小蚀斑株ＣＳ２作为目的株，此株ＭＤＴ／ＭＬＤ，ＩＣＰＩ和ＩＶＰＩ分别为５２．４小时，０．６４和０．２３，而其母株Ｉ系的分别为４８小时，１．７和０．３２５。此株比Ｉ系更为安全。     

一株基因VII型新城疫病毒的分离与鉴定

应用一步法RT-PCR技术成功扩增了一株自然分离NDVF基因的重要功能区片段(约500bp)。最后测序结果表明:该分离株F0裂解位点氨基酸序列为NDV强毒株特征性序列(112-R-R-Q-K-R-F117),且具有NDV基因VII型的特征性氨基酸,即101位的K和121位的V。     

一株鸡新城疫强毒株的分离鉴定

鸡新城疫从1926年英国新城发病鸡群分离到病毒至今，仍然是危害鸡、鸽、某些珍禽和鸟类的主要传染病。近年来，鸡新城疫出现了一些新的特点，如症状不典型、病理变化不典型、容易继发感染其他疾病、免疫鸡群仍然发病、产蛋母鸡仅出现产蛋下降等，病死率为20％～50％。一般的抗体水平不能给鸡提供良好的保护。最近，扬州地区流行的新城疫出现了新的特点，用常规方法已不能控制这种疾病，经鉴定证实为一株新城疫病毒所致。     

鸡新城疫病毒C30株生物学特性鉴定

鸡新城疫(Newcastle Disease,ND)又名亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)感染引起的一种高度接触性致死性传染病。根据其临床表现和病程长短可分为最急性、急性和慢性三型。1986年黑龙江省生物制品一厂从国外     

鸡新城疫病毒的分离鉴定与交叉免疫保护试验

为了评价疫苗免疫保护效果,进而筛选出最佳的免疫方案,将分离到的鸡新城疫病毒(Newcas-tle disease virus,NDV)流行毒株制备成灭活疫苗进行交叉免疫保护试验研究。把采集到的疑似发生新城疫的病鸡肺、气管环等组织经处理后接种10日龄SPF鸡胚进行病毒的分离和增殖,并用血清学和分子生物学方法进行毒株的鉴定;用分离到的NDV/Chicken/TC/1/2011毒株制成油乳剂灭活苗,与La Sota疫苗以不同的疫苗组合免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果显示,共分离到9株新城疫病毒,其F蛋白裂解位点的氨基酸均为112 R-R-Q-K-R-F117,表现为强毒株的分子特征,与致病指数结果一致。分离株灭活苗组和分离株灭活苗+La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最高,其次是La Sota灭活苗+La Sota弱毒苗和LaSota灭活苗,La Sota弱毒苗对试验鸡的免疫保护力最低。NDV分离株与疫苗株La Sota存在明显抗原性差异,这将对新城疫疫苗的发展和疾病控制策略制定至关重要。     

传染性支气管炎病毒中国地方分离株RFLP基因分型的研究

为初步确定我国不同地区流行的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的基因分型，对分离自国内８个不同地域疫区的ＩＢＶＱＤ、ＧＺ、ＺＺ、ＴＪ、ＤＬ、ＹＣ、ＪＳ１和ＪＳ２及参考株Ｍ４１、Ｈ５２和Ｔ的Ｓ１基因ＲＴ－ＰＣＲ扩增ｃＤＮＡ进行ＨａｅⅢ的ＲＦＬＰ分析。结果，ＱＤ与ＭＤ４１、Ｈ５２同属Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｅ基因型，ＧＺ、ＺＺ、ＹＣ与Ｔ的基因型相同，ＤＬ、ＪＳ１和ＪＳ２则表现为各自独立的基因型，而ＴＪ则为ＤＬ和Ｔ２种基因型毒株的混合感染，表明我国的广大地域内存在着Ｍａｓｓ基因型、Ｔ基因型和可能的变异株ＩＢＶ的流行。