防风愈伤组织诱导及植株再生体系研究

以防风为材料,研究不同外植体、激素组合、培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,茎段是防风组织培养较为理想的外植体材料。诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA,最高出愈率为96.7%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高诱导率为75%;诱导根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,生根率达65%;组培苗的移栽成活率达80%。     

酸浆的愈伤组织诱导和植株再生研究

[目的]探讨酸浆组织培养再生植株的最优条件。[方法]以酸浆为材料,以MS培养基为基本培养基,在此基础上添加不同浓度的6-BA和NAA,制成分化培养基,观察不同浓度植物激素对酸浆愈伤组织分化的影响。[结果]当6-BA为低浓度或高浓度时,不定芽总数/材料数和分化率均随NAA浓度的提高而下降;仅当6-BA浓度为1.0 mg/L时,NAA浓度为0.2 mg/L时,不定芽总数/材料数和分化率达到峰值;当NAA浓度一定时,不定芽总数/材料数均在6-BA浓度适中时出现该组的峰值。而分化率呈现不规律变化。[结论]当激素浓度为:1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA时,酸浆不定芽总数材料数比例和分化率最高。     

安祖花愈伤组织诱导和植株再生的研究

为建立适合安祖花遗传转化的受体体系,分别选取安祖花组培苗带叶柄的叶片和带叶柄的茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导和植株再生试验。结果表明:以带叶柄的茎段为外植体对愈伤诱导效果好于带叶柄的叶片。使用带叶柄茎段为外植体,以1/2MS BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L为基本培养基进行愈伤组织诱导和继代培养,愈伤组织诱导率最高为89.65%;使用3%蔗糖作为碳源的1/2MS添加0.1 mg/L KT能显著提高诱导率;添加NAA 0.5 mg/L或2,4-D 0.5 mg/L有助于生根。     

红花槐愈伤组织诱导及植株再生的研究

以红花槐当年生幼嫩茎段为试验材料,研究了不同生长调节剂组合对红花槐愈伤组织诱导及分化的影响.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+2.0mg/L NAA+1.0mg/L6-BA;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+3.0mg/L6-BA;诱导生根的最佳培养基组合为MS+ 1.0 mg/L IBA.     

美洲板栗愈伤组织诱导和植株再生的研究

在培养基中添加不同植物生长调节剂(生长素和细胞机动素),对美洲板粟愈伤组织的诱导以及植株再生进行了研究.将试管繁殖的小植株切为长0.5 cm的小段作为外植体材料,以木本植物培养基加上3%的蔗糖和0.7%的琼脂作为基本培养基,再加上不同浓度的生长素或细胞机动素作为试验处理.生长素包括IBA,NAA,2,4-D和2,4,5-T;细胞机动素包括kinetin,CPPU,thidiazuron(TDZ)和zeatin.结果表明:外植体的植株再生和愈伤组织诱导百分率以及再生植株的形态发生以及愈伤组织的诱导量在不同的植物生长调节剂处理间和同一植物生长调节剂不同浓度的处理间都存在着显著的差异.促使外植体植株再生百分率最高的细胞机动素为TDZ,其次为CPPU,kinitin和zeatin;促使外植体愈伤组织诱导百分率最好的生长素为2,4,5-T,其次为2,4-D,IBA和NAA.     

半夏愈伤组织诱导和分化再生植株的研究

研究半夏外植体愈伤组织诱导、放置方式、外植体的苗龄对分化再生植株的影响,结果表明:块茎的愈伤组织诱导效果最佳,叶片次之,叶柄最差。当MS+6-BA2mg/L+2,4-D2mg/L激素组配时,愈伤组织分化率达100%。外植体的放置方式对分化出苗有很大影响,块茎垂直放置出芽率最高,而叶柄和叶片平放于培养基效果较好。无菌苗苗龄对分化率有较大的影响,最适无菌苗苗龄为10～25d。当6-BA为3mg/L时芽增殖倍数达4倍左右,而当6-BA0.2mg/L+2,4-D0.2mg/L组配时,生根效果最好。     

罗勒的愈伤组织诱导及植株再生

研究了罗勒愈伤组织诱导及植株再生方法,结果表明:诱导罗勒愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA 1 mg/L+NAA 1.0 mg/L;丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,生根培养基为MS+6-BA 1 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

矮牵牛梅林愈伤组织诱导与植株再生

为建立矮牵牛梅林的高频再生体系,以叶器官为材料,研究不同生长调节剂配比、叶片不同部位和不同形态愈伤对不定芽再生的影响.结果表明:6 BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛梅林不定芽再生率,其中NAA 0.3 mg·L-1极显著促进了矮牵牛梅林不定芽的再生,6 BA和NAA浓度超过1.0 mg·L-1和0.5 mg·L-1...     

野生型拟南芥叶片愈伤组织诱导的研究

[目的]研究野生型拟南芥叶片愈伤组织的诱导。[方法]以野生型拟南芥叶片为外植体,通过将其切段后接种在添加有不同浓度6-BA和NAA的MS培养基上,研究了拟南芥愈伤组织的诱导和再生植株。[结果]6-BA对于愈伤组织诱导不可缺少,但其浓度太高易产生玻璃化;NAA单独使用利于生根,配合6-BA使用利于分化芽;获得最适愈伤组织诱导培养基为MS＋0.50mg/L6-BA＋0.10mg/LNAA,愈伤组织诱导率可达100%。[结论]为进一步开展拟南芥的遗传转化或细胞培养奠定了基础。     

百合愈伤组织的诱导及植株再生

试验以东方百合(Oriental hybrids)"bernini"的花柱、花丝、花瓣为外植体,利用组织培养技术,探讨不同外植体愈伤组织的诱导、胚状体发生及植株的再生状况。结果表明,三种外植体均能诱导愈伤组织,花柱和花瓣诱导的愈伤组织为绿色致密的非胚性组织,而花丝诱导的愈伤组织为黄色疏松的胚性组织,将胚性愈伤组织继续培养一个月可发生胚状体。花丝愈伤组织诱导率、分化率以及分化速度均高于花柱和花瓣。诱导愈伤组织的最佳培养基为改良MS(盐酸硫胺素的浓度为4mg·L~(-1))+2,4-D2mg·L~(-1)+水解乳蛋白300mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+KT0.1mg·L~(-1)+BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1);最佳生根培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1)。     

锥花福禄考叶片愈伤组织诱导与植株再生

以锥花福禄考的叶片为外植体,进行愈伤组织诱导、不定芽分化增殖及生根培养,确定了锥花福禄考快繁体系的最适培养条件:(1)初代培养基:MS BA0．4mg／L NAA1．5mg／L;(2)丛生芽增殖培养基:MS 6-BA1．0mg／L IBA0．1mg／L GA31．5mg／L;(3)生根培养基:1／2MS NAA0.1mg／L。     

烟草愈伤组织对苯磺隆的抗性诱导及抗性植株筛选

 【目的】以烟草（NC-82）为试验对象，运用组织培养方法，通过对苯磺隆对烟草愈伤组织抗性发展的影响、对愈伤组织生长的影响、对愈伤组织分化率的影响、对愈伤组织乙酰乳酸合成酶活性的影响和抗性筛选再生烟草苗抗性潜势进行较系统的研究，以期对ALS抑制剂类除草剂的抗性研究和科学合理使用以延缓抗药性的发生，以及对作物的抗性育种提供一定的理论依据。【方法】将烟草诱导产生的胚性愈伤组织在含有不同剂量磺酰脲类除草剂苯磺隆的MS培养基上继代培养进行抗性诱导，并对愈伤组织的生长情况及其ALS对苯磺隆敏感性进行跟踪检测；对抗性筛选再生烟草苗进行抗性检测。【结果】随着培养代数的增加，愈伤组织对苯磺隆的抗药性逐渐增强，经过12代的培养，0、2、3、5 a.i.mg•L-14个剂量下的抗性指数分别达到1.4、3.6、11.6、18.5，LC50分别为4.2、10.8、34.9、55.7 a.i.mg•L-1，组织内乙酰乳酸合成酶（ALS）对苯磺隆的敏感性也逐渐降低。高剂量苯磺隆30a.i.g•ha-1茎叶处理抗性再生烟苗，4个剂量下的成活率分别为5.8％、27.3％、43.8％和63.3％。在培养过程中烟草愈伤组织的分化率逐渐降低，并对苯磺隆产生轻微抗药性，但与苯磺隆的诱导无密切关系。【结论】烟草愈伤组织对磺酰脲类除草剂产生抗药性的速率很快，且选择压越高，抗药性发展越快。苯磺隆显著抑制烟草愈伤组织的生长，在形态上也发生变化，较对照色泽略深，质地紧密，组织内乙酰乳酸合成酶（ALS）对苯磺隆的敏感性也逐渐降低；烟草愈伤组织苯磺隆产生的诱导抗性可以在烟草整株水平上表达，诱导抗性随着诱导剂量的增加而增强。     

低温及碳源对拟南芥菜胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

以低温处理1～4d的野生型拟南芥菜种子胚为外植体，分别培养在附加激素为2，4－D（0．05mg／L），BA（0．05mg／L）的B5和MS两种基础培养基上，每种培养基的碳源分别为蔗糖和葡萄糖．结果发现均有愈伤组织的形成，其中B5＋蔗糖培养基有较高的诱导频率；当蔗糖为碳源时，胚外植体先萌发出子叶，然后在下胚轴长出愈伤组织，而改用葡萄糖时，整个胚外植体都形成愈伤组织；将诱导出的愈伤组织转移到B5、MS和1／2MS3种附加2，4－D（0．05mg／L）和BA（0．5mg／L）培养基上进行植株的再生，发现在MS和1／2MS两种培养基上有芽的生成．再将生芽组织转接到1／2MS生根培养基上，均可诱导生根．剥去种皮与低温处理种子有相同的效应，都能打破种子的休眠，这表明低温打破种子休眠的效应部位不是在胚．     

金丝小枣愈伤组织诱导植株再生及染色体变异的研究

以金丝小枣枣头为外植体,用改良MS培养基为基本培养基,附加不同浓度的2,4—D、IBA诱导愈伤组织.IBA有利于致密的Ⅰ型愈伤组织形成,2,4—D易诱导出疏松的Ⅱ型愈伤组织,黑暗条件下诱导愈伤组织比光照条件下更有效.愈伤组织继代繁殖时,2,4—D的浓度影响了愈伤组织类型和染色体数目变异.两种愈伤组织再分化能力不同,Ⅰ型有6—BA分化出不定芽,而Ⅱ型未分化出芽.在IBAO.2 6—BAI时诱导出大量胚状体.选择了30个芽丛再生植株无性系进行继代繁殖,其中有1个四倍体,其余为二倍体.0.3ppmIBA最有利于生根.     

高山红景天叶片愈伤组织诱导与植株再生

以高山红景天叶片作为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖、生根的主要因素。结果表明:高山红景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 2mg/L NAA0.5mg/L,诱导率达88.33%;高山红景天叶片切块经诱导可产生3种色泽的愈伤组织,其中只有绿色愈伤组织诱芽容易,绿色愈伤组织在附加1mg/L6-BA 0.1mg/LNAA的MS培养基中有利于芽的分化和增殖,培养7周左右,平均每个外植体分化形成的再生小植株数达到21.33个;增殖苗转入1/2MS培养基中生根率高达100%。     

拟南芥Atsuc2突变体愈伤组织的诱导及再生体系的建立

拟南芥蔗糖转运蛋白基因AtSUC2是蔗糖转运的主效基因,其缺失突变体在有糖培养基上可以生长和开花,但得不到有活力的种子,因此难以获得足够的实验材料对AtSUC2的功能进行深入研究。针对这一问题,以拟南芥Atsuc2纯合突变体的不同外植体为材料进行愈伤组织诱导及再生体系建立的研究。结果表明:诱导愈伤组织的最佳外植体为具柄叶切片,其在B5+3.0 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT的培养基上愈伤组织出现的时间最早,质量最好;产生的愈伤组织在配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA的生芽培养基上被诱导生芽,分化率可以达到86.7%;在配方为MS+1.0 mg/L IBA+0.1 mg/L 6-BA的生根培养基上丛生芽生根率为85.3%。     

石竹愈伤组织诱导及植株再生

通过诱导愈伤组织再分化和直接诱导不定芽这两种途径获得了石竹的再生植株，比较了不同植物生长调节剂配比在离体培养中的效应。认为6-BA是诱导长期培养的愈伤组织再分化最有效的外源激素，适宜的质量浓度范围在0.5-2.0mg/L之间，当6-BA为1.0mg/L，NAA为0.3mg/L时，愈伤组织不定芽分化频率最高，小苗生长状况也最好；将6-BA与NAA，IBA，Ad等生长调节剂混合使用可提高诱导效果，增殖继代培养基中6-BA的质量浓度在0.1-0.3mg/L之间为宜，浓度过大，虽然芽增殖数量增多，但苗的畸形化和愈伤化现象严重。