冻融过程对绵羊精子ATP酶活性的影响

为了充分发挥和提高优良种公羊的利用率,提高绵羊冻融精液品质,试验采用酶动力学分光光度法对冷冻保存前后小尾寒羊精子和精清中ATP酶活性变化进行研究。结果表明:冷冻保存小尾寒羊精子中ATP酶活性(83.76±3.53)U/m L与冷冻前(175.42±4.32)U/m L相比极显著降低(P0.01),精清中ATP酶活性(164.96±3.22)U/m L与冷冻前(73.51±2.23)U/m L相比极显著升高(P0.01);冷冻前后精子活率与精子ATP酶活性均呈极显著正相关(r=0.979和0.968,P0.01)。说明冻融过程对绵羊精子中ATP酶的活性造成了严重损伤。绵羊冻融精子ATP酶的活性可以在一定程度上预测精子活率,并可作为绵羊精液品质评价的重要指标。     

冷冻保存对绵羊精子谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

为了研究冷冻保存对绵羊精子谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响,提高绵羊冷冻精液的品质,试验采用5,5-二硫二硝基苯甲酸(DTNB)比色法对冷冻保存前后绵羊精液、精子和精清中GSH-Px活性进行研究。结果表明:冷冻保存后绵羊精液GSH-Px活性[(6.25±2.80)U/mL]与冷冻前[(9.48±2.37)U/mL]相比极显著降低(P0.01),冷冻保存后绵羊精子GSH-Px活性[(4.84±1.92)U/mL]与冷冻前[(7.58±2.67)U/mL)]相比显著降低(P0.05),说明冷冻保存对绵羊精液和精子GSH-Px活性造成了严重损伤。冷冻前后精子活率与精子中的GSH-Px活性均呈极显著正相关(P0.01),GSH-Px活性与精子活率关系密切,可作为绵羊精液品质评价的新指标。     

冷冻保存对绵羊精子乳酸脱氢酶活性的影响

为了研究冷冻保存对绵羊精液乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响,提高绵羊精液的品质,试验采用酶动力学分光光度法对冷冻保存前后绵羊精液、精清和精子中LDH的活性分别进行研究。结果表明:冷冻保存后绵羊精液LDH活性[(18.40±7.85)U/m L]和精子LDH活性[(5.91±2.16)U/m L]与冷冻前[(24.89±8.21)U/m L、(10.80±4.95)U/m L]相比均极显著降低(P0.01),而精浆中LDH活性则极显著升高(P0.01),冷冻保存对绵羊精液及精子中LDH的活性造成严重损伤。冷冻前后精子活率与LDH活性均呈极显著正相关(P0.01),LDH的活性可以在一定程度上预测精子活率,可以作为绵羊精液品质评价的新指标。     

超低温冷冻对绵羊精子肌酸激酶活性的影响

为了研究冷冻保存对绵羊精液肌酸激酶(CK)活性的影响,提高绵羊冷冻精液的品质,试验采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对冷冻保存前后绵羊精液、精子和精清中CK活性进行研究。结果表明:与冷冻前比较,冷冻保存后绵羊精液、精子CK活性极显著降低(P0.01),而精清中CK活性显著升高(P0.05)。说明冷冻保存对绵羊精子CK活性影响严重。     

冻融过程对绵羊精子GR活性的影响

为了研究冷冻保存对绵羊精子谷胱甘肽还原酶(GR)活性的影响,提高绵羊冷冻精液的品质,试验采用DTNB比色法对冷冻保存前后精液、精子和精清中GR活性进行研究。结果表明:与冷冻前比较,冷冻保存后精液、精子和精清中GR活性均极显著升高(P0.01)。说明超低温冷冻过程会刺激精子的应激反应,导致绵羊精子中GR活性显著提升。     

冻融过程对绵羊精子琥珀酸脱氢酶活性影响的研究

为了检测冷冻对绵羊精子琥珀酸脱氢酶(SDH)的影响,探索其与精子活率的关系,试验采用试管法对冷冻前后小尾寒羊精子SDH的活性进行研究。结果表明:冷冻后精子活率[(38.80±4.15)%]及精子SDH阳性反应率[(32.80±4.32)%]与冷冻前精子活率[(81.20±2.17)%]和精子SDH阳性反应率[(72.20±4.02)%]相比极显著降低(P0.01),冷冻前后精子活率与精子SDH阳性反应率分别呈显著正相关和极显著正相关(P0.05和P0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子SDH活性造成显著损伤;精子活率与SDH阳性反应率之间的显著相关性证实了精子SDH的活性与精子生命活动密切相关,其活性可以在一定程度上预测精子活率和受精能力,并可作为评价绵羊冻融精液品质的新指标。     

维生素E提高绵羊颗粒冻精品质的机理研究

以无角多赛特公羊为试验对象,采用2步稀释法,在冷冻精液稀释液中添加维生素E,对维生素E提高绵羊颗粒冻精品质的机理进行初探.试验1证明,试验组的活率(0.435)极显著高于对照组(0.365)(P＜0.01),其精子顶体总异常率(33.72%)极显著低于对照组(44.35%)(P＜0.01),且顶体完整率与冻精活率相关极显著(r＝0.662,P＝0.037).添加维生素E可降低冷冻对精子顶体的损害程度,冷冻精液品质得到显著改善.试验2结果表明添加维生素E后AST、ALP、GGT、CK、LDH与ALT的活性均与对照组无显著差异.但对照组与试验组比较,GOT及CK释放量与解冻精子的活率负相关下降(分别为r＝-0.536,r＝-0.209及r＝-0.419,r＝-0.051),LDH的释放量与解冻精子的活率之间正相关(r＝0.123与r＝0.507).试验3结果证明在绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E可以显著提高精子顶体酶的活力,分别为82.91 mu/ml和99.82 mu/ml(P＜0.05).绵羊冷冻精液精子顶体酶活力与精子活率呈正相关(r=0.490),与精子畸形率呈负相关(r=-0.122),冷冻精子活率随着精子顶体酶活力的提高而提高.     

冻融过程对绵羊精子超氧化物歧化酶活性影响的研究

为了研究冷冻保存对绵羊精子超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,提高绵羊冷冻精液的品质,试验采用改良的邻苯三酚自氧化法对冷冻保存前后小尾寒羊精液、精子和精清中SOD的活性进行研究。结果表明:冷冻保存小尾寒羊精液SOD活性[(1 432.24±45.04)U/mL]和精子SOD活性[(511.58±35.06)U/mL]与冷冻前[(1 550.57±60.17)U/mL、(937.42±21.24)U/mL]相比均极显著降低(P<0.01),精清SOD活性[(903.51±9.35)U/mL]与冷冻前[(531.26±7.02)U/mL]相比极显著升高(P<0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子和精液中SOD活性造成了显著损伤。     

绵羊冻融精子透明质酸酶活性变化的研究

为了检测冷冻对绵羊精子顶体透明质酸酶活性的影响,试验采用改良后的明胶膜片法对冷冻保存前后小尾寒羊精子顶体透明质酸酶活性变化进行研究。结果表明:冷冻保存后精子顶体透明质酸酶阳性反应率[(43.00±2.45)%]和平均成环直径[(32.86±0.32)μm]与冷冻前精子顶体透明质酸酶阳性反应率[(67.00±4.79)%]和平均成环直径[(55.05±0.47)μm]相比极显著降低和减少(P0.01),且冷冻前后精子活率与透明质酸酶活性均呈极显著正相关(P0.01),表明冷冻保存对绵羊精子顶体透明质酸酶活性造成显著损伤。说明透明质酸酶的活性可以在一定程度上预测精子活率和受精能力,可作为绵羊精液品质评价的新指标。     

猪精液冷冻过程中的脂质过氧化损伤

实验采集长白猪精液,分析猪精液中抗氧化酶活性及冷冻-解冻过程中精子抗氧化酶活性、精子质量与丙二醛(MDA)含量变化的相关性分析,研究猪精液冷冻过程中的脂质过氧化损伤。结果表明:新鲜猪精子和精浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性较高、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性较低,没有检测到过氧化氢酶(CAT);解冻后精子中SOD、GPX活性降低,SOD活性与鲜精相比差异极显著(P<0.01),精子中MDA含量极显著高于鲜精和平衡后精子(P<0.01)。精子中MDA含量与SOD、GPX活性、质膜完整率和顶体完整率呈负相关,但差异不显著(P>0.05),与活力和活率呈极显著负相关(P<0.01)。结果表明,在猪精液冷冻过程中SOD、GPX活性变化从一定程度上影响了猪精子脂质过氧化损伤,又引起精子活力和活率发生变化,继而影响精子的质膜和顶体完整性。     

冷冻方法对杜泊绵羊冷冻精液品质的影响

试验对绵羊精液分别采用液氮熏蒸冷冻法和冷冻仪冷冻法进行冷冻,通过测定精液解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和谷草转氨酶活性及乳酸脱氢酶活性来比较不同的冷冻方法对解冻后精液品质的影响;通过测定精液稀释后、平衡后、冷冻仪法冷冻后的酶活性来比较谷草转氨酶与乳酸脱氢酶在不同阶段的释放量。结果表明,采用冷冻仪法冷冻后的精子活率和质膜完整率极显著高于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）;冷冻仪法冷冻后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）;精液稀释后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于精液冷冻后的活性（P<0.01）。表明采用冷冻仪冷冻法的绵羊精液品质好于液氮熏蒸冷冻法。精子中谷草转氨酶主要在平衡阶段释放,而乳酸脱氢酶主要在冷冻阶段释放。     

山羊精清中抗氧化酶活性与精子活力的相关性分析

为探讨山羊精清中抗氧化酶活性与精子活力的关系.选择年龄3岁左右、平均体重47.2 kg±3.5 kg的健康种公羊20只,采集精液,对精液品质初步评价后离心分离精清,测定GSH-Px、SOD、CAT抗氧化酶活性及T-AOC,然后与精子活力进行相关性分析.结果表明:GSH-Px、SOD的酶活性与精子活力极显著相关, 其相关系数分别为0.592(P=0.008)和0.873(P=0.001);CAT活性与精子活力的相关性接近显著(P=0.065).说明在山羊精清中抗氧化酶GSH-Px和SOD发挥重要的抗氧化作用.     

测定冻精酶活性的高低预测精液品质

[目的]为了通过测定牛冻精谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的活性高低来预测精液品质.[方法]用人医血清酶类测定的赖氏法测定两种酶的活性.[结果]表明:谷丙转氨酶与精子活率呈极显著负相关(P＜0.01),与顶体完整率呈显著负相关(P＜0.05);谷草转氨酶与精子活率呈极显著负相关(P＜0.05),与顶体完整率呈极显著负相关(P＜0.01).[结论 ]谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性愈高,精子活率和顶体完整率愈低,精子品质下降.     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

离心对绒山羊精液冷冻效果的影响

选用8只精液品质良好的岢岚绒山羊成年公羊,采精后将精液混合,等分为2份,一份不离心(对照组),4倍稀释后颗粒冷冻;另一份在2 000 r/min下离心10 min,弃去上清,补充等体积稀释液,再4倍稀释后颗粒冷冻.探讨离心对冷冻前后的精液品质及其相关酶活性的影响.结果表明,离心可显著提高冻前冻后精子活率、弯尾率和顶体完整率,显著降低精子的畸形率和获能率(P＜0.05);离心组冻前冻后精泣的GOT活性、LDH活性、GPT活性显著低于对照组(P＜0.05),精浆果糖含量显著高于对照组(P＜0.05).表明,离心处理可明显提高绒山羊精液冻前冻后的品质.     

超低温冷冻对德国牧羊犬顶体酶类活性的影响

为了探讨超低温冷冻对德国牧羊犬透明质酸酶(HYD)、顶体酶(ACE)和酸性磷酸酶(ACP)活性的变化,试验分别对冷冻前后德国牧羊犬精子采用改良明胶底膜法、改良BNPNA法、磷酸苯二钠法对精子HYD、ACE和ACP活性进行研究。结果表明:超低温冷冻前后精子HYD、ACE和ACP活性极显著降低(P0.01);解冻后精子3种顶体酶类活性分别与精子活率和顶体完整率呈正相关,其中ACE活性与顶体完整率呈极显著正相关,相关系数为0.487(P0.01)。3种顶体酶类活性与畸形率均呈显著负相关(P0.05),ACE活性与精子顶体完整率的相关系数为0.487,相关度大于HYD(0.439和0.459)和ACP(0.440);而HYD活性与精子活率的相关系数为(0.404和0.423),相关度大于ACE(0.377)和ACP(0.369)。说明超低温冷冻使德国牧羊犬精子3种顶体酶类活性均显著降低;3种顶体酶类活性分别与精子活率和顶体完整率呈正相关,与畸形率呈负相关。     

维生素E对绵羊鲜精及冻精精液品质的影响

日粮中添加维生素E可以提高绵羊鲜精的活率 ,对照组和试验组的活率分别为 0 72± 0 0 7和 0 78± 0 0 6(P <0 0 5 ) ,显著改善鲜精精液品质。采用两步稀释法在绵羊冷冻精液稀释液中添加维生素E ,可以极显著降低冷冻对精子顶体的冷刺激损害程度 ,试验组的活率 ( 0 43 5± 0 0 2 0 )极显著高于对照组 ( 0 3 65± 0 0 2 6) (P <0 0 1) ,精子顶体的总异常率试验组 ( 3 3 72 % )极显著低于对照组 ( 4 4 3 5 % ) (P <0 0 1) ,其中试验组顶体膨胀率和脱落率与对照组分别为 1 2 8%±0 5 8%、2 3 0 8%± 1 45 %与 2 68%± 0 5 9%、2 8 96%± 3 14 %。冷冻精液品质显著改善。     

冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响

为了检测冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响,试验采用改良的明胶膜片法对冷冻保存前后小尾寒羊精子顶体蛋白酶的活性进行研究。结果表明:冷冻保存后精子顶体蛋白酶阳性反应率[(47.00±2.55)%]和平均成环直径[(23.89±0.22)μm]与冷冻前精子顶体蛋白酶阳性反应率[(77.00±2.00)%]和平均成环直径[(37.26±0.47)μm]相比差异极显著(P<0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性造成显著性损伤。     

除去精浆对波尔山羊冷冻精液品质的影响

以波尔山羊精液为实验材料,采用二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000r/min离心处理,制作细管冻精,并进行超微结构分析.结果表明:经离心处理的冻精精子活率极显著优于对照组(P<0.01),精子顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01) ,精子存活时间不同处理间未见显著差异(P>0.05).精浆中包含有多种物质,充当精子载体的作用,并可稀释精子,为精子提供代谢物质.试验中除去精浆后精子活率、 顶体完整率均优于对照组,表明除去精浆对冷冻后的精子品质有提高作用.     

用电子显微镜和生物化学的方法评定绵羊冷冻精液品质

作者对绵羊冷冻精液的精子顶体完整率,精清中的透明质酸酶、谷草转氮酶、乳酸脱氢酶的活力与受胎率的关系进行了研究。利用电子显微镜负染色技术检查冷冻绵羊精子的顶体完整率,同时测定精清中的 Hyase、GOT 和 LDH的活力。根据统计分析,顶体完整率和受胎率之间呈显著相关(P<0.05)。Hyase 和 GOT 与受胎率呈显著负相关(P<0.05),但是 LDH 的活力与受胎率无显著相关(P>0.05)。因此,能够利用这些方法作为评定绵羊冷冻精液品质的指标之一,并在一定程度上反映了精液的受胎能力。