支气管败血波氏杆菌的鉴定及药敏试验

从猪萎缩性鼻炎(AR)临床症状猪群分离出34株疑似支气管败血波氏杆菌(Bb),对分离菌进行形态结构、染色特性、培养性状和生化特性等方面的测定,结果这些分离菌均符合Bb的生物学特征;对BbFlaA基因进行PCR扩增,所有分离菌均能扩增出特异性DNA条带,与传统方法的鉴定结果完全一致,且最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及枯草芽孢杆菌均未出现任何DNA条带。药敏试验显示,这些分离物对多黏霉素B、丙氟哌酸、氟哌酸、卡那霉素和庆大霉素均表现高度敏感。     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其对小白鼠致病性试验

从江西省彭泽县某猪场出现咳嗽、呼吸困难、胸膜有化脓性纤维蛋白渗出物病变的病死猪中分离到1株革兰氏阴性细小杆菌,进行了培养特性和生化特性鉴定;用副猪嗜血杆菌16SrRNA的特异性PCR引物,通过PCR技术可从分离菌中扩增出822bp的特异基因片段,表明该分离菌为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明,分离菌对头孢唑林高度敏感,对氟哌酸、头孢哌酮、氯霉素等敏感,而对复方新诺明、链霉素等有抵抗力。小白鼠攻毒试验显示其有致病性。     

3株猪胸膜肺炎放线杆菌山东株的分离及鉴定

从山东省几个猪场的疑似猪传染性胸膜肺炎病例中,采集病猪的肺脏、气管和扁桃体等病变组织,经细菌分离得到3个分离株BZ1株、BZ2株、BZ3株。经过革兰氏染色镜检、菌落形态观察、培养特性试验、生化试验、药敏试验、动物感染试验等一系列细菌学鉴定方法,可将3株分离菌鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。     

副猪嗜血杆菌安徽株分离鉴定与药敏试验

从安徽某养猪场送检的病猪中分离到2株细菌,经细菌形态、染色镜检、培养特性和生化试验鉴定为副猪嗜血杆菌.经药敏试验显示,2株分离细菌对头孢拉定、先锋V、氟哌酸均高度敏感;对环丙沙星、四环素、强力霉素均中度敏感;对阿莫西林、金霉素呈低度敏感.本试验为该猪场副猪嗜血杆菌病的防治提供了理论依据.     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及中药药敏试验

从数例疑似副猪嗜血杆菌病猪的肺脏和心包积液中分离到3株革兰氏阴性细小杆菌,经涂片镜检、生化试验和PCR鉴定,确定分离的3株菌为副猪嗜血杆菌.中药药敏试验结果表明,副猪嗜血杆菌对金银花及其组成的复方敏感,且复方作用效果优于单方.     

冻猪胃中鼠伤寒沙门氏菌的分离与鉴定

从一客户送检的冻猪胃中分离出一株细菌，经细菌分离培养，生化反应，梅里奥微生物自动分析仪检测以及血清凝集试验鉴定为鼠伤寒沙门氏菌，抗原式为4，5：i:1,2。该菌株致接种的小白鼠全部死亡；分离菌对先锋V，氟哌酸，环丙沙星，氯霉素高敏，对复方新诺明，青霉素，红霉素耐药。     

猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

从福建省某猪场发生以呼吸道病为主要特征的病死猪脏器中分离到1株可疑菌,通过细菌分离和纯培养、涂片镜检、生化试验、小鼠致死性试验、药敏试验,并设计1对检测猪多杀性巴氏杆菌的引物,对可疑菌做PCR检测。结果表明,可疑菌对小鼠有致死毒力;PCR检测结果与生化鉴定结果符合,可疑菌为猪多杀性巴氏杆菌;药敏试验检测结果显示,该菌对先锋霉素Ⅴ、阿米卡星、氟哌酸、氯霉素和庆大霉素高度敏感。     

胸膜肺炎嗜血杆菌的分离和鉴定

采用自行设计的分离培养基,从胸膜肺炎病死猪及屠宰猪的病变肺中分离到11株胸膜肺炎嗜血杆菌(Haem-ophilus pleuropneumoniae).经生化及培养特性鉴定与国际标准菌株一致.血清7型的3株分离物均人工复制出典型的猪胸膜肺炎嗜血杆菌病的症状和病变.3株分离菌株和国际7型标准菌株培养物,经电镜观察、首次发现本菌具有纤细的直纤毛.     

胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及免疫预防

从陕西省某猪场分离到1株细菌，经培养特性，形态观察及生化试验等鉴定为胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae)；动物致病性试验对豚鼠，小白鼠有很强的致病性；该菌对羧苄青霉素，氯霉素等高度敏感，对氟哌酸，复合磺胺等耐药。分离菌制成油佐剂灭活苗，对猪进行一免后30d抗体凝集效价可达1：32，二免后30d抗体凝集效价可达1：128以上。     

仔猪水肿病病原的分离鉴定

从陕西省周至县5个乡镇疑似猪水肿病的病、死猪体内分离到8株细菌,根据其形态、培养特性和生化特性鉴定为大肠埃希菌。动物致病性试验表明,8株分离菌中有5株为致病性大肠埃希菌,能致死小鼠和引起断奶仔猪发病。血清学鉴定ZH1、ZH3和ZH7分离株为0138,ZH6分离株为0141,ZH4分离株为08,其中0138为优势血清型。     

猪胸膜肺炎放线杆菌新疆株的分离鉴定及ApxⅣA基因的克隆与序列分析

从新疆北疆4个规模化猪场的20份发病猪病料中分离到1株细菌。经形态染色镜检、培养特性、生化特性和部分生物学特性试验鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。根据猪胸膜肺炎放线杆菌ⅣA毒素基因特异性引物进行PCR扩增,得到1条与预期大小一致的2427bp的条带,将PCR产物纯化后克隆至pMD19-T载体上并测序。结果表明,该片段的碱基序列与GenBank中参考序列的同源性为98%,并与三株标准株比较,同源性分别为98.23%、99.46%和98.06%。     

猪传染性胸膜肺炎HT株的分离,鉴定与定型试验

近年来从山东省等地曾发生过猪传染性胸膜肺炎的一些猪场,分离并获得了ＡＰＰ菌株１８株。１９９８年又从青岛地区发病猪场分离到ＡＰＰ菌ＨＴ株,经鉴定确认为ＡＰＰ８型     

Molecular Identification and Antimicrobial Susceptibility Test of Porcine Contagious Actinobacillus pleuropneumoniae Serotype 3

In order to understand the serotype and drug resistance of porcine contagious Actinobacillus pleuropneumoniae(APP), a pair of primers was designed according to GenBank database to amplify specific 950 bp fragment, and the molecular identification and antimicrobial susceptibility test of APP serotype 3 were investigated.The results showed that the PCR product sequences were more than 99% homology with the APP serotype 3 published in GenBank.The isolated strains were highly resistant and multiple drug resistance.The molecular identification and antimicrobial susceptibility test of APP serotype 3 provided the basis for the identification, diagnosis and prevention of porcine contagious pleuropneumonia.     

猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌血清3型分子鉴定及药敏试验

为了解猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的血清型及耐药情况,本研究根据GenBank数据库设计1对引物,特异性的扩增950 bp核苷酸片段,对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验。结果显示,所得PCR产物经过测序,与GenBank已发表的血清3型APP的同源性达99%以上,所分离菌株耐药性较强,大多为多重耐药。通过对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验,为猪传染性胸膜肺炎的鉴定、诊断及防制提供了基础。     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验

对从全国30多个猪场送检的疑似猪传染性胸膜肺炎的病猪中，用PPLO培养基进行了胸膜肺炎放线杆菌的分离，对分离菌进行了PCR鉴定和生化鉴定，并测定了该菌的培养特性、致病性和对药物的敏感性。结果成功分离到了15株胸膜肺炎放线杆菌，该菌对先锋霉素类和氯霉素较敏感。     

广东省猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定及耐药表型和耐药基因检测与分析

【目的】了解广东省部分规模化猪场引起猪传染性胸膜肺炎(PCP)的病原菌猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的耐药表型和耐药基因携带情况,并分析比较其相关性,为有效防控该病提供理论依据。【方法】将2019-2021年从广东省不同地区规模化猪场采集的疑似猪传染性胸膜肺炎病死猪病料通过病原分离培养、革兰氏染色、生化试验、PCR扩增等方法进行病原菌分离鉴定和测序分析,随后对分离株进行药敏试验并通过PCR检测其耐药基因,确定其耐药表型和耐药基因的携带率,分析比较两者的一致性。【结果】分离菌需在含有血清和NAD的培养板中生长;革兰氏染色结果显示分离菌为红色,可判定为革兰氏阴性细菌,通过生化试验、PCR结果及测序分析确定分离到20株APP,且没有表现出明显的地域特性。所有菌株均呈现多重耐药且约50%菌株呈8重及以上耐药;其中对四环素类、磺胺类、氯霉素类和大环内酯类药物耐药率较高,分别为77.5%、65.0%、55.0%和48.8%;进一步分析发现,分离菌主要对四环素、磺胺异噁唑、氟苯尼考和林可霉素等抗菌药物耐药,而对头孢唑啉(先锋Ⅴ)和阿奇霉素敏感。23种主要耐药基因中共检测到bla_CMY、aph(2″)-Ⅰb、sul1、sul2、sul3、tetA、tetB、tetM、tetO、tetR和floR这11种耐药基因,携带率分别为85%、85%、50%、60%、75%、30%、100%、85%、100%、70%和80%;未检测到喹诺酮类、大环内酯类和林可胺类相关耐药基因。【结论】从广东省猪群中分离到的APP表现出广泛耐药性,且为多重耐药,耐药基因与耐药表型基本一致,表明耐药基因的携带是细菌对抗菌药物产生耐药的主要原因之一,但也可能存在其他未检测的耐药基因,或存在新的耐药机制。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的鉴定和耐药性研究

猪传染性胸膜肺炎是由猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuralpneumoniae,APP)引起的一种高度传染性呼吸道疾病,临床上准确鉴定该病原菌并合理选择抗生素施药十分重要。研究比较了应用传统方法、PCR方法和MALDI TOF方法鉴定45株临床APP,并比较了三种优势血清型的毒力表型,最后测定了其对临床34种常见抗生素的MIC。结果发现MALDI TOF微生物学鉴定方法具有快速、准确的优势;临床菌株血清型主要包括3型（20株）、1型（13株）、7型（7株）,其他血清型菌株5株,其中1型毒力最强;APP对罗红霉素、头孢噻呋、恩诺沙星、氨苄西林等高度敏感,对四环素、土霉素等耐药率较高。研究为临床快速鉴定APP和合理选择用药提供了参考依据,为APP临床耐药折点的制定奠定了基础。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分离株的分子生物学鉴定

根据已有的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP) dsbE基因序列,合成了一对特异性引物,从3株APP分离菌(BZ1株,BZ2株和BZ3株)均扩增出预期342 bp的DNA片段.分别将扩增的目的基因连接到pMD18-T载体中,构建重组质粒,转化大肠埃希菌DH5α感受态细胞,提取质粒并进行序列分析.结果表明BZ1株dsbE基因与所有14种血清型APP参考株dsbE基因的同源性达98%～100%,BZ2株dsbE基因与所有14种血清型APP参考株dsbE基因的同源性达98%～99%,BZ3株dsbE基因与所有14种血清型APP参考株dsbE基因同源性达97%～98%,证明3株分离菌均为APP.     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

吉林省某规模化养猪场送检疑似猪传染性胸膜肺炎的死猪病料,采用不同培养基进行病原菌分离,结果分离出3株疑似胸膜肺炎放线杆菌。通过对分离菌进行镜检、培养特性试验、生化特性试验、PCR鉴定,确定为3株均为胸膜肺炎放线杆菌,致病性试验结果表明,分离的胸膜肺炎放线杆菌具有强致病性。     

胸膜肺炎放线杆菌对四环素类抗生素的耐药分析及相关基因检测

四环素类药物是在兽医临床中常用的一类抗生素,为了解胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)对四环素类抗生素的耐药情况,本研究对从临床分离鉴定的85株APP进行了四环素类抗生素临床耐药情况和相关基因的分析和检测。应用药敏纸片法进行药敏试验,结果:APP对四环素的耐药率较高为76.5%,其次为金霉素54.1%、美他环素48.2%、多西环素45.9%、土霉素28.2%、米诺霉素25.9%、替加环素22.3%。采用PCR方法对四环素类10种耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG、tetH、tet1、tetL1和tetL2进行检测,结果:tetA、tetB、tetC、tetD、tetE、tetG、tetH、tet1、tetL2、tetL1耐药基因的扩增阳性率分别为78.8%、41.2%、15.3%、8.2%、21.2%、15.3%、43.5%、24.7%和30.6%,而tetL1扩增则全部阴性,未检出其耐药基因。本研究结果为四环素类抗生素在猪传染性胸膜肺炎临床上的应用和新药研发提供了一定的理论依据。