姬松茸原生质体的制备与分离

食用菌原生质体的制备与分离是进行食用菌菌种选育的新途径之一。本文通过探讨不同因素 :菌丝体、培养基、时间、稳定剂、酶的种类与浓度等对姬松茸原生质体制备的影响 ,确定了姬松茸原生质体制备条件为 :MC培养基、培养 6d菌丝体、 0 6mol/LKCl稳定剂、0 5 %溶壁酶和 2 %Novo2 34作用 3h。     

松口蘑(松茸)菌种的分离培养试验

本文以松茸的子实体、菌根作为分离材料 ,采用多种分离方法 ,在不同配方的培养基上反复培养试验 ,获得松茸试管母种 ,分离成功率达 5 0 %以上。并将母种扩大培养成为液体菌种、固体菌种 ,实现了规模化生产松茸菌丝体。为合成松茸菌根化苗木造林 ,实现松茸半人工模拟栽培打下了基础     

松茸菌丝体的纯培养及其鉴定

采用组织分离法,对采自云南中甸、丽江、武定、巍山4个地方的松茸进行了分离培养,并利用感官及ITS测序对所培养的菌丝进行了鉴定。结果表明,利用斜面培养基很好地诱导出了菌丝体母种,诱导率达75%;而将分离培养得到的菌丝体进行液体培养,菌丝生长良好,且能进行转扩和较大规模培养;液体培养的菌丝体仍具有松茸的特殊气味,证明可能为松茸的纯培养物;经ITS测序比较,采自中甸、丽江、武定、巍山的松茸子实体和其液体培养的菌丝体,其遗传相似度分别为0.9970、1、0.9980、0.9980,表明取自不同地点的子实体与其相应的培养物在种质上是一致的。     

一种红菇属野生菌的分离培养与鉴定

对采自云南楚雄的1种野生红菇属真菌的子实体进行组织分离,获得的菌丝体经纯化培养后进行液体培养,培养的菌丝体用于ITS鉴定。结果表明:改良的PDA培养基对红菇分离效果最佳,红菇菌丝白色、菌落较小,长势极慢;液体培养菌丝体生长缓慢,培养时间较长;菌丝球经过分子鉴定后确定为绒紫红菇(Russula mariae)。     

贺兰山野生柳黄蘑菌丝分离试验

对野生柳黄蘑子实体分离部位、菌丝体分离培养基质、菌丝体生长温度、培养基酸碱度试验,结果表明：野生柳黄蘑的菌褶和菌柄交界处部位是最佳的组织分离部位;小麦-蛋白胨培养基为最佳母种培养基。菌丝体适宜生长的温度10～28℃,最适温度是24℃;柳黄蘑菌丝体适宜酸碱度pH6．0～8.0,最适酸碱度范围pH6.5～7．0。     

致命鹅膏菌的菌种分离及人工培养研究

致命鹅膏(Amanita exitialis)是一种产于中国南方的剧毒蘑菇．本研究首次用组织分离的方法获得了该菌的菌种。来自子实体上不同部位的组织都能用于分离．但用幼子实体上的菌褶分离效果最佳。试用六种培养基培养其菌丝体，其中以改良PDM为最佳。最佳培养温度为26℃。最适DH值为5．0，在1000mL的培养基中添加20g葡萄糖对菌丝生长最为有利。菌丝产量在培养到70d时达到最大。     

野生白蘑菌丝分离试验

采用组织分离法对野生白蘑子实体分离部位、菌丝体分离培养基、菌丝体生长温度、培养基酸碱度进行试验.结果表明:野生白蘑的菌褶和菌柄交界处部位是最佳的组织分离部位；小麦-蛋白胨培养基为最佳母种培养基.菌丝体适宜生长的温度15～30℃,最适温度是25℃；白蘑菌丝体适宜酸碱度pH6.0～9.0,最适酸碱度范围pH6.5～7.5.     

贺兰山紫色丝膜菌菌丝分离培养

对紫色丝菌菌丝子实体部位纯种分离、母种培养基质筛选、菌丝体生长温度试验、培养基酸碱度试验,结果表明:野生紫色丝膜菌菌褶部位是最佳的组织分离部位;加入牛肉浸膏培养基为最佳母种培养基。菌丝体适宜生长的温度10~28℃,最适温度是25℃;菌丝体适宜pH 6.0~8.0,最适pH 6.5~7.0。     

松茸菌丝体生长的营养特性

本文设计了松茸菌丝体生长的基因培养基，采用液体培养方法，研究了14种氮源物质、20种碳源物质和22种生长因子类物质对松茸双核菌丝体生长的影响。结果表明，麦芽汁、糖蜜及麸皮麸皮浸出液、蛋白胨等可作为松茸菌丝体生长的较理想的碳源或氮源物质，酵母膏和松根浸出液对松茸菌丝体的营养生长有明显的促进作用。     

野生杨口蘑菌丝分离试验

针对杨口蘑菌丝体分离困难，分离成活率低问题，采用4种培养基配方，对张家口地区杨口蘑子实体的不同部位进行组织分离。结果表明，菌褶为最佳分离部位，获得慢生型菌丝体分离菌株，从菌柄基部获得3支快生型菌丝体分离菌株，杨树枝叶浸汁＋PDA培养基为最佳培养基。     

不同培养基对松口蘑菌丝生长的影响

以PDA为基础,分别加入松口蘑土、松枝、松针、糙皮侧耳菌丝和Fu浸汁,制备成琼脂培养基,对照PDA和浜田氏培养基培养松口蘑纯菌丝。结果表明糙皮侧耳菌丝麦Fu汁培养基的效果明显优于包括浜田氏培养基在内的其它配方,松口蘑土培养基也有良好表现。松口菌丝在不同培养基上形成的菌落特征也不尽相同。进一步的试验结果表明,在采用几种不同真菌菌丝为原料制成的菌丝麦Fu汁培养基上,松口蘑菌经线生长速度的差异并不明显。     

RAPD标记在松口蘑菌丝体鉴定中的应用

利用筛选的分离培养基从4个长白山松口蘑菌褶中各自分离了菌丝体,应用RAPD标记对其真伪进行了鉴定.结果表明：分离的菌丝体是其来源松口蘑子实体的纯培养物;所选培养基可用于松口蘑菌丝体的分离;长白山松口蘑子实体之间遗传差异较大.     

长白山区松口蘑分布及生态研究

本文调查了长白山区松口蘑的分布状况,发现了一些新的松口蘑产区,研究了植被土壤等生态特征,讨论了松口蘑的适应性和驯化潜能等前沿问题。     

云南出口新鲜松茸产地属性DNA指纹图谱构建

收集19个出口松茸主产地的97个样本,使用逆转录因子的DNA分子标签对样本基因组进行PCR扩增;为尽可能区分原产地,对某些产地的样本增加先使用限制性内切酶处理基因组DNA,再次使用逆转录分子标签的步骤。采用全自动DNA分析系统获得一系列DNA指纹图谱。通过比较分析找到同一地理居群共有的DNA指纹图谱特征以及酶切前后的图谱差异。这些指纹图谱特征与松茸原产地间存在显著相关性。     

松茸人工促繁技术研究

在松茸生长的林地里，以不同的腐殖质厚度、郁闭度、菌种处理为因子，开展正交实验，比较松茸子实体的数量、产量、菌塘增殖情况。结果表明每50m^2的松茸林地每年留一个开伞菌、使松茸林地的郁闭度在0．6、腐殖质厚度在3-5cm最有利于松茸的生长发育。     

不同地区四种松茸子实体可溶性蛋白的电泳分析

以西南地区不同产地的4个松茸子实体为材料，用垂直平板聚丙烯酰胺胺凝胶电泳分析了其可溶性蛋白，结果表明，采自不同地区的松茸子实体可溶性蛋白的电泳图谱谱带间存在差异。其中，采自四川通江和重庆的松茸子实体谱带相似，采自云南凯顺与云南昌明的松茸子实体谱带相似，而采自四川通江和重庆的松茸子实体与采自云南凯顺和昌明的松茸子实体，其谱带间差异较大。     

白马雪山自然保护区松茸生长利用研究

通过对白马雪山保护区北部叶日的松茸生境、生长的研究以及在当地社区进行松茸资源的采集利用调查，提出了保护和合理化利用松茸资源的对策。     

基于全产业链视角的松茸产业经济效益分析

为推动松茸产业的经济发展,提出基于全产业链视角的松茸产业经济效益分析方法,分别从松茸的原生地保护扩繁、加工、销售等多个环节构建松茸全产业链;设置松茸产业经济效益的分析指标,并从投入和收益2个方面得出估算结果,通过计算投入与收益之间的比值得出松茸产业经济效益的分析结果。将设计的分析方法应用到实际产业经营工作当中,与往年相比年收益额提高了约27.21%。     

中国三省松口蘑遗传多样性分析

采用ITS、mt SSU rDNA的V4和V9区对采自西藏、吉林和云南3个省份30个地区的59个样本进行物种鉴定,并运用IGS1-RFLP和RAPD进行遗传多样性分析。结果表明:所有样本均为松口蘑(Tricholoma matsutake),松口蘑ITS序列存在明显的地域性;IGS1-RFLP分析表明,吉林样本属于A型,西藏和云南样本是2种新类型;聚类分析表明,在相似系数为0.702水平时将供试样本分为3大类群;我国松口蘑具有丰富的遗传多样性,并且自然种群遗传多样性地域性明显。