新型γ-氨基丁酸发酵培养基配方优化

利用响应面分析法对γ-氨基丁酸(GABA)发酵培养基进行优化,通过二水平正交试验观察葡萄糖、玉米浆、豆饼粉、K_2HPO_4、吐温-80、初始pH值以及谷氨酸钠(MSG)对酵母菌发酵产生GABA的影响。结果显示,最佳培养基配方为(g/L):豆饼粉26、玉米浆10、K_2HPO_410、葡萄糖9、MSG 5、初始pH值6.8,在此优化的培养基中菌株的GABA质量浓度提高了近4倍,达到3.63 g/L。     

酵母菌种子液发酵培养基的筛选

采用单因素筛选试验对酵母菌CGMCC2.119种子液培养基进行优化,结果表明:当种子液培养基的组成为麸皮15%、葡萄糖9%、MgSO40.2%、K2HPO40.5%和(NH4)2SO40.5%时,酵母菌菌数可达2.917亿/mL,高于麦芽汁液体培养基培养的酵母菌数(1.983亿/mL)。由此可见,该培养基可以替代麦芽汁液体培养基用于酵母菌菌种活化。     

铁离子对果酒酵母菌生长影响的初步研究

为探讨铁离子对果酒酵母菌生长的影响,用含有不同浓度Fe2 的YEPD培养基对1450果酒酵母进行培养,利用邻菲罗琳比色法和血球计数方法分别测定铁含量和酵母菌数目.试验结果:用加铁离子培养基培养的酵母菌的生长曲线均低于空白组:在1.00 m01/L Fe2 浓度下,果酒酵母菌的总铁含量最高且与空白组差异极显著;2.08 mol/L Fe2 浓度组显著性地低于空白组,且3.00 mol/,L Fe2 浓度下的总铁含量最小.结论:不同浓度Fe2 对果酒酵母生长有显著的抑制作用,且抑制作用显著不同.     

产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量

本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ-氨基丁酸(GABA)屎肠球菌,并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F6,进行形态学特征与革兰氏染色鉴定;再扩增菌株F6的16S r DNA基因,然后测定该基因序列和构建系统发育树;同时采用高效液相色谱(HPLC)法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结果表明:菌株F6菌落大而光滑、圆形、直径1~2 mm、边缘整齐、乳白色;在分离培养基上菌落周围形成透明圈,使分离培养基呈黄色;在MRS固体培养基上菌落不透明,周围有透明圈。革兰氏染色鉴定菌株F6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示,菌株F6的16S r DNA基因序列与Gen Bank数据库中屎肠球菌(Enterococcus faecium)的相似性大于99%。HPLC法测定得到GABA标准曲线线性方程为Y=7 080 733.139 5 X-4 511.692 7(R2=0.999 4),通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7.1 g/L,保留时间为7~10 min。结果提示,本试验筛选得到1株高产GABA的屎肠球菌F6。     

腐植酸钠对酵母菌发酵特征的影响

试验通过在种子液培养基中添加腐植酸钠,探讨腐植酸钠对酵母菌发酵特性的影响。将腐植酸钠按不同比例添加到酵母菌种子液培养基中,以活菌数为指标筛选腐植酸钠的最适添加量;再将含有最适比例腐植酸钠的酵母菌种子液接种到稻壳粉、精料、豆粕和统糠4种固态培养基中,测定发酵产物中的活菌数,可溶性糖、可溶性蛋白和真蛋白质含量等指标。试验结果为:种子液中添加1%~4%的腐植酸钠对酵母菌的生长有明显促进作用,当腐植酸钠添加量为2%时,酵母菌活菌数最高(P0.05)。种子液中添加腐植酸钠可明显改善酵母菌在固态培养基中的发酵特性:种子液中添加腐植酸钠可显著提高4种固态发酵基质中酵母菌的活菌数,且在豆粕中提高量最大(P0.05);可显著降低精料、豆粕、统糠发酵物中的可溶性糖含量,提高稻壳粉中可溶性糖的含量,其中统糠中可溶性糖含量降低最为明显(P0.05);可显著提高精料发酵产物中可溶性蛋白质含量(P0.05),对稻壳粉、豆粕和统糠三种培养基中可溶性蛋白质含量的影响不显著(P0.05);可显著增加稻壳粉、精料、豆粕和统糠4种培养基中真蛋白质含量(P0.05),其增加率由高到低依次为:稻壳粉、精料、统糠、豆粕。结果显示,种子液中添加腐植酸钠可显著影响酵母菌固态发酵的特征,进而提高发酵效果,改善发酵饲料品质。     

混合菌发酵稻草室温条件的研究

试验采用正交设计的方法,确定了康氏木霉、白腐菌、酵母菌混菌发酵的最佳培养基,然后通过单因素筛选出混菌最优的培养条件,结果表明:康氏木霉和酵母菌组,白腐菌和酵母菌组可以兼容共生,康氏木霉和白腐菌组有一定拮抗作用,但通过混合菌种优化条件的筛选,能降低拮抗。即混合发酵稻草最优培养基组成为稻草:麸皮6:4,尿素2%,营养液60%。混合菌种接种量为2 ml,接种比例1:2:1(康氏木霉:白腐菌:酵母菌)、培养6 d,发酵最终产物中粗蛋白含量从3.49%增加到16.59%,粗纤维含量从44.56%下降到23.17%。     

清肺颗粒固态发酵培养基成分研究

【目的】筛选最佳的清肺颗粒固态发酵培养基碳源、氮源、无机盐种类,优化清肺颗粒发酵培养基组成,提高组方中(R,S)-告依春的含量。【方法】建立发酵物中(R,S)-告依春含量的高效液相色谱法(HPLC)检测方法;单因素试验筛选清肺颗粒固态发酵培养基的碳源(葡萄糖、蔗糖、甘露醇、麦芽糖、玉米面、可溶性淀粉和清肺组方中药)、氮源(蛋白胨、黄豆粉、麸皮、酵母浸膏、硫酸铵、氯化铵和尿素)和无机盐(碳酸钙、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸锰和氯化钠)成分,HPLC测定每克固态发酵培养物中(R,S)-告依春含量;4因素(碳源、氮源、无机盐和水)3水平响应面分析优化各培养基成分比例,用筛选出的最适培养基成分替代基础培养基中相应物质,接种解淀粉芽孢杆菌,于37℃、130 r/min振荡培养22 h,再以每克固态发酵培养物中(R,S)-告依春含量为评价指标,以响应面分析筛选培养基各组分含量。【结果】清肺颗粒最适固态发酵培养基碳源为组方中药粉,无机盐为CaCO₃,氮源为黄豆粉以及水;响应面分析优化的各培养基成分含量为：中药粉30%、黄豆粉10%、CaCO₃ 0.2%和水59...     

乳酸片球菌ZPA017发酵合成γ-氨基丁酸的条件优化

为提高乳酸片球菌ZPA017的γ-氨基丁酸(GABA)产量,本试验通过单因素筛选和响应面法,对其发酵培养基和培养条件进行了优化。结果表明:乳酸片球菌ZPA017产GABA的最佳培养基配方为:D-果糖18g/L、大豆蛋白胨40g/L、乙酸钠3g/L、磷酸氢二钾1.37g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、硫酸镁0.63g/L、硫酸锰0.29g/L、吐温-801mL/L。在此基础上,采用单因素筛选的方法,优化得到乳酸片球菌ZPA017产GABA的最佳发酵条件为:温度37℃、初始pH6.5、接种比例1%、发酵时间30h。乳酸片球菌ZPA017在最佳培养基和发酵条件下培养,发酵液中γ-氨基丁酸的含量达1.036g/L,是优化前产量的3.77倍。     

发酵葡萄渣营养成分分析及饲用价值评估

为了探讨发酵葡萄渣作为饲料的优劣,试验以饲料酵母、酿酒酵母的混合菌种为发酵剂发酵葡萄糖渣,研究酵母菌发酵葡萄渣的营养价值。结果表明:经过酵母菌发酵的葡萄渣营养价值提高,粗蛋白含量为(21.62±0.60)%,中性洗涤纤维含量为(53.13±1.29)%,酸性洗涤纤维含量为(45.09±1.08)%,钙含量为(0.64±0.04)%,磷含量为(0.66±0.09)%。说明用酵母菌发酵葡萄糖渣可使其饲用价值得到改善。     

日本血吸虫体内5-HT和GABA的神经生物学研究

5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)为日本血吸虫体内重要的生物活性物质。本文简要介绍:1药物对日本血吸虫体长和运动性的影响;2日本血吸虫体内5-HT的含量;3日本血吸虫体内5-HT的合成及降解;4抗血吸虫药物对虫体内5-HT含量的影响;5日本血吸虫体内5-HT受体特性;6药物对日本血吸虫体内环核甘酸(cAMP)的影响;7GABA含量、来源;收稿日期:2002-05-03基金项目:国家自然科学基金资助项目(39170578)作者简介:余祖功(1966-),男,河南省商城人,南京农业大学动物医学院讲师,在职博士生,主要从事神经生物学的研究和新兽药及新制剂的研究工作。8日本血吸虫GABA受体特性。     

耐高温β-甘露聚糖酶毕赤酵母菌M27-8发酵条件优化

为获得产β-甘露聚糖酶发酵最佳条件,本研究以克隆筛选获得的产耐高温β-甘露聚糖酶的毕赤酵母菌M27-8菌株为研究对象,对不同氮源含量、葡萄糖含量、p H、发酵时间、接种量、温度和转速进行优化。结果表明:最佳产酶条件为6%玉米浆、3%葡萄糖、p H 5.5、发酵60 h、2%接种量、28℃、225 r/min,最大酶活达到452.7 U/m L,是优化前酶活138 U/m L的3.3倍。综上,此发酵培养基可用较廉价的玉米浆取代YPD培养基,从而节省成本,为工业生产奠定基础。     

优良酵母菌株的分离和筛选

试验采用麦芽浸粉培养基和秸秆粉培养基,利用平板划线法,从富含酵母菌的青贮饲料和酒糟饲料中分离出酵母菌,经过培养条件的优化,从中筛选出用作反刍动物饲用的优良酵母菌株。试验结果表明,从青贮玉米和大麦啤酒糟中分离得到9号菌株生物产量最高,OD值为2.231,为优良酵母菌株。     

高糖对蜂蜜中鲁氏接合酵母生理特性的影响

为研究从蜂蜜中分离的鲁氏接合酵母在高糖培养基中的生理特性变化,本文对鸭脚木蜜的耐高渗酵母菌进行平板分离,筛选具有代表性的酵母菌菌落,摇培后提取其DNA,进行ITS序列扩增,经比对后获得酵母菌的种属信息;用30%、40%、50%、60%的高糖培养基进行培养,测定其生长、培养基残糖量和氧化酶活力的变化。分离鉴定后得到鲁氏接合酵母,与对照组相比,在40%、50%、60%组中生长速率降低,但30%培养基中出现二次生长;随着糖浓度的增加,酵母菌的糖耗量减少,在30%培养基中糖耗量最大;但在高糖培养基中酵母菌胞内SOD、POD、CAT活力增加。这些结果为筛选耐糖工程菌提供理论依据。     

布拉酵母菌与凝结芽孢杆菌混合固体发酵的培养基优化研究

文章对布拉酵母菌与凝结芽孢杆菌进行混合固体发酵,并通过正交试验研究,根据其表观现象观察和发酵产物的测定,确定了培养基的最佳配方和最适生长条件。通过正交试验得出,以固体培养基(包括麸皮、豆饼粉、玉米粉)为底料,加入4%葡萄糖、无蛋白胨、0.005%硫酸镁、0.1%磷酸二氢钾,5%接种量接入布拉酵母菌与凝结芽孢杆菌混合菌液,30℃培养48 h,布拉酵母菌与凝结芽孢杆菌混合固体发酵培养基能得到较高产量的布拉酵母菌和凝结芽孢杆菌。结果显示,在该条件下,布拉酵母菌与凝结芽孢杆菌能够以最佳的生长状态生长。     

抑制瘤胃甲烷排放的酵母菌的筛选及培养条件优化

减少瘤胃甲烷排放措施的研究已成为当前的研究热点之一。本研究以酒、面包和畜禽专用酿酒酵母产品为原材料,从中分离到三株酵母菌,将其制成冻干粉,通过体外产气试验,筛选出了一株抑制瘤胃甲烷排放效果最为显著的酵母菌株。然后以该酵母菌株作为研究对象,进行分子生物学鉴定;采用分光光度计比浊法测定该酵母菌株的生长曲线,确定菌体生长规律;并以此为依据,设计单因素试验考察该酵母菌株最适宜的生长条件。结果表明,分离得到的酵母菌株均为酿酒酵母saccharomyces cerevisiae;抑制瘤胃体外甲烷排放效果最显著的1株酵母菌分离自面包中;该酿酒酵母菌株的对数生长期为8～24h,其最佳培养条件为:生长温度30℃,pH 5.5,培养基中葡萄糖的浓度4.0%。     

桑叶中γ-氨基丁酸含量的测定及其影响因素的研究

γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid,GABA)是动物中枢神经系统中的一种主要的抑制性神经递质,也是广泛存在于植物体内的一种与逆境胁迫有关的非蛋白氨基酸。研究表明,用AlCl3有效地去除桑叶中的水溶性色素后,采用分光光度法可以准确测定桑叶中GABA的含量。探讨了影响桑树叶片中GABA含量的主要因素:不同品种中GABA的含量不同,陕桑305最高,育71-1次之,湖桑32号和农桑14号含量稍低;相同叶位桑叶中GABA的含量为早期叶片高于后期叶片;同一时期不同叶位桑叶中GABA的含量随叶龄的增加逐渐降低,桑叶中GABA的含量在一天中以5:30时含量最低,17:00时含量最高。     

酵母菌发酵生产饲料酵母条件的优化

试验选用5株酵母菌,分别利用4种培养基进行发酵试验,测定菌体生物量、粗蛋白含量和总蛋白得率,结果表明,糖蜜培养基为发酵饲料酵母的最佳培养基,其中产朊假丝酵母(8号菌)为发酵生产的优势菌种。     

γ-氨基丁酸对鲫鱼急性低温应激后血液生化指标的影响

为探讨γ-氨基丁酸(GABA)对鲫鱼急性低温应激后皮质醇激素等血清生化指标的影响,将150条鲫鱼随机分为5组,A、B组分别为空白对照组、试验对照组,C、D、E组分别在水中添加GABA25,50,100 mg/L,每组3个重复,低温应激0,0.5,2,4 h后尾静脉采血,分离血清,测定皮质醇含量和血清生化指标。结果表明:急性低温应激使鲫鱼血清中皮质醇含量及生化指标多数表现为先上升后下降的趋势,添加GABA对总胆固醇、碱性磷酸酶、胆碱酯酶、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、葡萄糖等含量无显著影响(P0.05);GABA可以有效地缓解皮质醇和三酰甘油含量的升高(P0.05),从而具有一定的抗冷应激作用。     

响应面-主成分分析法优化副干酪乳杆菌发酵培养基

为提高副干酪乳杆菌发酵液中的乳酸菌数、γ-氨基丁酸(GABA)产量和乳酸产量,本试验采用单因素法、响应面法和主成分分析法对其发酵培养基成分进行了筛选和优化。结果表明：副干酪乳杆菌发酵培养基的最佳配方为：葡萄糖30 g/L,酵母粉50 g/L,L-谷氨酸钠15 g/L,硫酸锰0.18 g/L,乙酸钠5 g/L,磷酸氢二钾2 g/L,柠檬酸氢二铵2 g/L,吐温-80 1 mL/L。该条件下,副干酪乳杆菌发酵液中的乳酸菌数为5.34×10⁹CFU/mL,GABA产量为576μg/mL,乳酸产量为12.32 mg/mL,得到的规范化综合得分为0.9016,与理论规范化综合得分0.9247接近,表明响应面结合主成分分析法对副干酪乳杆菌发酵培养基的优化具有良好的效果。     

混合菌发酵稻壳粉生产饲料蛋白的研究

利用筛选出的可以利用戊糖但不产酒精并生长较快的酵母菌株A发酵经霉菌处理的稻壳粉,并以实验室保存的酿酒酵母菌及管囊酵母菌作对照.酵母菌株A发酵终产物中蛋白质含量高迭23.79%,比原稻壳粉中蛋白质含量(5.96%)提高了299.2%.同时,比酿酒酵母发酵终产物中的蛋白质含量(13.04%)高出82.4%,比管囊酵母发酵终产物中的蛋白质含量(20.91%)高出13.8%.