百色市高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测结果分析

为评估百色市猪群高致病性猪繁殖与呼吸综合征（HP-PRRS）免疫效果,2012年—2013年在66个规模养猪场和249个农村散养户分别采集猪血清样品465份和644份,使用间接 ELISA 检测 HP-PRRSV 抗体,结果显示,现2012年 HP-PRRSV 抗体平均阳性率为68．02％,2013年 HP-PRRSV 抗体平均阳性率为75．32％;HP-PRRSV 一免抗体平均阳性率为63．91％,二免抗体平均阳性率为83．60％;HP-PRRS 灭活苗免疫抗体平均阳性率为75．42％,HP-PRRS 弱毒苗免疫抗体平均阳性率为70．86％。说明2013年 HP-PRRSV 抗体平均阳性率高于2012年,二免的抗体平均阳性率高于一免;HP-PRRS 灭活疫苗的初步使用效果良好。     

开县规模猪场发生高致病性猪繁殖与呼吸综合征调查研究

<正>高致病性猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性疫病。该病以妊娠母猪的早产、流产、死胎、木乃伊胎、产弱仔猪和仔猪咳嗽、呼吸困难、呼吸急促等为主要特征。近年猪场疫病多以混合感染为主,其中高致病性猪繁殖与呼吸综合征是养猪业的最大杀手。了解该病的主要临床症状及病理变化,总结分析该病的防治方法,有针对性地提出防控策略,指导养殖户做好疫病防控工作是确保畜牧增效,农     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,通过对PRRSV基因连续缺失片段dNsp2(87)进行诱导表达,重组pUC57-dNsp2蛋白,经镍柱纯化后,作为抗原包被微量反应板,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。经反应条件优化,确定抗原的最适包被浓度为40μg/mL,最适封闭液为5%脱脂奶粉,检测血清稀释度为1:40,酶标二抗的最适工作浓度为1:5 000,最佳显色时间为1 h,确定阴阳性临界值为0.35(OD450)。该方法均不与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)阳性血清发生交叉反应,具有良好的特异性。与IDEXX PRRSV Kit进行重复性、敏感性、符合性试验,证明该方法具有较好的重复性、敏感性、符合性。结果表明,该方法可用于临床PRRSV抗体的检测。     

贵阳市规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学调查研究

试验应用ELISA检测方法对贵阳市3个未免疫猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）猪场和9个免疫猪场的后备母猪、生产母猪和5～10周龄断奶仔猪3个猪群进行猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体检测。结果表明：贵阳市3个未免疫猪场中2个有PRRSV感染,猪群抗体阳性率在0％-10％之间,平均阳性率为5％;9个免疫猪场猪群PRRSV抗体阳性率在65％～90％之间,平均阳性率为82．80％,未免疫猪场与免疫猪场猪群抗体平均阳性率相比,差异极显著（P〈0．01）。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒四川变异株致病性分析

为探究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)四川变异株SC2012和SC2012-2人工感染仔猪的病理学特征及其在组织内的分布情况,本研究将HP-PRRSV SC2012和SC2012-2株接种健康断奶仔猪,观察不同发病阶段仔猪的临床症状;感染后第14 d剖检仔猪观察其器官病变情况、组织切片的病理学变化,通过免疫组化方法(IHC)和RT-PCR方法检测PRRSV在组织中的分布情况。结果显示,两组仔猪感染后均未出现显著的呼吸症状,并于感染后3 d~5 d出现轻微腹泻;体温测定结果显示,两组仔猪均出现轻度发热、病毒血症,但SC2012-2组较SC2012组仔猪出现时间提前、病毒滴度高、维持时间长;两组仔猪均能够通过唾液、粪便、鼻分泌物排毒;剖检仔猪肺脏均出现不同程度的间质性肺炎,肝脏表现为肝淤血,其它多个器官均有不同程度的炎性细胞浸润;临床症状和病理损伤等结果表明,SC2012较SC2012-2株毒力弱。组织内病毒分布结果显示,两株病毒均在多个器官中分布,但结合组织病理变化分析显示病毒的分布并不一定导致组织损伤,HP-PRRSV四川变异株的突变对其毒力产生了一定的影响。本研究为进一步对HP-PRRSV SC2012和SC2012-2的研究提供必需参数。     

TaqMan荧光定量RT-PCR检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒

根据GenBank登录的高致病性PRRSV Nsp2基因序列利用Primer Express 3.0软件设计合成了引物和探针;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan 荧光定量RT-PCR检测方法.同时用建立的检测方法对以定量的10倍系列稀释质粒pMD- Nsp2为标准品进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比.结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达3.15 拷贝,比常规RT-PCR灵敏度高100倍.用该方法对3份不同的标准品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前高致病性PRRSV的诊断需要.     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank上猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株的核苷酸序列与古典美洲株的核苷酸序列,设计一对高致病性PRRSV特异性引物,结合快速的RNA抽提试剂和一步法RT-PCR,建立高致病性PRRSV快速RT-PCR检测体系。通过测序和同类试剂盒检测效果比对,证实该体系检测结果准确,体系特异性和灵敏度试验结果显示,该体系对猪瘟病毒、普通PRRSV、禽流感病毒无扩增产物,至少能检测经10万倍稀释后的临床阳性样品。该方法可直接对可疑组织样品进行检测,操作简单、快速、价廉、受环境因素污染概率小,适合临床样品的检测。     

某猪场爆发高致病性猪繁殖与呼吸综合征的诊断

2007年6月份,某猪场爆发一起以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,临诊症状主要表现为高烧、皮肤发红、怀孕母猪流产,剖检主要特征是间质性肺炎。经过病原分离,获得一株能够引起Marc-145细胞发生病变的病毒。进一步通过血清中和试验、血凝试验、RT-PCR,确定此次分离的病毒为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。综合该病的流行病学特征、临床症状、剖检病理变化以及实验室检验,确诊该病为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪繁殖与呼吸综合征。     

规模猪场猪瘟病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒及口蹄疫病毒抗体水平监测及免疫效果评价

某100头基础母猪的规模猪场,在常规免疫情况下,10 余头母猪在妊娠后期出现了流产现象。为调查该猪场免疫效果,分别采集空怀母猪、妊娠前期母猪、妊娠后期及妊娠后期流产母猪血清共20份,进行猪瘟病毒 (Classical Swine Fever Virus,CSFV)、高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, HP-PRRSV)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)-g E、口蹄疫病毒 (Foot and Mouth Disease Virus,FMDV) 抗体检测。检测结果表明,PRV-gE 抗体和 HP-PRRSV 抗体阳性率均在 95%以上,提示该猪群可能存在 PR 野毒感染;CSFV抗体阳性率为 85%,且阻断率大于 0.6 的占 53.8%,说明该猪群 CSFV 抗体没有达到理想水平;FMDV 抗体阳性率为 35%,说明该猪群 FMD 免疫效果较差,应该及时补免。调查结果提示,PR 野毒感染可能是导致该规模场母猪流产的主要原因。     

辽西地区规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征抗体检测与分析

<正>猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,曾于1996年、2001年、2006年在我国出现3次暴发式大流行,给养猪业造成了巨大的经济损失[1]。由于引种的不规范及免疫程序的不合理,辽西部分地区的规模化养殖场也有猪蓝耳病的发生和流行。研究采用ELISA检测法对采自辽西地区猪场的血样进行了检测。1材料与方法1.1被检血清2012年3月份—2013年4月份期间,采用耳静     

辽西地区规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征抗体检测与分析

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）又称蓝耳病,曾于1996年、2001年、2006年在我国出现3次暴发式大流行,给养猪业造成了巨大的经济损失[1]。由于引种的不规范及免疫程序的不合理,辽西部分地区的规模化养殖场也有猪蓝耳病的发生和流行。研究采用ELISA检测法对采自辽西地区猪场的血样进行了检测。1材料与方法1.1被检血清2012年3月份—2013年4月份期间,     

2016年—2018年玉林市规模猪场猪繁殖与呼吸综合征抗体检测与分析

为了解2016年—2018年玉林市规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)疫苗免疫状况,为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的防控提供依据.本研究利用ELISA方法对采集自2016年—2018年玉林市规模化猪场的4845份血清进行了PRRSV抗体检测,并对检测结果进行了分析.结果显示:PRRSV抗体阳性数为4025份...     

云南高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2基因变异分析

采用RT-PCR技术对云南2007年采集的48份猪组织样品中病毒Nsp2基因进行检测,获得阳性样品14份,选择5份代表性样品将其PCR产物纯化后,克隆至pMD18-T载体测序,并与已知代表性毒株进行比较及系统发育分析。结果发现云南病毒样品Nsp2基因核苷酸及氨基酸序列同源性分别为95．8％～99．0％和92．3％～98．6％。5份样品病毒Nsp2蛋白482位、534位～562位氨基酸均存在缺失,其中1份样品（YNMG）486位～489位氨基酸也发生了缺失。云南病毒样品在系统发育树上可划分为4个亚组群,分别与广东、广西、贵州、浙江、江苏、山东毒株遗传关系密切。     

广东省猪繁殖与呼吸综合征抗体十年检测结果分析

1997-2006年,用ELISA检测方法对广东省猪群PRRS抗体进行跟踪监测.1997-1999年,全省猪场均未开展PRRS疫苗免疫,猪场抗体平均阳性率分别为17.69%、29.09%、38.42%;2000-2005年,全省猪场逐渐使用PRRS疫苗,抗体平均阳性率分别为40.68%、46.47%、54.14%、55.37%、55.72%、73.03%;2006年对57个猪场1747份血清进行检测,其中85.3%的中大规模场已进行PRRS免疫,抗体平均阳性率为79.8%;82.6%的小规模、个体场未进行PRRS免疫,场阳性率为94.74%,抗体平均阳性率为70.29%.10年来的监测结果表明,广东省猪场遭受PRRSV感染日益严重,大部分猪场存在PRRSV感染.随着PRRS危害性的加重,多数中大规模猪场加强了免疫,但部分规模场和绝大部分小规模、个体猪场仍未做好PRRS的免疫工作.因而,加强PRRS的防控,特别是免疫工作,仍是目前我省猪场的一个重要任务.     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

2006年6月份以来,我国多个省份暴发高致病性猪繁殖与呼吸综合征,给我国养猪业造成了巨大经济损失.为全面了解高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在我国的流行情况以及遗传变异规律,本研究采用RT-PCR的方法,对从2006年8月至2007年10月期间,来自于19省(市)共474份样品进行高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸的检测,结果检出阳性样品294份.在各省不同时期样品中均有阳性样品检出.通过对阳性样品进行Nsp2基因和ORF5基因扩增,序列分析发现所有检测的猪繁殖与呼吸综合征病毒株高度同源,为同一毒株遗传变异而来,所有猪繁殖与呼吸综合征毒株与HB-1株遗传关系最近;且Nsp2均缺失30个氨基酸.     

2株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒分子特征分析

为进一步掌握黔西南州猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）流行变异趋势,对2株高致病性PRRSV（HR-PRRSV）贵州分离株GZLPS、GZSB进行Nsp2与GP5基因克隆和测序,并分析毒株分子变异特征。结果显示,2株分离株Nsp2基因有90个核苷酸不连续缺失,不同位置的36个核苷酸发生突变;GP5基因存在不同位点置换。同源性比对与系统进化树分析显示,2株分离株Nsp2与GP5基因与HP-PRRSV JXA1株及贵州省2011年以前流行毒株的核苷酸同源性在96%以上,氨基酸同源性在95%以上,但在分子变异上存在差异。结果表明黔西南州PRRSV变异方式已呈多样性。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒体外抗体依赖增强作用的初步研究

为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)体外抗体依赖增强作用,试验对HP-PRRSV TJ-92株毒液(1×10~(6.0)TCID_(50)/0.1 mL)进行10倍倍比稀释,与等体积2倍倍比稀释的各稀释度HP-PRRSV TJ-92株特异性阳性血清(中和效价为1∶2~5)中和后,在Marc-145细胞上培养增殖72 h,测定收获毒液的病毒含量。结果表明:能使1×10~(0 )TCID_(50)～1×10~(6.0) TCID_(50 )HP-PRRSV毒液病毒含量增高最大的阳性血清稀释度依次为1∶2~9、1∶2~(10)、1∶2~9、1∶2~8、1∶2~9、1∶2~7、1∶2~8,经计算,HP-PRRSV毒液病毒含量最高可提升1×10~(4.5)TCID_(50)/0.1 mL。说明HP-PRRSV在体外表现出抗体依赖增强作用,且被中和HP-PRRSV含量越低时增强作用越明显。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒对4月龄莱芜黑猪的致病性分析

本试验旨在探讨高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)对地方品种猪的致病特点。将HP-PRRSV经滴鼻感染4月龄健康莱芜黑猪,观察接毒后的表现,于接毒不同时期颈静脉采血,ELISA试剂盒(IDEXX)检测外周血血清抗体水平的动态变化,定期剖杀,采集相关的器官组织制备组织切片,HE染色,观察不同组织的动态病理学变化,免疫组化染色检测病原在不同组织中的分布。结果表明,攻毒后第2天便出现一定的临床症状,但持续2d后症状就基本消失,感染猪未见死亡。攻毒后5d便可检测到抗体阳性(1/7),14d抗体达峰值。攻毒后3d便可见间质性肺炎,轻微的病毒性脑炎,实质器官颗粒变性;攻毒后7d出现典型的间质性肺炎、淋巴组织坏死、各段肠管大量嗜酸性粒细胞浸润及实质器官出现空泡变性。在攻毒后2～4周内,肺一直表现典型的间质性肺炎,病毒性脑炎逐渐加重,肾上腺变性坏死,胰腺轻微的炎性细胞浸润,甲状腺轻微充血、出血,实质器官出现严重的空泡变性。PRRSV抗原阳性信号出现在淋巴组织(淋巴结、脾、扁桃体)、气管、心、肝、肺、肾、胃、十二指肠、空肠、回肠、甲状腺、肾上腺、颌下腺、子宫、大脑及小脑内;盲肠、结肠、直肠、膀胱、胰腺、输卵管及卵巢均未见到阳性信号。阳性信号主要位于感染细胞的胞质中,偶尔出现在核内。试验结果表明:HP-PRRSV人工感染4月龄莱芜黑猪具有广泛的组织嗜性,并导致广泛的组织损伤,但临床症状表现轻微,未见死亡现象,4月龄莱芜黑猪对HP-PRRSV感染具有较强的抵抗力。试验结果为进一步研究HP-PRRSV对我国地方猪与外源品种猪的致病性差异提供了一定的理论依据。     

2020年新疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测与分析

为了解2020年新疆地区猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)抗体水平及其消长规律,本试验采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法对1 218份血清中PRRSV免疫抗体水平进行检测和分析.结果显示,PRRSV抗体平均阳性率为78.49％(956/1218),高于国家规定标准(70％).S/P的平均值为1.22±0.8...