郁金香种球腐烂病的病原鉴定

1999—2001年连续3年从杭州市太子湾公园种植的腐烂郁金香种球上分离到木霉菌株(Trichoderma sp.)，经柯赫氏法则验证。确定为引起郁金香种球腐烂的病原菌。经形态特征观察。鉴定为Trichoderma virens。其菌丝生长的最适温度为25—30℃，最适pH值为5．0～6．0。适在PDA培养基上生长。农药咪鲜胺。绿亨2号，多菌灵和福星对该病原菌有较好的抑制作用。     

郁金香种球腐烂的真菌病原鉴定

经柯赫氏法则对引起郁金香种球腐烂的主要真菌病原物进行鉴定得出,在天津地区引起郁金香种球腐烂的主要真菌性病原物有;腐霉属(Pythium)、根霉属(Rhizopus)、木霉属(Trichoderma)、丛梗孢属(Momilia)、葡萄孢属(Botrytis)、镰孢霉属(Fusarium)、座坚壳属(Rosellinia)、链格孢属(Siodesnium)和青霉属(Penicillium)等9个属.其中腐霉属分离率为30.95%,根毒属分离率为7.14%,木霉属分离率为4.76%,丛梗孢属分离率为14.28%,葡萄孢属分离率为4.76%,镰孢霉属分离率为11.90%,座坚壳属分离率为7.14%,链格孢属分离率为7.14%,青霉属分离率为11.90%.     

郁金香鳞茎腐烂病的病原鉴定

郁金香属百合科草本。是当今风行全球的一代名花 ,是非常高雅的盆栽和插花材料。荷兰人因栽种此花而致富 ,成为首屈一指的“郁金香大国”。因郁金香很难留种 ,我国大多靠从国外进口 ,近年来郁金香种植面积逐年增加 ,但种球鳞茎腐烂相当严重 ,影响郁金香品质和观赏价值 ,造成巨大的经济损失。近年来我们对云南省和江苏南京郁金香种植基地进行调查 ,对引起鳞茎腐烂的病原菌作了分离、鉴定 ,为防治该病提供理论依据。1　材料与方法1 1　材料郁金香鳞茎采自江苏省南京和云南省呈贡县种球种植基地。1 2　病原菌分离、纯化取湿腐症状的郁金香鳞…     

郁金香种球枯萎病病原鉴定

郁金香种球在贮藏期枯萎病发病率较高,使大量种球品质退化或失去生产价值。病害症状初期为紫红色的小斑点,后扩展成不规则黄色至浅褐色病斑,严重时种球干枯成褐色。对患病种球的病原菌进行分离及形态学和分子生物学鉴定。结果表明:PDA培养基25℃条件下菌落初为白色,后逐渐成为紫红色;菌丝及分生孢子梗无色;大型分生孢子偶见,无色,细长镰刀形,具3~5个分隔;小型分生孢子多数,无色,短棍棒形或椭圆形。以上特征结合DNA的ITS片段序列比对结果说明,引起该病害的主要病原为Fusarium prolif-eratum。     

瓠瓜栽培品种细菌性果斑病的抗性鉴定

通过喷雾接种法对50份瓠瓜栽培品种进行苗期抗病性鉴定,明确不同瓠瓜品种对细菌性果斑病的抗病性差异,为田间推广和抗病品种选育提供技术支撑。结果显示,在供试的50份瓠瓜品种中,秀丽蒲瓜、济公葫芦等21份品种对细菌性果斑病表现为中抗,绿川、青春等24份品种表现为中感,南秀公主、早生短棒瓠瓜等5份品种表现为感病,没有发现高抗和免疫的瓠瓜品种。     

彩色马蹄莲栽培品种对软腐病的抗性鉴定

为筛选抗软腐病品种,调整云南彩色马蹄莲品种结构,对云南不同地区收集到的4个软腐病病原菌进行致病力测定,筛选出强致病力菌株p3,并通过形态学和16S r DNA分子鉴定为胡萝卜果胶软腐杆菌(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)。将p3菌株接种于具4~5叶片的不同品种彩色马蹄莲上,记录病情指数。结果表明:测试的彩色马蹄莲品种均为感病品种,但不同品种间抗性存在差异,其中栽培品种ym063、ym044、ym068的抗性较好,其次为ym048,ym008、ym011。     

两个郁金香品种不同等级种球繁殖研究

通过对两个郁金香品种Judith Leyster(凯旋型)和Big Smile(达尔文杂种型)分级栽植后花径、种球繁殖系数等几项指标的调查统计分析,结果表明,2个品种质量增幅随种球等级增大呈先上升后下降趋势,Judith Leyster繁殖系数大,种球直径大于3.272 cm可以开花,在2.508 cm以上繁殖后可获得1级种球;BigSmile产量高,种球直径大于2.5 cm可以开花,在2.216 cm以上种植后可获得1级种球,2个品种1级、2级和3级种球可作为繁殖商品球的材料,4级和5级种球可作为大量繁殖子球用。     

13个梨品种对黑星病的抗性鉴定

通过田间自然鉴定和人工接种鉴定方法,研究了13个梨品种的叶片和果实对黑星病的抗性。结果表明,不同梨品种对黑星病的抗性存在差异。在田间自然鉴定中,新丰梨和巴梨的叶片和果实均表现为免疫;喜水、丰水、早酥、晚三吉和茌梨等5个品种的果实表现为免疫;喜水、丰水、早酥和晚三吉等4个品种的叶片表现为高抗;茌梨的叶片表现为中抗;黄香、黄冠和县梨等3个品种的果实和叶片均表现为抗;砀山酥梨、长把梨、鸭梨等3个品种的果实和叶片均表现为感病。在人工涂抹、喷雾接种鉴定中,新丰梨和巴梨的叶片和果实均表现为免疫;喜水、丰水、早酥和晚三吉和茌梨等5个品种的果实表现为免疫;喜水、丰水、早酥和晚三吉等4个品种的叶片表现为中抗;茌梨的叶片表现为感病;黄香、黄冠和县梨等3个品种的果实和叶片均表现为感病;砀山酥梨、长把梨和鸭梨等3个品种的果实和叶片均表现为高感。田间自然鉴定和人工接种鉴定的结果虽有一定差异,但总体趋势基本一致。     

郁金香基腐病抗性QTL分析

郁金香基腐病由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.tulipae)引起,严重影响郁金香种球和切花生产。农艺防治措施如避免机械损伤、发现病株及时去除并销毁、实行轮作等,防治效果较差、效率较低,因而生产上主要依靠大量使用化学药剂进行控制。长期连续的使用化学药剂对生态环境造成严重威胁,并极有可能使病原菌对杀菌剂产生抗性。因此,选育具有抗基腐病的郁金香品种成为近年来的主要育种目标。郁金香的生长周期长达4~5年,采用常规杂交育种选育新品种的过程非常缓慢。通过分子标记辅助选择,可显著加速郁金香的育种过程。但是由于郁金香的基因组太大(1C≈30GB),已发表的分子标记数目非常有限,尚无可参照的遗传图谱,阻碍了分子标记辅助选择育种的发展。本研究试料为郁金香品种‘Kees Nelis’与‘Cantata’杂交得到的F1代植株。采用土壤感病法及接种法对作图群体及亲本的基腐病抗性进行评价。土壤感病是传统的抗病性鉴定方法,将郁金香种球栽种在受病原菌感染的土壤中,培养6周后开始观察参照品种的感病程度,当感病参照完全发病时,采用1~5级标准对其它测试种球进行分级,以每个基因型所有重复的平均值代表其抗病性。接种法是使用携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)基因的病原菌菌株,对待测种球进行穿刺接种,利用GFP产生的荧光信号对感病程度进行定量。利用多种分子系统标记对作图群体进行基因型检测,通过软件Join Map4.1,采用双拟假测交策略,分别对两亲本进行连锁分析,构建双亲的遗传连锁图谱。利用软件Map QTL6,分年度、分表型鉴定方法对郁金香抗基腐病进行QTL定位。结果表明:研究发现基腐病抗性在两个郁金香亲本间差异显著,在杂交F1代中呈连续分布,为数量性状遗传。杂交F1代的表型分布符合正态分布,且存在明显的超亲分离。两年土壤感病鉴定结果的相关性较差,2011年土壤感病鉴定和GFP-tagged F.oxysporum接种鉴定相关性较差,2012年土壤感病鉴定和GFP-tagged F.oxysporum接种鉴定相关性较高。结合3组表型鉴定数据,依次通过Kruskal-Wallis检验、IM和MQM作图,共检测到6个与郁金香基腐病抗性相关的QTL位点,不同表型鉴定试验中各QTL的显著性不同,单个QTL对表型变异的最大贡献率为12.5%~20.7%。     

甘薯腐烂病病原鉴定

通过2003年7月～2005年5月对沙湾县乌兰乌苏镇东海子村甘薯腐烂病展开调查研究,发现甘薯腐烂病对甘薯造成严重损失,发病率高达43;.从大田中采样,通过室内分离,形态描述,测量,结合相关参考文献,最终确定甘薯腐烂病即甘薯茎线虫病,该病原线虫鉴定为甘薯茎线虫Ditylenchus destructor Thorne.     

东方百合对镰刀菌鳞茎腐烂病的抗性

从云南省百合主产区采集东方百合种球鳞茎腐烂病病样,用镰刀菌分离方法分离纯化病原,均分离到镰刀菌菌株,经鉴定其为尖孢镰刀菌百合专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lilii).通过田间镰刀菌接种试验,筛选出不同抗性的材料进行总皂苷测定.结果表明:材料Cai-74的抗性较其他材料都强,而SF4n系列的抗性较其他系列材料都差,Cai-74的总皂苷含量比SF4T4-5的含量增加29.8%,有明显的差异.     

郁金香退化种球的高山复壮试验

高山冷凉的气候条件适合郁金香生长，栽培不出现退化，将单球重小于１０ｇ的郁金香退化球在海拔８８０ｍ处越夏贮藏及种植，收获后总球重有效增重在１倍以上，开花率提高，单球量大于１０ｇ的更新球比例增加明显，采取花后遮荫措施，平均叶枯收球期推迟１２天，种球复壮效果更加显著。     

郁金香退化种球的高山复壮试验

高山冷凉的气候条件适合郁金香生长，栽培不出现退化．将单球重小于１０ｇ的郁金香退化球及子球在海拔８８０ｍ处越夏贮藏及种植，收获后总球重有效增重在１倍以上，开花率提高，单球重大于１０ｇ的更新球比例增加明显．采取花后遮荫措施，平均叶枯收球期推迟１２天，种球复壮效果更加显著     

划布轮法鉴定新疆野苹果树腐烂病抗性方法的建立

中国新疆野苹果正遭受大面积死亡的生态危机,而腐烂病是主要诱因之一,急需对该植物资源进行抢救性保护。本研究旨在探索快速、高效及适用于野外的野苹果腐烂病抗性株快速筛选鉴定的方法。通过室内对5株15个新疆野苹果离体枝条和田间50株250片离体叶片进行划布轮刺伤,并接菌腐烂病强致病03-8菌株,25℃保湿观察。结果表明,枝条刺伤接菌8 d后发病率达100%,平均病斑长度为24～114 mm;叶片刺伤接菌4 d后发病率达100%,病斑面积比率为7%～88%,并鉴定出不同植株腐烂病抗性差异。表明对刺伤的枝条和叶片接菌是一种快速高效可信的腐烂病抗性株筛选鉴定方法,并适用于田间大样本量的抗性株初级筛选鉴定操作。     

湖南48个水稻栽培品种抗瘟性评价及抗性基因鉴定

为了明确48个湖南种植品种的抗瘟性和抗瘟基因型,选用10株已明确其无毒基因组成的稻瘟病单孢菌株对湖南稻区48个水稻品种进行离体接种试验;分析菌株对48个水稻品种的毒力频率,并作出其抗瘟性评价和抗瘟基因型的初步推定。结果表明,48个品种对10株菌株抗瘟性存在较大差异,毒力频率在0～60%之间,供试菌株对丰两优4号(VF=60%)、粤禾丝苗(VF=50%)、隆两优534(VF=50%)为较强毒力,对34个水稻品种中等毒力(20%≤VF50%),占试验总数的70.83%,对11个品种表现为弱毒力(VF20%),占试验总数的22.92%。在相似系数0.70水平上,可将48个品种划分为31谱系;通过稻瘟病菌与品种"基因对基因"关系的推断,抗瘟基因型Pi-1、Pi-a、Pi-7、Pi-3、Pi-i、Pi-11、Pi-19普遍存在于各水稻谱系中,出现频率高;Pi-5、Pi-t、Pi-k~p抗性基因出现频率比较低;抗性基因Pi-ta出现频率最低。     

厚皮甜瓜郁金香采后腐烂病害的病原分离鉴定

通过对兰州市场上厚皮甜瓜郁金香采后腐烂病病原的分离纯化,以培养性状、显微计测结果鉴定,确认为粉红聚端孢霉(Cephalothecium roseum),黑曲霉(Aspergillus niger),镰刀菌(Fusarium sp.),青霉(Penicillium sp.)4种真菌。经过室内回接实验,镰刀菌、粉红聚端孢霉有致病作用,是甜瓜郁金香采后腐烂病的寄生性病原菌,而黑曲霉、青霉无致病作用,是甜瓜郁金香采后腐烂病的腐生性病原菌。这是国内关于该病的系统研究的首次报道。     

84个苹果栽培品种对斑点落叶病的抗性评价和全基因组关联分析

【目的】斑点落叶病是中国苹果产区发生的主要病害之一,严重影响苹果的产量和品质。本研究旨在发掘具有高抗病性的苹果栽培品种和探寻调控斑点落叶病抗性的关键基因,为苹果品种改良提供科学依据。【方法】利用苹果斑点落叶病菌（Alternaria alternata f. sp. mali）对84份苹果栽培品种进行离体叶片接种鉴定,从病斑面积和病斑面积增长率两方面进行聚类分析,评价苹果栽培品种对斑点落叶病的抗性。用接种后叶片的病斑面积作为表型性状,以全基因组深度重测序获得的1 243 071个高质量SNP位点为遗传标记,采用EMMAX方法进行全基因组关联分析。【结果】84份苹果栽培品种接种后统计病斑面积发现,不同的苹果栽培品种在对斑点落叶病的抗病性方面表现出显著的多样性,其中感病和中抗的品种占绝大多数,而高抗和高感的品种占比较少;苹果斑点落叶病抗病性具有正态分布特征,呈现数量性状遗传特征。全基因组关联性状分析最终获得6个SNP位点呈现显著水平P≤0.0000001（-LgP≥7）,深入分析将其关联到7个关键候选基因,包括整合素连接蛋白激酶、FMN连锁氧化还原酶、B-box型锌指蛋白、GATA型转录因子等,并验证了整合素连接蛋白激酶在苹果抗病中的作用。【结论】经过两年数据的综合分析,最终从84个苹果栽培品种里,鉴定到稳定抗性品种7份,稳定易感品种2份。通过全基因组关联性状分析鉴定到与苹果斑点落叶病抗病性显著相关的6个SNP位点,关联到7个关键候选基因,并验证了其中一个基因的功能。     

不同类型复合肥对郁金香种球复壮的影响

为研究均肥、高氮肥、高磷肥、高钾肥对郁金香种球生长的影响,选择4个郁金香品种Ad Rem、World Favourite、Parade、Golden Parade在连云港进行了复壮栽培试验.结果表明,不同类型复合肥延长了郁金香叶片生长时间,以高氮肥效果最好;提高了种球成球率,表现为高磷肥>均肥>高钾肥>高氮肥.高磷肥对郁金香种球复壮生长的促进作用极显著高于对照和其他3个处理.4个品种在试验中表现不尽相同,高磷肥处理下,商品种球(周径≥10 cm)成球率较高,Ad Rem、World Favourite、Parade、Golden Parade的成球率分别为78%、82%、88%、87%.因此,试验所选4个品种均适合在连云港进行复壮栽培,栽培时建议在叶芽萌动期追施高磷肥,提高种球成球率和种球品质.     

种球低温处理对郁金香生长及花期的影响

郁金香是需要一定时间的低温处理,其茎才能充分生长并开花的鳞茎植物。郁金香自然球在浙江公园种植常因冬季低温不足导致春季开花植株偏矮,整齐度差,初花景观效果不佳。本试验通过对3种不同温度处理郁金香种球的栽培试验,对比出苗期、初花期、末花期、株高等的物候观测,为浙江地区春季郁金香花展选择郁金香品种和温度处理方式提供依据。