猪链球菌病二价灭活疫苗候选株培养条件的优化及其安全性试验

筛选对猪致病力强、免疫原性良好的猪链球菌病兰氏C群LN01株和猪链球菌Ⅱ型LN05株,通过优化培养条件,LN01株和LN05株培养菌数最高分别为1.2×109和2.8×109CFU/mL;LN01株未见溶血素产生,LN05株溶血素效价为1∶64;脱毒剂A(甲醛)对其毒素的脱毒作用不明显,37℃脱毒30d,对仔猪的安全剂量为5mL;脱毒剂B的脱毒时间缩短为3d,安全剂量增加到10mL;试验还证实,37℃和60℃脱毒温度对本菌液脱毒效果无明显差异.     

水貂出血性肺炎

水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的水貂的急性传染病。以出血性肺炎为主要特征,发病急,死亡快,常呈地方性暴发流行,给养貂业造成较大的经济损失。     

水貂出血性肺炎灭活疫苗(B型)生产工艺的建立

正水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌(又称铜绿假单胞菌,Pseudomonas aeruginosa)感染引起的一种高度致死性传染病,多发于每年9至11月份,该菌可通过患病水貂形成的飞沫及气溶胶传播。发病急、死亡快,所以又称铜绿假单胞菌肺炎,以呼吸困难、口鼻出血、突发性死亡为主要特征,死后典型症状为口鼻流出血样泡沫,剖     

谨防水貂出血性肺炎

<正>水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的貂的一种急性败血性传染病,主要发生在秋季夏毛脱落时。水貂脱掉夏毛时,脱下的毛在场内四处飞扬,黏附于毛上的细菌随时可污染饲料和饮水而发生     

水貂养殖谨防出血性肺炎

<正>水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的,以肺出血,鼻、耳出血,脑膜炎为特征的急性败血症疾病,病程短,死亡率高。发病原因水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的一种传染性疾病,无明显季节性,但夏秋季节容易发生,此期水貂正处于换毛期或因气温变化较大,给水貂带来一定的应激,造成机体抵抗力下降,从而引起该病的发生。本菌为绿脓假单孢菌,革兰氏染色阴性,本菌为条件性致病菌,在土壤、水和空气中广泛存在,在动物体皮肤和正     

水貂出血性肺炎及其防控

<正>水貂出血性肺炎主要由铜绿假单胞菌(原称绿脓杆菌)、肺炎克雷伯氏菌、及肺炎双球菌、大肠杆菌等单独或多种细菌混合感染引起的水貂呼吸道传染病。该病发病急、病程2~3d,很快死亡,常呈地方性暴发流行。夏秋两季,尤其是在7~9月份的水貂换毛期多发。水貂不分品种、年龄及性别均可感染本病,发病率和死亡率均在10%~50%。在我国,绿脓杆菌和肺炎克雷伯氏菌是导致出血性肺炎的主要病原,分别有50%及20%以上的病例与此二者有关,且常见两者混合感染。     

中西结合治疗水貂出血性肺炎

水貂出血性肺炎是由假单胞菌属中的绿脓杆菌引起的一种急性败血性传染病。本病发病急、传播快,往往发现症状即突然死亡,给水貂养殖业造成严重损失。2010年文登市水貂出血性肺炎发病较为严重,笔者根据该病发病症状和流行特点,采用中西结合进行防治,收到满意效果,现介绍如下。     

水貂出血性肺炎综合防控技术

水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的严重威胁水貂饲养业的重要疾病之一。文章从水貂出血性肺炎的病原体、流行特征、临床症状、剖检变化和疾病诊断等方面进行了综述,最后提出要加强饲养管理,加强环境消毒,并正确使用疫苗及抗生素以防治水貂出血性肺炎。     

鸭疫里默氏杆菌二价灭活疫苗株筛选及免疫原性研究

通过对山东省鸭疫里默氏杆菌病流行病学调查,发现山东省主要流行鸭疫里默氏杆菌的血清型为Ⅰ、Ⅱ型.将临床分离鉴定的两种血清型致病菌株进行毒力测定和抗原性分析,筛选出适合制成鸭疫里默氏杆茵二价灭活苗的种子菌株,并对其免疫原性进行了研究.     

猪链球菌3型疫苗候选菌株筛选及3＋9型二价灭活疫苗对小鼠免疫效果评估

【目的】 筛选猪链球菌血清3型疫苗候选菌株,制备猪链球菌3＋9型二价灭活疫苗并评估其在BALB/c小鼠上的免疫保护效果。【方法】 从发病猪病料中分离猪链球菌血清3型菌株,通过蜡螟幼虫和BALB/c小鼠模型筛选出强毒株作为疫苗候选菌株,并对候选菌株进行生物学特性研究。将筛选得到的3型疫苗候选菌株和前期筛选的9型疫苗候选菌株灭活浓缩,使其抗原浓度为2×10¹⁰ CFU/mL,无菌检测后将浓缩抗原液按1：1配比混合,再混合抗原与Summit Poly Solution佐剂按4：1比例混合,制备猪链球菌3＋9型二价灭活疫苗,疫苗中猪链球菌血清3和9型含菌量均为2×10⁹ CFU/mL。将制备的疫苗免疫6周龄BALB/c小鼠,首免后第14天进行二免,二免后第14天进行攻毒。同时设立商品化疫苗免疫组和阴性对照组,评估疫苗的安全性和免疫保护效果。【结果】 PCR鉴定结果显示,23株临床分离株均为血清3型猪链球菌,依次命名为KQ3-1~KQ3-23。分别通过蜡螟和小鼠进行初筛和复筛,筛选到强毒株KQ3-1。毒力基因检测显示,该菌株基因型为gapdh^＋/sly^＋/fbps^-/orf2^-/mrp^-/89K^-/gdh^＋/epf^-;生长曲线显示,该菌株在37 ℃培养8~10 h时生长达到对数生长后期;BALB/c小鼠致病性结果显示,腹腔接种12 h内可引起小鼠精神萎靡、扎堆、毛发耸立、运动迟缓、死亡等临床症状,该菌株的LD₅₀为5.2×10⁷ CFU/只。制备的疫苗免疫小鼠后,小鼠精神状况、采食等均正常,疫苗注射部位无肿胀、硬块等不良反应,无死亡发生,表明该疫苗具有良好的安全性。免疫后进行猪链球菌血清2型菌株ZYS、猪链球菌血清3型菌株KQ3-1和猪链球菌血清9型菌株YT攻毒,对照组死亡率分别为90%、100%和100%,猪链球菌3＋9型二价灭活疫苗免疫组保护率分别为30%、80%和70%,商品化疫苗组的保护效果分别为70%、0和10%。【结论】 本研究研制的疫苗能对猪链球菌血清3和9型强毒株提供良好的免疫保护,该疫苗具备疫苗市场开发的潜在价值。     

济生桔梗汤治水貂出血性肺炎

<正>水貂出血性肺炎又称假单胞菌性肺炎或绿脓杆菌病,是由绿脓杆菌引起的急性败血性传染病,属人兽共患病。病貂发病急、死亡快,以出现呼吸困难,鼻孔流出泡沫样红色液体,肺充血、出血为特征。1发病情况某貂场饲养2 000只貂,该场管理规范,具有健全的卫生防疫制度,各种建筑及貂笼安放、布局合理,貂场多年没有发生过重大的疫情,但2015年7月该场的貂突然出现零星发病,并在1 d内死亡7只貂。     

鸭疫里氏杆菌二价灭活疫苗制备及免疫效力研究

【目的】根据鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)血清1型、2型贵州流行株制备二价灭活疫苗,为鸭疫里氏杆菌病的防控及疫苗研制提供研究资料。【方法】以血清1型RA(RA-G06株)、血清2型RA(RA-HS01株)地方流行株为菌种,通过涂板法测定菌株生长曲线,利用改良寇氏法计算菌株对鸭的半数致死量(median lethal dose, LD₅₀),将2株菌培养至终浓度为1×10¹⁰ CFU/mL后等比例混合,以卡波姆为佐剂制备二价灭活疫苗,经疫苗质量检验后进行雏鸭免疫试验;通过检测免疫鸭血清中特异性抗体水平和攻毒保护试验评价疫苗的保护率,对攻毒试验鸭心脏、肝脏、脾脏和脑组织进行组织病理学观察。【结果】RA-G06株和RA-HS01株均在培养12 h时到达峰值,活菌数分别为2.1×10¹¹和3.3×10¹¹ CFU/mL,LD₅₀分别为1.44×10¹⁰和2.63×10⁸ CFU/mL;制备的疫苗安全性良...     

鸭传染性浆膜炎二价灭活疫苗的效果评价研究

鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏杆菌引起家鸭、火鸡和其它鸟类的一种接触性传染病,可给养鸭业造成很大经济损失。疫苗是防控该病的重要手段。本文主要针对鸭疫里默氏杆菌二价灭活疫苗的效果进行评价:疫苗免疫后21 d,针对SG4株的抗体效价在7.7-8.5 log2之间,显著高于针对ZZY7株抗体效价(3.0-3.4 log2),3个批次疫苗之间的抗体效价基本稳定。效力检验结果表明,该苗能够产生100%的攻毒保护;且免疫后对鸭的生长性能无明显影响;无菌检验、剂型和黏度等均符合2010年版《中华人民共和国兽药典》三部标准。     

新型鸭肝炎病毒疫苗候选株的筛选

本试验对临床患病鸭分离的一株疑似鸭肝炎病毒进行了血清型鉴定和毒力测定。利用Ⅰ型和新型鸭肝炎病毒鉴别引物对提取的病毒RNA进行RT-PCR扩增;将分离病毒分别与Ⅰ型和新型鸭肝炎病毒阳性血清进行中和试验;根据测定的病毒ELD50,进行雏鸭攻毒和鸭胚肝细胞接毒试验。结果表明:RT-PCR扩增出了与新型鸭肝炎病毒预期片段相符的705bp条带;分离病毒不能被Ⅰ型鸭肝炎病毒阳性血清中和,新型鸭肝炎病毒阳性血清对该病毒的中和效价是1:200,说明该分离株属于新型鸭肝炎病毒。该毒株的ELD50为10-5.7/0.2mL,能引起攻毒鸭与临床病例一致的症状和病变以及显著的肝细胞病变,可作为新型鸭肝炎病毒的疫苗候选株开发应用。     

水貂出血性肺炎病原分离鉴定及药物敏感性分析

笔者通过对2015年1~12月辖区内送检的38例水貂肺炎病例进行病原分离鉴定及药物敏感性分析,共分离获得39株绿脓杆菌,标记PA-L01至PA-SA17,其中G型25株、B型5株、C型9株,细菌对氨苄西林、阿莫西林、克拉维酸钾耐药,对亚胺培南敏感。故有理由认为应首选亚胺培南治疗水貂出血性肺炎。     

牛支原体(新疆株)灭活疫苗的制备及犊牛免疫保护性评价

为研发用于预防犊牛支原体肺炎及关节炎灭活油佐剂疫苗并评价其免疫效果,本研究采用牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)新疆分离株做为制苗菌株,经牛支原体专用液体扩大培养基培养后进行膜分离浓缩、甲醛灭活,加入油佐剂乳化制备牛支原体灭活疫苗,经无菌检验、实验动物安全性检验及乳化效果检测后进行犊牛免疫效果测定。结果显示,免疫组犊牛在二免后14 d,血清中M.bovis抗体达到0.465(OD_(450)),3头攻毒犊牛均保持良好的精神状态且体温变化不明显,临床症状综合评分为3,肺脏解剖学及病理组织学观察无异常,肺脏病变指数为2且肺脏中未分离回收到M.bovis;未免疫对照组犊牛同期血清M.bovis抗体为0.142(OD_(450)),3头攻毒犊牛均先后出现体温升高、轻度咳喘、脓性鼻液、明显消瘦等症状,临床症状综合评分为11,肺脏病变指数为17,肺脏尖叶、心叶及部分膈叶均表现明显肝变,2头犊牛表现胸膜与肺脏黏连,1头犊牛整个尖叶广泛分布黄白色蚕豆状大小坏死性结节,与自然感染病例相同,病理组织学观察显示肺泡腔和支气管中有大量中性粒细胞浸润,支气管管壁充血、水肿,肺脏部分坏死灶呈均质红染,为典型的化脓性及坏死性肺炎变化,从病变肺组织中均分离回收到M.bovis。结果表明,本研究制备的牛支原体灭活疫苗给犊牛免疫后能产生良好的免疫应答反应,并能抵抗M.bovis感染所致的肺脏病变作用。     

鸽新城疫rGX-mF株灭活疫苗的制备及免疫原性分析

为有效控制临床中鸽新城疫的发生,选取基因Ⅵ型鸽新城疫病毒弱毒株rGX-mF作为疫苗候选株,评价其生物学特性,并将rGX-mF灭活后制备成油佐剂灭活疫苗,接种雏鸽和SPF鸡进行rGX-mF株的免疫原性分析,为研制安全高效的鸽新城疫灭活疫苗奠定基础。结果表明,rGX-mF株能够在鸡胚中稳定传代,效价高,毒力弱;rGX-mF株灭活疫苗接种雏鸽后疫苗吸收良好,无局部和全身不良反应,安全性好,免疫持续期长达12个月;rGX-mF株灭活疫苗与LaSota株灭活疫苗相比,rGX-mF株灭活疫苗在鸽体内能产生更高水平的抗体;rGX-mF株灭活疫苗同时免疫SPF鸡和雏鸽,SPF鸡产生的抗体显著高于鸽产生的抗体,这可能与鸽和鸡的免疫系统存在差异有关。综上,利用基因Ⅵ型鸽新城疫病毒弱毒rGX-mF株制备的灭活疫苗可在鸽体内产生有效的抗体,免疫效果好,免疫持续期长。     

细菌分离与基因扩增确诊水貂出血性肺炎

经细菌分离培养与小鼠接种实验,从急性死亡、鼻孔流血和剖检表现为出血性肺炎的急性死亡水貂脏器中分离获得可使小鼠死亡的革兰阴性,单个、成双或呈短链状的中等大小杆菌。应用绿脓杆菌16S核糖体DNA引物进行PCR扩增与序列分析,得到与预期片段大小相一致的片段,经序列测定证明与假单胞菌属的绿脓杆菌16S核糖体DNA序列相一致。药敏试验表明该细菌对氟苯尼考敏感,临床应用该药后疫情得到迅速控制。     

清肺散加减配合西药治疗水貂出血性肺炎

正近年来,水貂出血性肺炎的发病率大幅上升,严重地影响了养貂业的发展。本病是由假单胞菌属中绿脓杆菌引起貂的一种急性败血性传染病。以呼吸困难、口鼻流泡沫样血水,叫声异常,发病急,传播快,迅速死亡为特征,多呈地方性暴发流行,常给水貂饲养业造成较大损失。2015年8月,镇赉县某养貂户所饲养的水貂发生出血性肺炎,经我们采用中西结合的方法进行防治,收到满意效果,现介绍如下。     

兔出血性肺炎(暂定名)灭活疫苗制造方法

1984年7月,兔出血性肺炎在我地区开始发生,不到半年时间,死亡长毛兔47万余只,直接经济损失1500多万元。为防制该病,我们从1984年12月开始,进行了该病灭活疫苗的研制工作,至1985年7月已研成疫苗19批,150万毫升。经实验室试验、小区域试验、中间试产试验和大区域试