重组鸡γ-干扰素对H5亚型禽流感灭活苗的免疫增强作用

为研究重组鸡γ-干扰素(Chicken interferonγ,ChIFN-γ)对禽流感灭活疫苗的免疫增强效果,使用重组鸡γ-干扰素作为免疫佐剂,联合禽流感灭活疫苗采用胸部肌肉注射的方式免疫SPF雏鸡,免疫后每周测定血清抗体效价、免疫器官T、B淋巴细胞转化水平,攻毒后计算攻毒保护率。结果表明,鸡γ-干扰素提高了血清抗体水平,免疫器官T、B淋巴细胞转化水平和攻毒保护率,与疫苗组相比多数指标差异显著(P0.05)。鸡γ-干扰素对H5亚型禽流感灭活疫苗具有免疫增强作用。     

H9N2亚型禽流感病毒对鸡的免疫抑制机制

通过评价H9N2亚型禽流感病毒(AIVs)感染对于鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗免疫效力的影响,研究了H9N2 AIVs的免疫抑制机理。结果显示,H9N2 AIVs感染可降低鸡对鸡新城疫和传染性支气管炎活疫苗的抗体应答,但与对照组相比差异并不显著;而流式分析结果显示,与对照组相比H9N2 AIVs感染可显著降低鸡外周血中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的比率(P0.05);抗原特异性的T淋巴细胞增殖试验结果显示,与对照组相比H9N2 AIVs感染鸡的外周血T淋巴细胞增殖活性显著下降(P0.05);另外,H9N2 AIV感染还导致鸡血清中细胞因子IFN-γ和IL-4应答水平的下降,其中IFN-γ的应答水平与对照组相比差异显著(P0.05)。说明H9N2 AIVs感染可抑制鸡的免疫应答,其中对细胞免疫应答的抑制更为明显。     

中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

【目的】研究两个中药成分复方（cCHMIs）的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10 mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。     

茯苓多糖对鸡免疫功能的影响

为探讨茯苓多糖对海兰褐公雏鸡体内外免疫活性的影响,将120羽1日龄海兰褐公雏鸡随机分成6组,分别为空白对照组、模型组、免疫对照组(1 kg饲料添加0.2 g盐酸左旋咪唑)、茯苓多糖高剂量组(1 kg饲料添加2.0 g茯苓多糖)、茯苓多糖中剂量组(1 kg饲料添加1.0 g茯苓多糖)、茯苓多糖低剂量组(1 kg饲料添加0.5 g茯苓多糖),用MTT法检测不同浓度茯苓多糖对鸡外周血淋巴细胞、脾脏细胞增殖的影响,ELISA法测定血清中细胞因子IL-2和IFN-γ含量,屠杀、称重、计算各组鸡脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数。结果表明,茯苓多糖对鸡外周血淋巴细胞、脾脏细胞增殖具有刺激作用,浓度越高,刺激作用越强,呈现剂量依赖性;茯苓多糖高、中、低剂量组鸡血清中IL-2和IFN-γ均高于模型组,茯苓多糖各组免疫器官指数高于模型组。这表明茯苓多糖能提高海兰褐公雏鸡的免疫功能。     

蜂胶黄酮增强免疫作用的研究

以蜂胶黄酮(PF)为免疫增强剂,探讨其对免疫雏鸡血清抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖以及对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明:PF能显著提高雏鸡的血清抗体效价,促进外周血淋巴细胞增殖,且有一定的量效和时效关系;在体外,也能促进鸡脾脏T淋巴细胞增殖,以低浓度的效果较好。证明PF具有较强的增强免疫活性,是蜂胶中增强免疫作用的有效成分。     

酵母硒和硼联合添加对肉鸡免疫器官组织结构及免疫功能的影响

为研究酵母硒和硼联用对肉鸡免疫器官发育和免疫功能的影响,试验选用健康1日龄AA肉鸡1 200羽,随机分成对照组和处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组6个重复,每个重复40羽。对照组饲喂基础饲粮,处理Ⅰ~Ⅳ组在基础饲粮中添加0.3 mg·kg~(-1)的酵母硒和硼(添加量分别为0、5、10、15 mg·kg~(-1)),试验期42 d。结果显示:1)在21日龄,与对照组相比,处理Ⅱ和Ⅲ组肉鸡法氏囊器官指数,脾小结、动脉周围淋巴鞘和法氏囊小结面积及胸腺皮质厚度均显著(P0.05)升高;处理Ⅱ组肉鸡血清新城疫病毒(NDV)抗体和干扰素-γ(INF-γ)水平,处理Ⅲ组肉鸡血清白细胞介素-2(IL-2)水平也均显著(P0.05)升高。2)在42日龄,与对照组相比,处理Ⅱ和Ⅲ组肉鸡胸腺和法氏囊器官指数,脾小结、动脉周围淋巴鞘和法氏囊小结面积,胸腺皮质厚度以及血清NDV抗体和IL-2水平均显著(P0.05)升高;处理Ⅱ组血清Ig G和IFN-γ水平也显著(P0.05)升高;处理Ⅰ组肉鸡胸腺和法氏囊器官指数及血清Ig G水平显著(P0.05)升高。显微观测可见,处理Ⅱ和Ⅲ组21 d和42 d肉鸡免疫器官组织结构均明显改善,脾脏白髓和红髓结构清晰,胸腺皮质和髓质分界明显,法氏囊小叶数量增多,排列紧密,且处理Ⅰ组肉鸡法氏囊小叶体积也明显增大。结果表明,酵母硒单独补充或与不同剂量的硼联合应用均可在一定程度上促进肉鸡免疫器官的发育,改善其组织结构,增加机体免疫功能,0.3 mg·kg~(-1)酵母硒与5~10 mg·kg~(-1)硼联用促进效果更为明显。     

多糖-硒化多糖复方增强鸡免疫功能的比较研究

[目的]验证多糖-硒化多糖复方的增强免疫活性,筛选出活性最强的复方,为研制新型免疫增强剂提供试验依据。[方法]在前期研究筛选出增强免疫活性较强的当归多糖(CAP)、党参多糖(CPP)、大蒜多糖(GP)、硒化当归多糖(sCAP)、硒化党参多糖(sCPP)和硒化大蒜多糖(s GP)的基础上,以其为组分药,按照多糖与硒化多糖质量比9∶1的比例组成CAP-sCPP、CAP-s GP、CPP-sCAP、CPP-s GP、GP-sCAP和GP-sCPP共6个复方,比较它们的体内/外增强免疫活性能力。体外试验,用MTT法测定6个复方对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响;体内试验,进一步比较了筛选出的3个复方对新城疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖,血清抗体效价,IL-2、IL-6和IFN-γ含量的影响。[结果]体外试验结果显示:单独或与植物血凝素(PHA)共同刺激时,6个复方均有不同程度的增强免疫活性,CAP-sCPP、GP-sCPP和CPP-sCAP的活性较强;体内试验结果显示:在免疫后7、14、21和28 d,GP-sCPP高剂量促进T淋巴细胞增殖的作用最强,血清抗体效价和IL-2、IL-6及IFN-γ含量均为最高,且均显著高于免疫对照组。[结论]GP-sCPP的增强免疫活性最强,可以考虑作为新型免疫增强剂的候选方。     

麦谷蛋白源外啡肽B5对肉鸡免疫功能的影响

麦谷蛋白源GE-B5来源于日常人类饮食中的主要粮食产品小麦的蛋白酶解产物,具有阿片样的生物学特性,目前已经发现其有调节激素分泌进程,进而调节内分泌系统;延缓哺乳动物胃排空,抑制其肠道运动;具有一定的免疫反应性等功能。麦谷蛋白源GE-B5属于阿片样物质中免疫反应性最强的一种外啡肽。试验根据麦谷蛋白源GE-B5氨基酸结构,采用人工合成的方式,优化工艺制得高纯度的麦谷蛋白源GE-B5;将制得的GE-B5添加到传染性支气管炎灭活疫苗中作用于肉仔鸡,通过对鸡淋巴细胞增殖测定及鸡血清中抗体效价的检测,以判定麦谷蛋白源GE-B5的免疫效果。结果表明,人工合成的麦谷蛋白源GE-B5纯度高、成本低,一定浓度的GE-B5可明显促进鸡外周血淋巴细胞增殖和血清抗体水平。因此,麦谷蛋白源GE-B5具有一定的免疫增强作用。     

硫酸化香菇多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响

试验Ⅰ:免疫应答试验:取450只雏鸡随机均分为9组,在14日龄用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化香菇多糖(sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3)和香菇多糖(LNT)。分别于首免前和首免后连续6周检测血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。试验Ⅱ:免疫保护试验:取350只雏鸡随机均分为7组,除非免疫组外其余组用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时3个sLNT组和LNT组分别注射sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3和LNT。于免疫后第21天,除无佐剂对照组第2组外各组鸡均肌肉注射NDV强毒攻毒,观察保护效果,并分别于攻毒前和攻毒后第3、6、9、12和15天测定血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明:3种sLNT在首免后28 d内比LNT显著提高血清抗体效价最高2个滴度(高剂量的效果优于低剂量),促进淋巴细胞增殖(低剂量的效果强于高剂量);攻毒鸡发病率和死亡率降低,保护率提高最多达17.5%,加速攻毒后血清抗体生成和T淋巴细胞增殖,病鸡最快可以在攻毒后6 d恢复正常。综合评价以sLNT_2的效果最好。揭示:硫酸化修饰能显著提高LNT的免疫增强活性,增强新城疫疫苗的...     

天门冬多糖对人工感染鸡传染性支气管炎的治疗试验

旨在评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的临床治疗效果,为鸡传染性支气管炎临床治疗提供依据。以复方天门冬多糖注射液临床给药剂量筛选试验为基础,分别设置高剂量组、中剂量组、低剂量组、药物对照组、阳性对照组及空白对照组,运用t检验和方差分析法对攻毒前后试验动物的相对体质量及试验结束后免疫器官指数进行统计分析,通过比较各组数据的显著性差异来评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的治疗效果。结果显示,复方天门冬多糖注射液能提高发病鸡的相对增量率,并促进发病鸡的生长发育。说明,复方天门冬多糖注射液对患病鸡的临床治疗效果显著,在实际生产中可以推广应用。     

鸡J亚群白血病病毒与网状内皮增殖病病毒混合感染发病机理的研究

通过人工感染建立了ALV—J、REV单独感染和混合感染1日龄肉仔鸡的病理模型。初步研究表明混合感染使试验鸡的生长发育障碍、免疫器官萎缩、对细菌易感性及死亡率等指标显著升高。 动态病理学研究表明：REV感染主要引起骨髓网状细胞及淋巴样细胞弥漫性或灶状浸润,ALV—J感染主要引起骨髓髓系细胞灶状或弥漫性显著增生,混合感染时骨髓病变与REV感染基本一致,但相对较严重,并见ALV—J感染病变。各病毒感染组免疫器官均发生了严重的实质萎缩性病变,病变以混合感染组最重,REV组次之。在某些组织器官ALV—J组见嗜酸性粒细胞样的瘤细胞浸润增生,REV组见网状细胞及淋巴细胞样瘤细胞浸润增生,而混合感染组见以上两种瘤细胞增生。从混合感染组的病变来看,在致病性上ALV—J与REV之间的确存在明显的协同促进作用,导致机体的免疫抑制加重,但混合感染早期尚未发现REV对ALV—J致瘤的促进作用。     

复方中药对感染NIB鸡淋巴细胞刺激指数的影响

为了探明由熟地等组成的复方中药对感染肾型传染性支气管炎雏鸡免疫功能的影响规律,将雏鸡随机分为6组(空白对照组,攻毒对照组,西药治疗组,复方中药低剂量、中剂量、高剂量治疗组),分别于给药后3、6、9、14、19d采集血样,测定血液中T、B淋巴细胞的刺激指数。结果表明:试验用复方中药不仅可以提高人工感染肾型传染性支气管炎雏鸡T淋巴细胞的刺激指数,而且可使该雏鸡B淋巴细胞的刺激指数恢复到正常水平。结果还表明,试验用复方中药可以提高人工感染肾型传染性支气管炎雏鸡的细胞免疫功能,并可使该雏鸡体液免疫功能得以恢复。     

鸡γ-干扰素与新城疫病毒F蛋白抗原表位融合基因的构建与表达

[目的]研究鸡γ-干扰素（ChIFN-γ）的免疫佐剂功能,构建ChIFN-γ与新城疫F蛋白抗原表位（NDV F2-3）的融合基因,并进行原核表达。[方法]以头尾相连的方式构建鸡γ-干扰素基因与NDVF2-3的pET-32a重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组子在E.coliBL21细胞进行IPTG诱导融合蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot方法分别检测表达的产物。[结果]获得了726 bpChIFN-γ与NDVF2-3融合基因,经原核表达,融合蛋白分子量约为35 000,能与相应的抗体结合。[结论]ChIFN-γ与NDVF2-3串联基因在原核细胞中能有效表达,且融合蛋白具有一定的免疫活性。     

野生蛹虫草与培植蛹虫草SOD酶活力的对比研究

[目的]为蛹虫草的进一步开发和利用提供依据。[方法]采用改良的邻苯三酚自氧化法,测定比较野生蛹虫草菌丝体、子座与培植蛹虫草菌丝体、子座之间的SOD酶活力。[结果]野生蛹虫草菌丝体的SOD酶活力(64.3 U/ml)明显高于子座的SOD酶活力(47.1U/ml),培植蛹虫草菌丝体的SOD酶活力高于子座的SOD酶活力。野生蛹虫草不同部位的SOD酶活力均高于培植蛹虫草的相应部位,但差距不大,说明培植蛹虫草的栽培技术已日益成熟,培植蛹虫草发酵菌丝体是其发展的重点。[结论]在野生蛹虫草资源日益缺乏的今天,培植蛹虫草完全可以取代野生蛹虫草发挥其保健治疗作用。     

人工感染鸡传染性支气管炎病毒对鸡血清生化指标的影响

用传染性支气管炎病毒M41株对鸡进行攻毒,然后检测其血清生化指标的变化情况,并与对照组比较.结果表明:攻毒组鸡血,清中的谷草转氨酶、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶同工酶、尿酸、尿素氮和磷极显著升高;甘油三脂、钙、碱磷酶和总胆红素极显著降低,白蛋白和γ-谷氨酰转移酶显著降低,其余指标变化不明显.     

鸡γ-干扰素的克隆·表达和序列分析

[目的]为鸡γ-干扰素的进一步研究奠定基础。[方法]根据GenBank发表的鸡γ-干扰素核苷酸序列,设计1对特异性引物。利用RT-PCR技术从ConA诱导培养的鸡脾脏淋巴细胞中克隆鸡γ-干扰素基因,并在IPTG诱导下在大肠杆菌中表达重组菌。[结果]克隆的鸡γ-干扰素基因全长495bp,编码165个氨基酸,与国外克隆的鸡γ-干扰素基因序列的同源性为100%。鸡γ-干扰素蛋白含有12个α螺旋,3个β折叠,7个β转角。它具有强抗原性,而第16～23位氨基酸无抗原性。重组蛋白的分子量约18kD,其经IPTG诱导表达4h后,表达量最高,表达产率高达25%。[结论]鸡γ-干扰素具有一定的抗原性,预示其在免疫反应中起一定作用。     

杨树皮类脂对感染鸡传染性贫血病毒鸡外周血T细胞亚群含量的影响

[目的]从细胞免疫学角度探讨杨树皮类脂(PBL)对改善感染鸡传染性贫血病毒(CIAV)鸡的免疫器官的细胞免疫水平的影响。[方法]以人工感染与未感染CIAV的1日龄SPF鸡作为试验模型,分别连续饲喂PBL 7 d,在第7、27、47天采用流式细胞术检测外周血中CD4+和CD8+的含量,并计算CD4+/CD8+。[结果]PBL能够增加健康SPF雏鸡外周血的CD4+T淋巴细胞的数量,提高非特异性细胞免疫功能和体液免疫功能。[结论]杨树皮类脂对CIAV诱导的免疫抑制雏鸡外周血的CD4+和CD8+T细胞水平的降低具有一定抑制作用。     

芦荟多糖提高鸡免疫功能的研究

[目的]研究芦荟多糖对鸡免疫功能的作用。[方法]采用环磷酰胺复制雏鸡免疫抑制模型,通过多项免疫学指标检测,探讨芦荟多糖对正常、免疫抑制及新城疫疫苗免疫雏鸡免疫功能的影响。[结果]芦荟多糖可以增加健康雏鸡的增重,促进免疫器官胸腺、脾脏和法氏囊的发育,特别是胸腺的发育,对正常雏鸡血清IFN-γ和血清IL-2具有一定的诱生能力;芦荟多糖对于环磷酰胺引起的雏鸡免疫抑制试验显示,可以明显增加免疫抑制雏鸡的增重,能促进血清IL-2和IFN-γ的诱生,提高机体的抵抗力,特别是在高剂量对IL-2的诱生作用上差异显著（P〈0.05）;芦荟多糖能够提高ND抗体水平。[结论]芦荟多糖可以改善正常雏鸡的免疫状态、增重和细胞因子诱生水平。     

北冬虫夏草超微粉对小鼠免疫功能的增强作用

用北冬虫夏草超微粉饲喂昆明种小鼠,观察小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力等免疫功能的变化.结果显示:与对照(饲喂生理盐水)比较,低剂量(19.45 mg/kg)的北冬虫夏草超微粉能显著提高小鼠胸腺和脾脏指数、脾淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力(P＜0.05),说明北冬虫夏草超微粉对小鼠免疫器官、细胞免疫功能和巨噬细胞功能有明显的增强作用;北冬虫夏草超微粉增强小鼠免疫功能的作用不随剂量的增加而增加.     

魟鱼软骨多糖的免疫调节作用

[目的]观察魟鱼软骨多糖对小鼠免疫器官胸腺和脾脏重量的影响以及脾脏组织细胞IL-2、IL-6、IFN-γ细胞因子的表达水平。[方法]腹腔注射环磷酰胺（CY）造成小鼠免疫抑制模型,以香菇多糖为阳性对照,魟鱼软骨多糖（低、中、高剂量）,灌胃给药14 d,试验结束后称量胸腺和脾脏重量计算胸腺指数和脾指数,检测脾脏中细胞因子的表达情况：运用抗原对应抗体进行免疫组化SP法检测脾中IL-2、IL-6、IFN-γ细胞因子的表达水平。[结果]魟鱼软骨多糖能显著提高小鼠胸腺和脾脏重量,能拮抗环磷酰胺导致的免疫抑制,升高脾脏中细胞因子的表达水平从而提高机体的免疫功能。[结论]魟鱼软骨多糖对小鼠的免疫功能具有一定的调节作用,是一种良好的免疫调节剂。