转基因稻米饲料对昆明雄性小白鼠营养效应的影响

在室内用转基因水稻Bt汕优63及其亲本杂交水稻汕优63稻米制备的小鼠人工饲料,分别在喂饲昆明种雄性小白鼠不同时间后测定其取食量、排粪量和营养效应指标。结果表明,小鼠在累积喂饲两种稻米制备的饲料4 d时的平均相对生长率(MRGR)、相对生长率(RGR)和相对消耗率(RCR)均显著高于其他累积喂饲时间(P<0.001)。不同水稻稻米制成的饲料对小鼠取食量、排粪量、平均相对生长率(P<0.001)和近似消化率(P<0.05)有显著的影响;不同喂饲时间对小鼠取食量、排粪量及其他营养效应指标均有显著的影响(P<0.001);二者之间的交互作用对小鼠取食量、排粪量、相对消耗率(P<0.001)和净转化率、近似消化率(P<0.05)有显著的影响。小鼠的相对生长率、毛转化率在分别喂饲两种水稻稻米制备的饲料不同时间后无显著的差异,净转化率在分别喂饲两种水稻米制备的饲料后除第4天外其他时间无显著差异。上述结果显示,转基因稻米制备的饲料对小型哺乳动物(如鼠类)的主要营养效应指标无明显影响。     

不同Bt蛋白对捕食性天敌大草蛉的生态安全性评价

【目的】明确转基因棉花中表达Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab蛋白对我国Bt棉田中主要捕食性天敌大草蛉（Chrysopa pallens）的潜在影响。【方法】通过在大草蛉人工饲料中添加高剂量Bt蛋白的方法,评价Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab蛋白对大草蛉重要生命表参数（4龄幼虫体重、幼虫发育历期、化蛹率、蛹重、蛹发育历期、羽化率、成虫体重和产卵量）的影响,以不添加杀虫物质的大草蛉纯人工饲料作为阴性对照,以添加PA（砷酸二氢钾,KH₂AsO₄）的大草蛉人工饲料作为阳性对照;同时,利用双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）测定取食Bt蛋白处理饲料后,大草蛉幼虫、蛹以及成虫体内的Bt蛋白浓度;利用ELISA法和敏感昆虫生物测定法,检测新鲜饲料和在试验环境条件下暴露2 d的处理饲料中Bt蛋白的稳定性和生物活性;此外,利用酶活性测定的方法,比较取食空白对照饲料、Bt蛋白处理饲料或PA处理饲料后大草蛉体内主要消化酶（总蛋白酶、类胰蛋白酶、类凝乳蛋白酶和氨肽酶）、解毒酶（α-乙酸萘酯酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶）和保护酶（超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶）的活性。【结果】生命表评价结果表明,在大草蛉人工饲料中添加高浓度单独Bt蛋白或Bt蛋白混合物,对大草蛉4龄幼虫体重、幼虫发育历期、化蛹率、蛹重、蛹发育历期、羽化率、成虫体重和产卵量无显著性不利影响,但饲料中添加PA却能够使大草蛉幼虫和蛹发育历期极显著延长,4龄幼虫体重、化蛹率、蛹重、羽化率、成虫体重和产卵量极显著降低;大草蛉体内Bt蛋白浓度测定结果显示,大草蛉取食Bt蛋白处理饲料后,其幼虫、蛹及成虫体内均含有一定量的Bt蛋白;ELISA和敏感昆虫生物测定结果表明,新鲜准备和在试验环境条件下暴露2 d的Bt蛋白处理饲料,均含有高剂量且具有生物活性的Bt蛋白,因此,大草蛉在整个生物测定过程中接触到的均为高浓度的、具有生物活性的Bt蛋白;此外,取食Bt蛋白处理饲料,对大草蛉幼虫和成虫体内主要消化酶、解毒酶和保护酶活性无显著性影响,但取食PA处理饲料能使大草蛉幼虫和成虫体内氨肽酶活性极显著降低,其他所测消化酶、解毒酶和保护酶活性显著升高。【结论】大草蛉对3种供试Bt蛋白（Cry1Ac、Cry1F和Cry2Ab）不敏感,取食这3种Bt蛋白对大草蛉生长发育及其体内主要消化酶、解毒酶和保护酶活性没有显著不良影响,本研究所建立的生物评价体系还可用于评价其他新型转基因抗虫植物中表达杀虫蛋白对大草蛉的生态安全性。     

基于三级营养传递Cry1Ac蛋白对普通草蛉酶活力及生长发育的影响

【目的】研究Cry1Ac蛋白通过棉花、棉蚜的传递对普通草蛉酶活性及生长发育的影响,为转Bt基因棉花的安全性评价提供参考和依据。【方法】采用ELISA方法,检测Bt棉、取食Bt棉的棉蚜和捕食棉蚜普通草蛉体内Bt杀虫蛋白含量;通过酶活力测定普通草蛉幼虫取食Bt棉花上棉蚜后其体内的类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和氨肽酶的酶活性;室内生物测定普通草蛉取食Bt棉花上的棉蚜后对其生长发育的影响。【结果】Cry1Ac杀虫蛋白在棉叶中的表达量为788.76 ng/g,远高于棉蚜体内的2.35 ng/g,取食Bt棉花上棉蚜的普通草蛉3龄幼虫体内并未检测到Bt杀虫蛋白;通过三级营养传递的Cry1Ac蛋白对普通草蛉酶活力影响甚微。【结论】棉蚜取食Bt棉花后体内仅能累计微量Cry1Ac蛋白;普通草蛉取食Bt棉花上的棉蚜后,对其体内三种酶活性和生长发育均没有负面影响。     

用过氧化物酶鉴定杂交水稻汕优63种子样品纯度

提取水稻幼苗体内过氧化物酶，采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳，分析杂交水稻汕优６３种子样品纯度，并与田间种植鉴定结果比较。结果表明，过氧化物酶能准确快速地鉴定杂交水稻汕优６３种子样品纯度且与田间种植鉴定结果趋向吻合。该项技术在种子检验上有较高的实际应用价值。     

西花蓟马取食二斑叶螨危害的番茄植株后体内酶活性的变化

为探讨番茄植株受二斑叶螨危害后产生的诱导防御反应对西花蓟马的作用,研究了不同密度(5头/片和15头/片)二斑叶螨危害不同时间(3 d、5 d和7 d)的番茄植株对后取食的西花蓟马体内酶活性的影响。结果表明,西花蓟马取食二斑叶螨危害的番茄叶片后,其体内保护酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)]和解毒酶[羧酸酯酶(Car E)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)]的活性与取食健康番茄叶片相比有明显的差异。西花蓟马体内SOD活性不论其取食二斑叶螨何种危害密度和时间的番茄叶片均受到明显抑制,在取食二斑叶螨5头/片和15头/片3个危害时间的番茄叶片后,较取食健康番茄叶片分别下降了15.8%、27.7%、14.4%和26.4%、8.8%、17.3%。西花蓟马体内POD、CAT、Car E、GSTs和MFO活性均在其取食二斑叶螨5头/片危害3 d的番茄叶片时最高,分别较取食健康番茄叶片上升了126.4%、17.7%、7.2%、6.7%和17.1%。5种酶活性均随密度的增加和危害时间的延长表现下降趋势,但不同酶活性的变化过程不同。以上结果说明,二斑叶螨取食诱导番茄植株产生了一定的防御反应,并引起西花蓟马体内保护酶和解毒酶活性的明显变化。     

杀虫剂处理对水稻负泥虫体内解毒酶的影响

[目的]研究不同杀虫剂对水稻负泥虫（Oulema oryzae）体内解毒酶的影响。[方法]以水稻负泥虫为研究对象,分析幼虫在高效氯氰菊酯、阿维菌素和吡虫啉3种杀虫剂处理1、4、9和15d后,幼虫体内羧酸酯酶及谷胱甘肽转移酶活性变化。[结果]随着取食时间的延长,3种药剂处理的幼虫体内羧酸酯酶活性均较对照增高,且差异明显;而3种药剂处理的谷胱甘肽转移酶活性均低于对照,但差异不明显。[结论]解毒酶的变化在害虫抵抗杀虫剂处理过程中起到指示作用,该研究可为水稻负泥虫抗药性研究奠定基础。     

转双抗三倍体毛白杨对舞毒蛾幼虫中肠解毒酶的影响

[目的]为转基因植物的合理利用提供理论依据。[方法]以转Bt基因和慈姑蛋白酶抑制剂基因三倍体毛白杨叶片喂4～5龄舞毒蛾幼虫,对其中肠几种重要解毒酶的活性进行了测定。[结果]幼虫中肠酯酶的比活力变化是先升高后降低,24 h后达到高峰,而在48 h后,比活力明显下降;谷胱甘肽-S-转移酶的比活力是一直在升高。取食抗虫杨Pb1、Pb33和Pb47叶片48 h后的舞毒蛾幼虫中肠酯酶的比活力分别为取食CK幼虫酯酶比活力的62.9%、70.7%和74.5%;24 h后的幼虫中肠谷胱甘肽-S-转移酶的比活力分别比取食CK幼虫谷胱甘肽-S-转移酶比活力下降了25.7%、27.7%和17.9%。[结论]导致幼虫中肠解毒酶活性的改变可能是转基因叶片毒杀害虫的作用机制之一。     

取食不同寄主植物对草地贪夜蛾幼虫体内3类酶活性的影响

[目的]明确取食不同寄主植物对草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)幼虫体内消化酶、保护酶和解毒酶活性的影响,为进一步探究草地贪夜蛾的寄主选择及适应机制提供理论依据.[方法]在室内用玉米、小麦、马铃薯和烟草4种寄主植物叶片饲喂草地贪夜蛾初孵幼虫至5龄,测定取食不同寄主植物后草地贪夜蛾体内消化酶(脂肪酶、胃蛋白酶和α-淀粉酶)、保护酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)]和解毒酶[谷胱甘肽S-转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)、多功能氧化酶(MFO)和细胞色素P450(CYP450)]的活性变化,并比较4种寄主植物叶片次生代谢物(总酚、单宁和类黄酮)及营养物质(可溶性糖和可溶性蛋白质)含量,分析草地贪夜蛾幼虫体内酶活变化与寄主植物次生代谢物及营养物质含量的相关性.[结果]取食马铃薯叶片的草地贪夜蛾幼虫体内脂肪酶和胃蛋白酶活性均高于或显著高于取食其余3种寄主植物叶片的草地贪夜蛾幼虫(P<0.05,下同),而取食烟草叶片的草地贪夜蛾幼虫体内α-淀粉酶活性(0.48±0.08 U/mg)最高,显著高于取食其他3种寄主植物叶片的草地贪夜蛾幼虫.取食马铃薯叶片的草地贪夜蛾幼虫体内SOD和POD活性均显著高于取食其他3种寄主植物叶片的草地贪夜蛾幼虫,而取食烟草叶片的草地贪夜蛾幼虫体内CAT活性最高(225.54±51.56 U/mg),是取食玉米叶片草地贪夜蛾幼虫的2.71倍.取食马铃薯和烟草叶片的草地贪夜蛾幼虫体内GST、CYP450和MFO活性均高于取食玉米和小麦叶片的草地贪夜蛾幼虫,其中取食马铃薯和烟草叶片的草地贪夜蛾幼虫体内GST活性(100.50±4.71和98.69±6.21 U/mg)显著高于取食玉米和小麦叶片的草地贪夜蛾幼虫GST活性(54.85±1.94和70.62±4.04 U/mg);而CarE活性在取食烟草叶片的草地贪夜蛾幼虫体内最高,为184.79±9.05 U/g.4种寄主植物叶片中总酚、单宁和类黄酮含量均表现为马铃薯>玉米>小麦>烟草,而可溶性糖含量在小麦叶片最高(18.65±1.08 mg/g),可溶性蛋白含量以马铃薯叶片最高(306.30±29.07 mg/g),烟草叶片的可溶性糖和可溶性蛋白含量均最低.皮尔森线性相关系数分析结果表明,取食不同寄主植物叶片的草地贪夜蛾幼虫体内部分消化酶和保护酶活性与寄主植物营养物质和次生代谢物含量显著相关.[结论]草地贪夜蛾在不同寄主植物上表现出较强的生理可塑性,其幼虫可通过调节体内消化酶活性,最大限度地利用营养物质含量不同的寄主植物,并通过调节保护酶和解毒酶活性增强对寄主植物次生代谢物或有毒物质的适应性,从而实现其寄主谱的扩张.     

啶虫脒和海岛素（φ=5%氨基寡糖素）对棉蚜应激防御酶活性的影响

为探讨棉蚜取食喷施啶虫脒和海岛素的棉花后对体内保护酶和解毒酶活性的影响,以温室内饲养的1~2龄棉蚜为研究对象,测定用啶虫脒和海岛素喷施棉花后棉蚜体内保护酶和解毒酶的活性。结果表明,棉蚜取食棉花后,啶虫脒和海岛素处理对初期棉蚜体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性均表现为抑制作用;96h内,啶虫脒和海岛素处理对棉蚜体内的羧酸酯酶(CarE)活性表现为先抑制再激活后抑制,对谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和乙酰胆碱酯酶(AchE)均有激活作用。说明:用啶虫脒和海岛素喷施棉花后,可扰乱棉蚜的保护和解毒系统,起到较好的防治效果。     

云南省不同烟区烟田烟蚜解毒酶和保护酶的活性分析

[目的]明确云南省不同烟区烟蚜种群体内主要解毒酶和保护酶的活性及其差异,为合理选用杀虫剂和制定烟蚜防治策略提供理论依据.[方法]从云南省10个州(市)17个县的不同烤烟种植区烟株上采集烟蚜地理种群,采用试剂盒测定不同地理种群烟蚜体内3种解毒酶[乙酰胆碱酯酶(AchE)、羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽转移酶(GSTs)]和3种保护酶[过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)]活性.[结果]云南省不同地理种群烟蚜体内3种解毒酶和3种保护酶活性均存在明显差异.17个采样点烟蚜体内AchE、CarE和GSTs活性分别为0.017~0.513、0.256~5.062和10.350~204.066 U/mg,其中文山小嫁依、曲靖陆良和大理南涧烟蚜种群体内3种解毒酶活性较高,临沧博尚和临沧云县烟区烟蚜种群较低;AchE和CarE相对酶活性均较高的样点为大理南涧、曲靖陆良和文山小嫁依,相对酶活性分别为62.57%和100.00%、68.41%和58.34%、100.00%和69.95%.17个采样点烟蚜种群体内POD、SOD和CAT活性分别为0.830~54.839、7.139~456.522和0.076~2.024 U/mg,其中红河建水、保山丙麻和大理宾川烟蚜种群体内3种保护酶活性较高,临沧博尚和大理洱源烟蚜种群较低;红河建水和保山丙麻烟蚜种群体内的POD、SOD和CAT相对酶活性较高,分别为100.00%、100.00%、88.36%和80.58%、65.98%、56.23%.[结论]云南省不同烟区烟蚜种群体内主要解毒酶和保护酶具有明显的地理差异,使用化学农药防治烟蚜时应根据不同地理种群的抗药性选择不同的农药,以提高防治效果.     

木质素降解酶的研究进展

从木质素降解酶的组成、作用机理、分子生物学研究、营养调控研究4个方面对木质素降解酶研究新进展进行了综述,并对木质素降解酶在工农业固体废弃物处理方面的应用做了展望。     

外源酶对异育银鲫内源酶活性和肠道食糜排空速度的影响

以均重(60.0±2.3)g的异育银鲫300尾为试材,研究了在基础日粮中添加外源酶制剂250 mg/kg、500 mg/kg、750 mg/kg、1 000 mg/kg后,外源酶对异育银鲫内源酶活性、肠道食糜排空速度的影响。试验结果表明:与对照相比,在日粮中添加一定量的外源酶后,异育银鲫肝胰脏蛋白酶活性显著降低;但中肠食糜和组织中蛋白酶、淀粉酶活性和肝胰脏淀粉酶活性显著提高,异育银鲫对食糜的排空速度也加快。     

纤维素酶在青贮饲料中的应用

青贮是一种传统的青绿饲料的保存方法,在青贮中添加纤维素酶可以增强青贮的效果,促进植物细胞壁的酶解,提高青贮料的消化率。近年来,纤维素酶作为青贮添加剂在国内外得到广泛的研究和关注。尽管研究结果不完全一致,但随着酶工程和酶技术的发展,纤维素酶作为青贮添加剂的应用前景必将十分广泛。     

中药黄连对鲢鱼消化酶和去毒酶活力及抗MC-LR作用的影响

[目的]研究中药黄连对鲢鱼消化酶和去毒酶活力以及铜绿微囊液MC-LR含量的影响。[方法]将黄连水提液作为饲料添加剂喂喂鲢鱼,检测鲢鱼的肠道消化酶(脂肪酶、胃蛋白酶和淀粉酶)和肝脏去毒酶(谷胱甘肽S-转移酶s GST及其底物谷胱甘肽GSH)活力以及铜绿微囊藻受到抑制后藻毒素MC-LR含量的变化。[结果]在普通水体中饲养,喂药组和对照组各酶活力没有显著差异(P0.05);放入铜绿微囊藻藻液饲养24 h后,脂肪酶活力升高,淀粉酶活力降低,差异极显著(P0.01),但胃蛋白酶活力差异不显著(P0.05)。喂药组与对照组肠道消化酶活力差异不显著(P0.05);喂药组鲢鱼肝脏GSH和s GST活力升高(P0.01),且高于对照组(P0.01)。120 h,黄连水提液处理组铜绿微囊藻细胞内MC-LR含量降低了82.4%,空白组的铜绿微囊藻细胞内MC-LR含量增加了39.5%。[结论]在饲料中添加黄连鲢鱼在铜绿微囊藻环境下,黄连可诱导显著增强鲢鱼肝脏去毒酶活力,在富含铜绿微囊藻的水体中饲料中添加黄连鲢鱼的生存能力有所提高。     

木质素降解酶系研究新进展

从木质素降解酶系的组成、作用机理、生理学研究、分子生物学研究四个方面对木质素降解酶系研究新进展进行了综述,并对木质素降解酶系在农业固体废弃物降解中的应用做了展望。     

除草剂氯嘧磺隆对土壤酶活性的影响

通过实验室培养试验,研究了5、10、20、100μg.kg-1的氯嘧磺隆对土壤过氧化物酶、多酚氧化酶、脲酶、蛋白酶活性的影响。结果表明,氯嘧磺隆对土壤酶活性的影响有显著差异。氯嘧磺隆对过氧化物酶有激活作用,并且浓度越高,激活作用越大。氯嘧磺隆在处理初期抑制多酚氧化酶活性,随后抑制作用逐渐减小,在第30 d时稳定在与对照接近水平,然后20、100μg.kg-1高浓度的处理开始产生激活作用。氯嘧磺隆对脲酶和蛋白酶的影响类似,5、10μg.kg-1低浓度氯嘧磺隆对脲酶和蛋白酶有轻微的激活作用,而20、100μg.kg-1高浓度对脲酶和蛋白酶有抑制作用。低浓度(田间低用量和田间正常用量)氯嘧磺隆对土壤酶的影响小,在试验后期能恢复到对照水平。     

简介土壤中应用的几种微生物酶

简介土壤中应用的几种微生物酶的特点.