正交试验优化虎舌红茎尖离体培养条件

采用正交设计及方差分析对影响虎舌红植株离体培养的因素进行优化研究,结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D0.7 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+蔗糖28 g/L+琼脂6.0 g/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+CPPU0.4 mg/L+AgNO34.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,分化率为96%,增殖率为5.5;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.4 mg/L+IBA 0.3 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂5.0 g/L,生根率为93%。     

虎杖(Polygonum cuspidatum)茎尖愈伤组织诱导及高频植株再生

    以虎杖(Polygonum cuspidatum)茎尖为外植体进行离体再生研究,探讨苗龄、接种方式、不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖等对虎杖茎尖愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响.结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+蔗糖28 g·L-1+琼脂5.5g·L-1+2,4-D 1.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,诱导率为100%;3～7 d苗龄的虎杖茎尖愈伤组织诱导能力无显著差异,诱导率均达到95%以上,此后随着苗龄的增加,愈伤组织诱导能力快速下降,苗龄为12 d时愈伤组织诱导率只有55.6%;以正插(形态学下端插入培养基)方式接种的外植体愈伤组织诱导率显著大于反插(形态学上端插入培养基)和平放;不定芽分化最佳培养基为MS+AgNO3 4.0 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6.0 g·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+TDZ0.8 mg·L-1,分化率为83.9%,增殖系数为7.63;生根培养基选用1/2 MS+蔗糖26 g·L-1+琼脂6.5 g·L-1+活性碳3%+IBA 0.2 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1,生根率为89.6%.用聚氟乙烯(PVF)透气膜封口比用聚乙烯(POLY)菌膜生根率明显提高(达到100%),生根明显提前.     

结缕草高频再生体系的建立和优化

以结缕草叶片为外植体进行离体再生研究.结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是 MS+1.5 mg·L-1 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+0.5 mg·L-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+26 g·L-1 蔗糖+5.0 g·L-1 琼脂,诱导率为 65.36%,无性世代增殖倍数高达 9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化最佳培养基为 MS+3.0 mg·L-1 6-BA + 0.5 mg · L-1 萘乙酸(NAA) +1.5 mg·L-1 AgNO3+35 g·L-1 蔗糖+6.5 g·L-1 琼脂,分化率为 67.30%,增殖系数为 8.67;生根培养基选用 1/4 MS+0.2 mg·L-1 吲哚丁酸(IBA)+0.3 mg·L-1 NAA+28 g·L-1 蔗糖+4.5 g·L-1 琼脂,生根率为 90.00%.     

毛葡萄茎尖的离体培养与植株再生

为了建立毛葡萄茎尖离体培养及植株再生体系,给野生毛葡萄种质资源的超低温保存和无毒苗木培育提供参考,以花溪4和农院-11毛葡萄组培苗的茎尖为材料,研究植物生长调节剂及浓度配比对毛葡萄茎尖离体培养与植株再生的影响.结果表明:毛葡萄茎尖离体培养与增殖培养的适宜培养基为MS+ BA 1.5 mg/L+ IBA 0.02 mg/L,离体培养成活率达93.8％以上,增殖率和增殖系数分别为88.6％和5.8;茎尖生根培养的适宜培养基为1/2MS +IBA 0.05～0.15 mg/L +IAA0.2 mg/L,生根成苗率为100％,建立了毛葡萄茎尖组织培养和植株再生的技术体系.     

李茎尖离体培养与植株再生

以欧洲李(Prunus domestica cv.'Tardicots')和樱桃李(Prunus cerasifera)试管苗为材料,建立了茎尖离体培养与植株再生体系.结果表明:欧洲李最适宜的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.05 mg/L,0.1～0.2 mm的茎尖培养成苗率为64.16%,0.35～0.45 mm的茎尖培养成苗率为85.5%;樱桃李最适宜的培养基为LP+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.05 mg/L,0.1～0.2mm的茎尖培养成苗率为64.53%,0.35～0.45 mm的茎尖培养成苗率为84.7%.     

虎舌红叶片不定梢诱导研究

[目的]建立虎舌红的高频再生体系,为利用转基因技术改良其品质奠定基础。[方法]以虎舌红试管苗顶端叶片为试材进行组织培养和不定梢诱导试验。[结果]外植体在9种培养基上均能诱导出愈伤组织,4号培养基的不定芽再生率最高,为45．80％,植株生长健壮;其次是7号培养基,其不定芽再生率为39．76％。从整体上看,不定芽的再生率都不高,最高的也未超过50．00％。综合考虑愈伤组织诱导和不定芽再生,适合虎舌红叶片不定芽再生的培养基为：1／2 MS＋TDZ 2．0mg／L＋IAA0．2～0．4mg／L＋AgNO3 3．0～5．0mg／L。选健壮苗接种于1／2MS＋IBA 0．3mg／L＋NAA 0．5mg／L培养基上,20d后生根率可达90％,炼苗后再生植株的移栽成活率达80％以上。[结论]该研究成功建立了虎舌红叶片的离体再生体系。     

薰衣草茎段再生体系的建立

以薰衣草带芽茎段为外植体,探讨不同激素种类与水平等因素对其愈伤诱导、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质等。试验结果表明:不定芽启动培养以MS+BA1.0².0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.02.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.0².0mg/L+IBA0.25mg/L+GA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;不定根分化以White+IBA0.4mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L或White+NAA0.8mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5 g/L为宜。     

薰衣草茎段再生体系的建立

以薰衣草带芽茎段为外植体,探讨不同激素种类与水平等因素对其愈伤诱导、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质等。试验结果表明:不定芽启动培养以MS+BA1.0~2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.0~2.0mg/L+IBA0.25mg/L+GA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;不定根分化以White+IBA0.4mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L或White+NAA0.8mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5 g/L为宜。     

金鱼草茎尖培养与植株再生

为应用与推广金鱼草优良品种,以茎尖为外植体进行组织培养。将其组织放在附加BA5.0—10.0mg/l,NAA0.5mg/l,GA_3 1.0mg/l成分的MS培养基上,不定芽的增殖效果最好;在附加NAA0.5mg/l,IAA0.1—0.5mg/l成分的1/2MS培养基上生根效果最好;在MS+BA10mg/l+NAA0.5mg/l+蔗糖3％的培养基上生长缓慢,有利于室温条件下进行种质保存;蔗糖浓度由3％提高到5％,可以比较明显地延缓试管苗退化。     

大蒜茎尖的组织培养

以离体的大蒜茎尖为培养材料,对培养基、激素水平及培养方法进行实验,结果显示:以B5培养基为基本培养基,激素水平以6-BA1.0mg/L+2,4-D0.25mg/L对不定芽的诱导有明显效果,光照处理和温度处理对不定芽的诱导影响不明显。     

栽培虎舌红与野生品岩白菜素含量比较

[目的]测定驯化栽培的虎舌红与野生品中岩白菜素的含量。[方法]以野生的和驯化栽培的虎舌红及矮地茶为试材,采用高效液相色谱法测定驯化栽培的虎舌红与野生品中岩白菜素的含量,并将它们的岩白菜素的含量与矮地茶作了对比实验。色谱条件为:Hyper-sil C18ODS色谱柱,柱温25℃,波长275 nm,流动相:甲醇∶水(20∶80),流速1.0 ml/min。[结果]岩白菜素质量在0.204~1.224μg范围与峰面积值的线性关系良好(r=0.9998),平均加样回收率99.05%,RSD为0.4%(n=6);在该条件下,虎舌红岩白菜素含量在0.632%以上。[结论]在该实验条件下,驯化栽培的虎舌红中岩白菜素的含量与野生品几乎相同,野生虎舌红可以驯化栽培作药用。     

遮光对观赏植物虎舌红叶绿素荧光参数的影响

[目的]为了研究适宜虎舌红栽培的光照条件.[方法]采用不同的遮光处理,结合光合生理生态特性、叶绿素荧光参数,对其进行测定分析.[结果]除遮光90％处理外,虎舌红最大光化学效率（Fv/Fm）和实际光化学效率（FPSⅡ）均随着遮光程度的增加而增加,遮光处理提高了虎舌红的光化学效率;虎舌红光下最大荧光（Fm＇）随着遮光程度的增加而增加,虎舌红初始荧光（Fo）随遮光程度的增加而减小.虎舌红在不同遮光处理下30 d,都存在不同程度的光抑制现象.[结论]虎舌红的适宜光照条件为遮光75％.     

虎舌红花芽分化的研究

[目的]了解虎舌红花芽分化的过程。[方法]采用石蜡切片对其花芽进行形态学观察。[结果]虎舌红花芽分化从每年4月初开始,一直持续到5月底结束,属于当年一次分化型,分化阶段可分为5个时期,即花序分化期、花萼分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期、雌蕊分化期。[结论]虎舌红整个花芽分化过程正常。     

虎舌红组织培养中有效无菌材料的获得研究

[目的]探索获得虎舌红(Ardisia mamillata Hance)组织培养中有效无菌材料的途径和方法。[方法]以虎舌红为试材,研究了外植体母本的预处理和外植体的采集、灭菌、接种等处理方式对获得有效无菌材料的影响。[结果]2月将母株移入室内,进行预处理,3月中旬取当年生枝条和萌蘖条上的茎尖,用去污剂(肥皂水或洗衣粉水)浸泡并刷洗后,流水冲洗1～2 h,用75%乙醇表面消毒30 s,无菌水冲洗2～3次后放入0.1%升汞中灭菌(先用0.1%升汞消毒4 min,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞消毒4 min,无菌水冲洗5～8次)后进行有效接种,这种方法能有效降低污染率,提高成活率。[结论]该研究可为进一步研究和大规模生产虎舌红提供技术支持。     

虎舌红组织培养中有效无菌材料的获得研究(英文)

该研究以虎舌红为试材,探讨外植体母本的预处理、外植体的采集、灭菌、接种等处理方式对获得有效无菌材料的途径和方法的影响。结果表明:2月将母株移入室内,进行预处理,3月中旬取当年生枝条和萌蘖条上的茎尖,用去污剂(肥皂水或洗衣粉水)浸泡并刷洗后,流水冲洗1~2 h,用75%的酒精表面消毒30 s,无菌水冲洗2~3次后放入0.1%升汞中灭菌,先用升汞消毒4 min,无菌水冲洗3次,再用升汞消毒4 min,无菌水冲洗5~8次后进行有效接种,这种方法能有效降低污染率,提高成活率。     

虎舌红侧枝诱发培育技术

虎舌红幼苗一、二代侧枝打顶后喷施150 mg/L的植物生长调节剂6-BA溶液,可诱发养成较为圆满、紧凑的株型,提高了虎舌红的观赏性和商品性.经侧枝诱发的虎舌红在栽培管理上要注意保证良好的光照,做好水肥管理和病虫害防治.     

虎舌红组织培养及快速繁殖技术体系研究

[目的]寻找快速获得整齐一致的虎舌红苗木的方法,为虎舌红的产业化生产提供理论与技术支撑。[方法]以虎舌红当年生枝条和带芽茎段为外植体进行组织培养试验。[结果]诱导虎舌红芽分化的最优激素组合是TDZ0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋A刚q3．0mg／L,其平均诱导率达94．56％;其次是TDZ0．5mg／L＋NAA0．4mg/L＋AgNq5．0mg/L,其平均诱导率为89．18％;2号和3号培养基上的芽分化率最低,不到35％。诱导虎舌红芽增殖的最佳激素组合是6-BA1．5mg/L＋NAA0．5mg／L,其平均增殖系数为5．14。IBA对虎舌红生根的影响比NAA大,培养基1／2MS＋IBA0．3mg／L＋NAA0．5mg/L诱导虎舌红生根的效果较好,生根率达75．8％。虎舌红组培幼苗的移栽成活率达87．6％。[结论]诱导虎舌红芽分化的最佳培养基为1／2MS＋TDZ0．5mg／L＋NAA0．2mg/L＋AgNO3．0mg／L,最佳增殖培养基为1／2MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L,最佳生根培养基为1／2MS＋IBA0．3mg／L＋NAA0．5mg／L。     

魔芋茎尖脱毒试管苗培养基的筛选

进行了筛选适宜魔芋茎尖脱毒试管苗培养基的研究。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA30.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L(pH值6.0)的培养基配方茎尖膨大快、愈伤组织形成多、生长势强,是魔芋茎尖脱毒试管苗生产的适宜培养基。     

日本结缕草离体培养及高频率植株的再生

以日本结缕草(Zoysia japonica)叶片作为外植体进行离体再生研究。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基是MS 1.5mg.L-12,4-D 0.5mg.L-16-BA 26g.L-1蔗糖 5.0g.L-1琼脂,诱导率为65.36%,无性世代增殖倍数高达9.56;正交试验和方差分析筛选出不定芽分化的最佳培养基为MS 3.0mg.L-1BAP 0.5mg.L-1NAA 1.5mg.L-1AgNO3 35g.L-1蔗糖 6.5g.L-1琼脂,分化率为67.30%,增殖系数为8.67;生根培养基选用1/4MS 0.2mg.L-1IBA 0.3mg.L-1NAA 28g.L-1蔗糖 4.5g.L-1琼脂,生根率为89.60%。