复合酶解法制备乳清蛋白肽工艺条件的研究

乳清蛋白经蛋白酶酶解得到小分子乳清蛋白肽,它具有多种生理活性功能,可以广泛应用于食品和医药等行业.采用复合蛋白酶酶解乳清蛋白,并通过正交试验,确定其优化工艺条件.结果表明,采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶酶解乳清蛋白制取乳清蛋白肽的最佳工艺条件是酶比底物值1:12,底物浓度6.0%,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例2:1,pH值7.5,在45℃条件下酶解7h,其最高水解度可以达到46.5%.     

胃蛋白酶水解乳清蛋白技术条件的优化

以浓缩乳清蛋白为原料,选择胃蛋白酶,采用均匀实验设计安排多因素多水平,寻求酶解乳清蛋白的最佳优化条件,利用DPS数据处理软件对试验结果进行回归分析,得到了具有拟合度较高的回归方程.确定胃蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳水解条件为:酶解温度40.5 ℃、pH 2.5、酶和底物比1/25、底物浓度5.25%、酶解时间187 min,水解度16.98%.     

固定化木瓜蛋白酶水解大豆乳清废水研究

大豆乳清废水中含有高浓度的BOD5和COD,难生物降解,且易发生腐败。为提高大豆乳清废水的可生物降解性,采用固定化木瓜蛋白酶水解大豆乳清废水,并研究最佳工艺条件。固定化工艺中以戊二醛为交联剂,壳聚糖为载体。固定化木瓜蛋白酶水解大豆乳清废水的最佳工艺条件为:在55℃、pH为8.0、加酶量为3%的条件下,水解2.5 h后,底物水解度可达36.48%。废水中BOD5/COD比值可达0.7以上,废水的可生化性程度显著提高,对固定化酶进行回收,酶活力回收率可达97%,可以有效重复使用。     

固定化木瓜蛋白酶水解大豆乳清废水研究

大豆乳清废水中含有高浓度的ROD5和COD,难生物降解,且易发生腐败.为提高大豆乳清废水的可生物降解性,采用固定化木瓜蛋白酶水解大豆乳清废水,并研究最佳工艺条件.固定化工艺中以戊二醛为交联剂,壳聚糖为载体.固定化木瓜蛋白酶水解大豆乳清废水的最佳工艺条件为:在55℃、pH为8.0、加酶量为3％的条件下,水解2.5 h后,底物水解度可达36.48％.废水中BOD5/COD比值可达0.7以上,废水的可生化性程度显著提高,对固定化酶进行回收,酶活力回收率可达97％,可以有效重复使用.     

乳清蛋白水解产物中细胞生长因子的分离及其性质的研究

水解乳清蛋白做为细胞培养基的添加物,早已广泛应用于组织培养工作中。除做为氨基酸源之外,尚可部分代替血清。这就使我们考虑到在水解乳清蛋白中可能存在一种类似促进血清细胞生长因子的成份。这(?)问题的研究将对水解乳清蛋白的合理应用及细胞培养中某些实际问题的解决有一定的意义。为此,我们对乳清蛋白水解产物进行分离,获得具有特殊生物活性的组份。并对其理化性质进行初步探索。     

酶水解对变性乳清蛋白质的性质的影响

通过胰蛋白酶、胰酶、胃蛋白酶、无花果蛋白酶和木瓜蛋白酶等水解热变性乳清蛋白质的试验,结果表明:胰蛋白酶和胰酶水解能够明显地改善热变性乳清蛋白质的各种性质。水解程度越深,热变性乳清蛋白的水解产物的溶解性越高,其稳定性越好。当水解程度在20%左右时,其水解产物的发泡力和泡沫稳定性为最佳。胰酶水解对乳清蛋白的乳化稳定性有积极作用,其它蛋白酶的水解均使蛋白质的乳化稳定性明显下降。     

草莓防腐保鲜可食用膜的制备与研究

以乳清浓缩蛋白为基质、黄原胶作为增稠剂、甘油作为增塑剂制备可食用膜,包裹在新鲜草莓表面,以期达到防腐保鲜的目的。同时,探讨了乳清浓缩蛋白浓度、黄原胶添加量和膜液pH值对蛋白膜性能的影响。在单因素试验的基础上,优化制备可食用膜的原料配比和工艺参数,得出最佳工艺条件为乳清浓缩蛋白12%、黄原胶添加量0.3%、pH=7。此时,可食用膜具有膜厚度低、透湿系数低及溶解率适中的特点。     

一种有效的奶蛋白水解禽肉法

加拿大圭尔夫大学的科学家们采用2％的全奶蛋白、奶蛋白的主要成分（酪蛋白酸和乳清）和部分产物（β-乳球蛋白和两个水解乳清蛋白）对鸡肉制作的法兰克福香肠进行了水解研究。研究显示,与对照组相比,添加了酪蛋白酸、常规乳清和乳清蛋白的2种水解物（WPH-Ⅰ和WPH-Ⅱ）可以显著降低烹煮损失,2种水解产物的水解效果最好。酪蛋白酸和常规乳清增加了鸡肉硬度,但是WPH-Ⅰ和WPH-Ⅱ能够显著降低鸡肉硬度、剪切力和弹性。     

蚕蛹蛋白双酶法水解工艺优化

研究了碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件.在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,研究温度、脱脂蚕蛹粉浓度、水解时间、加酶量、酶质量比(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,通过正交试验优化水解工艺条件.结果表明,优化的工艺条件为脱脂蚕蛹粉浓度30 g/L,水解时间6h(其中碱性蛋白酶的水解时间为4.5 h,中性蛋白酶的为1.5 h),加酶量3％,温度55℃,酶质量比3:1,碱性蛋白酶处理时pH9.0、中性蛋白酶处理时pH7.5.在此工艺条件下蚕蛹蛋白水解度可达22.99％.     

菜籽粕蛋白肽制备工艺条件优化

试验改进了菜籽粕蛋白的酶解工艺,并对改进后的工艺条件进行了优化。采用2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白,分别考察了pH值、酶用量、酶解时间、温度、底物浓度对蛋白回收率的影响规律,在此基础上,利用响应面分析法对菜籽粕蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白的较优条件为pH11.5、温度50℃、底物浓度4%、水解时间173min、酶用量5778U·g-1,此时蛋白回收率可达87.18%。     

大豆乳清蛋白发泡特性及辅助抑制肿瘤作用研究

为考察大豆乳清蛋白发泡特性及辅助抑制肿瘤作用,采用截留分子质量(MWCO)为10000u再生纤维膜(RXC)进行试验,考察大豆乳清蛋白发泡特性及其最佳控制条件,同时进行辅助抑制肿瘤作用试验,考察经口给予小鼠不同剂量的大豆乳清蛋白30d(接种S-180腹水型肿瘤细胞),对小鼠体重、脏器/体重和移植S-180瘤株肿瘤生长的影响。结果表明,浓度、温度、pH、时间和阳离子强度均对大豆乳清蛋白起泡性有显著影响。大豆乳清蛋白起泡性效果最佳条件是:浓度1.0%,温度60℃,pH5,钙离子强度0.1M。经口给予小鼠不同剂量的大豆乳清蛋白30d,对小鼠体重增长和脏器体重比值无影响,对小鼠S180肿瘤的生长有抑制作用,说明大豆乳清蛋白具有辅助抑制肿瘤的作用。显微镜观察结果表明1.6g·L-1和2.0g·L-1浓度的大豆乳清蛋白处理人肝癌细胞HepG248h后,细胞核或细胞质呈浓染的块状或颗粒状荧光,聚集于核周边或裂解成碎片,表明大豆乳清蛋白能诱发肿瘤细胞发生细胞凋亡。     

RP-HPLC测定乳清蛋白糖基化产物中的氨基葡萄糖

利用酸水解释放出的糖基化产物中氨基葡萄糖,采用Elite C18色谱柱分离,以68%的0.025 mol·L~(-1) pH 3.6乙酸-乙酸钠缓冲溶液和32%甲醇作为流动相等度洗脱,流速为1 m L·min~(-1),进样体积10μL,柱温35℃。定量分析结果表明,氨基葡萄糖0.1~100μg·m L~(-1)与氨基葡萄糖峰面积线性关系良好(R2=0.9998);以0.3、0.5、1.0 mg 3个添加水平作回收试验,氨基葡萄糖平均回收率为88.05%~110.79%,相对标准偏差为2.45%~5.92%;氨基葡萄糖检出限为0.02μg·m L~(-1)。糖基化乳清蛋白中氨基葡萄糖含量为2.03 mg·g~(-1)。RP-HPLC测定法用于乳清蛋白-氨基葡萄糖糖基化产物制备条件优化,方法简单、重复性好、灵敏度高,可用于蛋白质-氨基葡萄糖糖基化产物中氨基葡萄糖含量分析测定。     

响应面法优化高抗氧化麦芽糊精糖基化乳清浓缩蛋白的制备

为改善乳清浓缩蛋白的抗氧化活性,运用超声波辅助水浴湿热法制备麦芽糊精糖基化乳清浓缩蛋白,以褐变程度、中间产物生成量、反应后pH、铁离子还原力、DPPH自由基清除力为测试指标,通过单因素法和响应面法优化改性工艺。结果显示,在乳清浓缩蛋白浓度为30 mg·mL^-1,乳清浓缩蛋白:麦芽糊精质量比为1:5 mg·mg^-1,初始pH 11,水浴时间为7 h,水浴温度为100 ℃,超声时间为40 min,超声温度为60 ℃,超声次数为2次时最佳,测得终产物褐变0.603,中间产物0.497,反应后pH 6.51,铁离子还原力1.196,DPPH自由基清除率60.07%。乳清浓缩蛋白经麦芽糊精糖基化修饰后与未修饰的蛋白相比铁离子还原力增大2.45倍,DPPH自由基清除能力增大4.33倍。通过糖基化反应使麦芽糊精对乳清浓缩蛋白进行改性,改善了乳清浓缩蛋白的抗氧化能力。     

临床型乳房炎奶牛乳清差异蛋白质的双向电泳图谱分析

采用双向凝胶电泳技术和计算机辅助图象分析方法,对临床型乳房炎奶牛和健康奶牛的乳清蛋白质进行分析和比较,结果表明:在等电点为4~8,相对分子量为15 000-75 000 kD的区域内,临床型乳房炎奶牛乳清中有(128±8)个蛋白斑点,而健康奶牛乳清中有(122±4)个蛋白斑点.对临床型乳房炎奶牛与健康奶牛乳清蛋白质图谱匹配比较发现,有31个蛋白质点表达存在明显差异,其中乳房炎乳清中有7个蛋白点表达发生明显上调,6个蛋白点表达发生明显下调,4个蛋白点没有表达,并且乳房炎乳清新出现了10个蛋白点.     

响应面法优化鳙鱼鱼肉蛋白的酶解工艺

[目的]为鳙鱼及其他淡水鱼鱼肉蛋白资源的高价值利用提供指导。[方法]首先比较6种不同蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力,找出酶解能力最高的蛋白酶。通过响应面分析法优化酶解鳙鱼蛋白的工艺条件,探讨酶解过程中酶底物浓度比（[E]/[S]）、pH值和温度对酶解物水解度的影响。并分析酶解物的氨基酸组成。[结果]碱性蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力最强,蛋白回收率最高。其酶解鳙鱼鱼肉蛋白的最佳工艺条件为：[E]/[S]1.7%、pH值9.7,温度57℃。鳙鱼鱼肉蛋白在该条件下水解度理论值为25.24%。氨基酸组成分析结果表明,该工艺下所得酶解物的氨基酸组成与鳙鱼鱼肉蛋白的氨基酸组成差别不大,酶解物很好地保持了鱼肉蛋白的特定氨基酸模式。[结论]优化了镛鱼鱼肉蛋白的酶解工艺。     

新型胡萝卜蔬菜纸加工方法研究

[目的]研究新型胡萝卜蔬菜纸的加工方法,为制造更加健康、富有营养的可食用蔬菜纸奠定基础。[方法]以胡萝卜为基材,乳清蛋白和胶原蛋白为粘结剂优化工艺条件,研究新型胡萝卜蔬菜纸的加工方法。[结果]新鲜胡萝卜经过烫漂、冷却、硫处理、打浆、添加4％的乳清蛋白或胶原蛋白,以及2．5％的甘油,料液比为1：1（g／ml）,均质后经脱气、铺膜,在75℃下干燥4h后揭起,得到了成型效果好的胡萝卜蔬菜纸.[结论]新鲜胡萝卜和乳清蛋白或胶原蛋白配合,经加工,可制得成型效果好、营养价值丰富的新型胡萝卜蔬菜纸。     

SDS－PAGE电泳在鉴别用牛乳掺伪的新疆特种乳中的应用

[目的]采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴别一定比例掺伪的特种乳中所含的牛乳成分及确定最低检测掺伪比例。[方法]按一定的比例(1∶1、1∶4、1∶10、1∶20、1∶100、1∶200和1∶400(V牛乳/V特种乳))掺伪,离心分离乳清蛋白,SDS-PAGE电泳,确定掺伪差异性蛋白并进行灰度分析。[结果]SDS-PAGE可以快速、有效地分离各乳乳清蛋白以及掺伪的牛乳乳清蛋白。[结论]SDS-PAGE鉴别掺伪的最低比例为1∶10(V_(牛乳_/V_(特种乳))。     

花生蛋白酶解条件及酶解产物功能特性的研究

[目的]研究花生蛋白酶解条件、酶解产物的功能特性。[方法]采用酶解法,从花生饼粕粉中提取花生蛋白,通过单因素试验,考察了不同条件下花生饼粕粉中蛋白质的提取情况,并对其功能特性进行了研究。[结果]最佳的蛋白质提取率的条件为花生饼粕粉在55℃水热处理6 h,固液比为1∶20,溶液pH为12,加酶量为0.5%,在此条件下花生蛋白的提取率为74.62%。[结论]酶解花生蛋白具有较高的提取率。酶解产物具有较好的乳化性、起泡性及保水性。     

双碱配合提取啤酒厂剩余污泥蛋白质的研究

[目的]提高啤酒厂剩余污泥中蛋白质的提取率。[方法]分别选取水解温度、水解时间、NaOH或Ca(OH)2投加率为影响因素,以蛋白质提取率为评价指标,进行正交试验,并以此为依据采用双碱法优化污泥水解的工艺条件。[结果]双碱配合水解污泥提取蛋白质的最佳条件为NaOH投加率(占干污泥的质量分数)8%,Ca(OH)2投加率15%,水解温度80℃,水解时间7 h,此时反应体系pH为13。在最优条件下,蛋白质提取率可达60.03%。[结论]该研究可为啤酒厂污泥的资源化利用提供科学依据。