Experimental Dual Infection of Specific Pathogen‐Free Pigs with Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus and Pseudorabies Virus

Twenty 6‐week‐old specific pathogen‐free pigs were divided into four groups. On day 0 of the experiment, PRRSV–PRV (n = 6) and PRRSV (n = 4) groups were intranasally inoculated with porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) (10^5.6 TCID₅₀). On day 7, the PRRSV–PRV and PRV (n = 6) groups were intranasally inoculated with pseudorabies virus (PRV) (10^3.6 TCID₅₀). Control pigs (n = 4) were kept as uninoculated negative controls. Half of the pigs in each group were euthanized and necropsied on day 14 or 21. Clinical signs such as depression and anorexia were observed in the PRRSV–PRV and PRV groups after inoculation with PRV. Although febrile response was observed after virus inoculations, the duration of that response was prolonged in the PRRSV–PRV group compared with the other groups. The lungs in the PRRSV–PRV group failed to collapse and were mottled or diffusely tan and red, whereas the lungs of the pigs in the other groups were grossly normal. Histopathologically, interstitial pneumonia was present in all PRRSV‐inoculated pigs, but the pneumonic lesions were more severe in the PRRSV–PRV group. Mean PRRSV titres of tonsil and lung in the PRRSV–PRV group were significantly (P < 0.05) higher than that in the PRRSV group on day 21. These results indicate that dual infection with PRRSV and PRV increased clinical signs and pneumonic lesions in pigs infected with both viruses, as compared to pigs infected with PRRSV or PRV only, at least in the present experimental conditions.     

猪繁殖与呼吸综合征和猪流感混合感染的诊断

通过流行病学调查、临床症状观察和病理剖检，结合血清学调查和病原学检测，对浙江省部分地区流行的“猪高热症”病因进行了探讨，初步认为这种疫情是由猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）和猪流感并发造成的，继发感染则加重了本次疫情所造成的损失。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染试验

为探讨单纯猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染与猪"高热病"及猪群死亡率的关系,用经检测为PRRSV阳性的猪病料接种2头断奶仔猪,每日测定体温,将发病猪处死剖检,用PCR方法进行PRRSV检测和ELISA检测抗体,发现攻毒猪均迅速出现持续高热症状,无死亡趋向,剖检试验猪以肺脏损伤为主,无细菌的继发感染,PCR检测P...     

上海地区猪场中家鼠PRRSV和CSFV带毒情况调查

从上海9家猪场内采集的46只家鼠的血清和组织样品,采用IHA、ELISA和RT-PCR方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的抗体及抗原进行了检测,结果均为阴性。由此说明家鼠对这两种病毒不易感,不可能作为PRRSV和CSFV的传播媒介和贮存宿主。     

猪繁殖与呼吸综合症病毒引发的免疫抑制

猪繁殖与呼吸综合症病毒主要侵害猪体的巨噬细胞系统,特别是肺泡巨噬细胞,使感染猪的免疫力降低,引发免疫抑制.但许多研究证明PRRSV引起的免疫抑制是暂时性的,仅在肺中并局限于一定的水平.由PRRSV引发的猪的呼吸道病常伴发细菌感染是PRRSV感染的一大特征.由PRRSV引起的免疫损伤和在合并症中各种病原微生物的关系在试验中没有得到复制,不同PRRSV毒株在诱发机体产生免疫抑制方面的差别也没有得到比较.所以在没有实验室证据前,应慎重看待PRRSV在诱发猪体产生免疫抑制方面的作用.     

猪繁殖-呼吸综合征病毒上海株的分离鉴定

从上海地区５个发病猪场的病料中,分离到３株致Ｍａｒｃ－１４５细胞病变的病毒：ＳＨ１、ＳＨ２和ＳＨ３,理化特性研究表明,３株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、热（５６℃）、酸（ｐＨ６以下）、碱（ｐＨ８以上）敏感。负染可见病毒以大小不等的具囊膜的球形粒子为主,囊膜上有纤突,直径为６０￣１００ｎｍ;超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为４５￣８０ｎｍ。间接免疫荧光试验表明,３株分离毒均与ＰＲＲＳＶ高免血清呈强阳性反应,而与ＨＣＶ、ＰＰＶ、ＰＲＶ、ＴＧＥＶ高免血清的反应均呈阴性。综上可见,所分离的病毒为ＰＲＲＳＶ。     

猪繁殖与呼吸综合症病毒的RT-PCR快速诊断技术研究

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)的N基因序列设计了一对引物,建立诊断PRRSV的RT-PCR技术。使用该方法对山东某些地区疑似为PRRS的28份送检样品进行检测,结果4份为阳性,证实山东存在PRRSV的流行。RT-PCR方法的建立为PRRS的快速、准确诊断以及进行分子流行病学的调查提供了新的技术手段。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒传统毒株与变异毒株的鉴别诊断

从山东各地猪场采集了50份疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)感染的病料,采用RT-PCR技术扩增出PRRS病毒(PRRSV)的ORF7基因和Nsp2基因,并对Nsp2基因进行了序列同源性比较和遗传进化树分析,从RT-PCR阳性病料中进行病毒分离,然后应用Nsp2单克隆抗体对分离毒株进行鉴别诊断。结果表明,从8份病料中同时扩增出病毒的ORF7基因和Nsp2基因,序列分析显示其中6株病毒的Nsp2缺失30个氨基酸,与Nsp2单克隆抗体不发生反应,属于变异毒株;另外两株病毒的Nsp2未见氨基酸缺失,与Nsp2单克隆抗体发生特异性反应,属于传统毒株。序列同源性和系统进化分析表明,6株变异毒株与其他高致病性毒株亲缘关系很近,而与经典毒株的遗传距离较远。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒传统毒株与变异毒株的鉴别诊断

从山东各地猪场采集了50份疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)感染的病料,采用RT-PCR技术扩增出PRRS病毒(PRRSV)的ORF7基因和Nsp2基因,并对Nsp2基因进行了序列同源性比较和遗传进化树分析,从RT-PCR阳性病料中进行病毒分离,然后应用Nsp2单克隆抗体对分离毒株进行鉴别诊断.结果表明,从8份病料中同时扩增出病毒的ORF7基因和Nsp2基因,序列分析显示其中6株病毒的Nsp2缺失30个氨基酸,与Nsp2单克隆抗体不发生反应,属于变异毒株;另外两株病毒的Nsp2未见氨基酸缺失,与Nsp2单克隆抗体发生特异性反应,属于传统毒株.序列同源性和系统进化分析表明,6株变异毒株与其他高致病性毒株亲缘关系很近,而与经典毒株的遗传距离较远.     

猪繁殖与呼吸综合症病毒的RT-PCR快速诊断技术研究

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）的N基因序列设计了一对引物,建立诊断PRRSV的RT—PCR技术。使用该方法对山东某些地区疑似为PRRS的28份送检样品进行检测,结果4份为阳性,证实山东存在PRRSV的流行。RT—PCR方法的建立为PRRS的快速、准确诊断以及进行分子流行病学的调查提供了新的技术手段。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株感染猪超微结构研究

利用透射电镜对山西省PRRSV变异株感染猪的肺脏、脾脏、肝脏、肾脏、淋巴结等组织进行超微病理变化的观察。试验结果发现,肺脏、脾脏、肝脏、肾脏、淋巴结各组织细胞均被不同程度地感染,各种细胞器遭受普遍的膜结构损伤,而以线粒体和细胞核变化较为严重。本研究为阐明PRRSV变异株感染猪的致病机理提供了理论依据。     

猪繁殖和呼吸综合征混合感染猪瘟的临床诊断和防制

2005年11月份,我市某猪场发生一起以高热稽留、全身皮肤发红、耳朵发绀、呼吸困难等为临床特征的传染病,曾用磺胺类、头孢类抗生素等多种药物治疗无效,死亡率较高,损失严重。经流行病学调查、临床症状、病理剖检和实验室检测,诊断为猪繁殖呼吸综合征混合感染猪瘟。采取扑杀深埋无害化处理病猪、强化健康猪猪瘟免疫、注射自家苗、药物控制等综合性防制措施,疫情得到了有效控制。现将诊治情况报道如下。1发病情况该猪场有4幢猪舍,分舍饲养母猪、仔猪和肥育猪,总存栏800多头生猪,其中母猪68头,哺乳仔猪170多头,保育猪220多头,育肥猪310多头,可…     

猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。现已遍及世界各主要养猪国家和地区,成为危害养猪业最严重的传染病之一。作者就猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理方面的研究情况作一综述,为诊断技术、免疫机理研究、疫苗设计和疫病防制提供借鉴。     

猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒双重RT-PCR检测方法的建立

为建立一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速、鉴别诊断方法,根据GenBank中已发表的2种病毒的基因组序列,选择病毒的保守基因各设计了一对特异性检测引物,建立了可以同时鉴别检测猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的双重RT-PCR方法.该方法能从猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒分别扩增出310 bp和161 bp的特异性片段,对2种病毒混合基因组同时扩增出310 bp和161 bp的特异性片段;该方法对猪乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;该方法最低可以检出0.2 pg病毒RNA含量.本研究建立的RT-PCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,在一个PCR反应体系中就可以准确、快速鉴别检测出猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒,可以用于临床病料的快速检测.     

猪生殖——呼吸综合征病毒研究进展

对猪生殖与呼吸综合征病毒新的分类地位,基因结构特点,病毒蛋白的功能、病毒在细胞的增殖过程,增殖特点、毒株变异等新进展及病毒独特的生物学行性作了综述,提出了病毒变异和毒力差异的分子基础是需要进一步研究的问题。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定

从辽宁某猪场采取病料,经处理后接种Marc-145细胞进行PRRSV分离,结果有2份病料在该细胞上盲传后可见典型的CPE,经测定其毒价为10^-6.5TCID₅₀/mL。间接免疫荧光试验可见黄色荧光,用电镜对纯化的病毒进行观察,可见有囊膜包裹的圆形病毒粒子,直径约为50~70 nm。该病毒对氯仿、紫外线、酸碱度变化和热敏感。对有CPE的细胞培养物进行RT-PCR,结果为阳性。接种试验动物出现典型的PRRS临床症状和死亡。结果表明,成功分离到一株PRRSV。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫生物学最新研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒是对养猪业危害最严重的病原之一,猪和野猪是其唯一的自然宿主,野猪可呈隐性携带传播病毒,在该病流行中的作用需要给予重视。近20 a来,有关免疫方面的研究比较多,尽管疫苗已经应用很多年,但是它却不能提供全面的保护作用。本文着重从病毒受体、抗病毒先天性免疫反应、病毒的免疫调节以及获得性免疫反应的特征与作用等病毒的免疫生物学方面展开讨论,并就未来的研究提出一些建议,希望对推动野猪养殖业的健康发展提供一定的帮助。     

猪繁殖与呼吸综合征致病机理的研究进展

PRRS(猪繁殖与呼吸综合征)复杂的发病机制包括抗体依赖性增强、引起机体免疫抑制和在机体内持续性感染等现象,以及病毒遗传多样性;这些是该病难以防控的主要原因,本文就近年有关进展进行综述。     

脂多糖对猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导的抗病毒免疫反应的影响

为研究脂多糖对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)诱导的抗病毒免疫反应的影响,本研究采用100 TCID₅₀的PRRSV感染猪肺巨噬细胞（porcine alveolar macrophage,PAM）,感染12 h后用100 ng/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理感染细胞,分别培养12、24、36、48 h后收集细胞及上清,同时设PRRSV组、LPS组和PAM细胞组,用河南农业大学兽医微生物研究室已建立的Real-time qPCR方法对LPS+PRRSV组和PRRSV组中PRRSV复制水平及各组PAM细胞中IFN-α、TNF-α mRNA转录水平变化进行定量分析。结果显示,LPS+PRRSV组与PRRSV组相比,PRRSV拷贝数12～48 h均较低,IFN-α mRNA转录水平显著升高（P＜0.05）,TNF-α mRNA转录水平升高,在48 h时转录水平降低。而与LPS组相比,LPS+PRRSV组IFN-α mRNA转录水平在12 h时升高,24、36、48 h均降低。结果表明,PRRSV感染PAM细胞经LPS刺激后,IFN-α、TNF-α mRNA转录水平显著升高（P＜0.05）,从而抑制了PRRSV在PAM细胞内的复制。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是1987年首先在美国北卡罗纳州的猪群中爆发的一种病毒性传染病,主要造成怀孕母猪流产、早产、产死胎,仔猪呼吸困难、高死亡率及成年猪的免疫机能障碍[1].国内外学者对其研究的不断深入,病毒的分子生物学研究方面取得了重要进展.PRRSV基因组的结构与功能得以明确,基因组所编码的蛋白及蛋白结构和PRRSV的基因变异进一步得以认识,基因工程疫苗的研究和分子生物学检测方法得到推动.