猪流行性腹泻病毒的特性研究

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)引起的一种严重的病毒性传染病。对于大多数的病毒性腹泻疾病来说,防治措施一般选择疫苗免疫。近年来,有关猪流行性腹泻病毒疫苗的研究已经取得了一定的进展,包括灭活疫苗、弱毒疫苗、转基因植物疫苗、乳酸杆菌疫苗、亚单位疫苗和联合疫苗等。实验参照2010年版《中华人民共和国兽药典》第3部的要求对该病毒的特性进行了系统研究与记录,为PEDV HLJBX株可作为弱毒疫苗候选株的研究提供了进一步的参考资料。     

猪流行性腹泻防控研究概况

猪流行性腹泻病毒(PEDV)主要的致病特点是引起仔猪急性腹泻、呕吐、脱水及死亡,PEDV的感染也可引起怀孕母猪腹泻、厌食,从而影响母猪的正常繁殖功能。自2010年以来,PEDV变异毒株的流行已对全球的生猪产业造成严重影响,而已有的防控措施已经不能应对新的流行态势。近年来,针对PEDV变异毒株流行变化以及防控措施的研究越来越多,许多新的技术及手段已经应用到本病的控制中。论文以此为基础,分析了当前猪流行性腹泻病毒的流行特点,重点讨论不同检测方法和疫苗制剂的研究进展,以及其应用于变异毒株防控中的现状及前景。     

猪流行性腹泻病毒疫苗研究进展

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是引起仔猪严重肠道疾病的主要病原,对仔猪具有极高的致死率,给全球养猪行业造成难以估量的经济损失。疫苗作为疫情防控中最有效的手段,其研发工作备受关注。从传统疫苗到基于DNA重组技术诞生的基因工程疫苗如亚单位疫苗、活载体疫苗、转基因植物疫苗以及第3代疫苗,在遏制PEDV疫情蔓延方面均发挥着重要作用。近些年,PEDV疫苗研发取得显著成绩,现对PEDV各种类型疫苗取得的研究成果展开系统回顾,并探讨和展望纳米颗粒在PEDV疫苗开发中的应用前景,以期为猪场PEDV的综合预防提供参考。     

国内外猪流行性腹泻病毒和其他猪冠状病毒疫苗研究进展

中国近几年受猪流行性腹泻病毒(PEDV)影响较大,而最近,PEDV进入北美猪群,再次增加了养猪从业者对猪冠状病毒有效疫苗的需求。虽然世界各地的生产商已经可以生产传染性胃肠炎病毒(TGEV)疫苗,但是专门针对猪流行性腹泻病毒和猪啄冠状病毒的有效疫苗只是最近才开发出来或者仍然在开发中。因此,我们总结了现有的国内外猪冠状病毒疫苗技术,并重点介绍有前景的技术,这些技术将来可能有助于控制这些重要的病毒。     

猪流行性腹泻及新型疫苗研究进展

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）是危害养猪业健康发展的重要疾病之一,具有急性、高度传染性的特征,给养猪业造成了严重的经济损失。猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）感染会破坏动物机体的消化系统,造成患病猪食欲下降、呕吐以及严重腹泻等,且药物治愈后的仔猪也会因为生长发育不良等因素严重影响生产,给养殖户带来巨大的困扰。2010年PEDV高致病变异毒株在中国暴发流行,导致PED的发病率和死亡率大幅升高,严重影响中国养猪生产。此次PED的暴发流行引起了养猪行业的密切关注,相关研究领域的学者对PEDV致病机制和PED新型疫苗进行了更加深入的研究,亚单位疫苗、病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、转基因植物疫苗和核酸疫苗5种PED新型疫苗相继被开发,并取得全新的突破和进展。与传统的PED灭活苗和PED弱毒疫苗相比,PED新型基因工程疫苗具有安全性好、制备简单、免疫效果好等优点。文章着重对PEDV发病机理和5种PED新型疫苗的研究进展展开综述,从而加深对PEDV和PED新型疫苗的了解,以期为PEDV感染的预防和控制措施提供参考。     

猪流行性腹泻病毒RNA帽子甲基化对诱导宿主先天免疫应答的影响

正猪流行性腹泻(PED)是临床上最常见、最严重的猪肠道病毒性传染病之一,其病原为猪流行性腹泻病毒(PEDV)。PEDV可感染各年龄阶段猪群,引起剧烈呕吐、水样腹泻及脱水。PEDV是α冠状病毒属成员,基因组为单股正链RNA,其变异速度较快,疫苗很难提供完全保护,因此抗PEDV的药物及新型高效疫苗的研发对PED的防控至关重要。     

猪流行性腹泻病毒分子特征、基因分型及流行现状

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是引起仔猪严重肠道疾病的病原之一,新生仔猪感染后常引起致死性水样腹泻、呕吐、出血性肠炎,死亡率高达100%,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。2010年,高致病性PEDV变异毒株的出现与流行造成猪流行性腹泻(PED)在全球的再次暴发,以经典毒株为抗原的流行性腹泻疫苗无法有效控制高致病性变异毒株的流行。文章综述了PEDV基因组结构与蛋白功能、基因分型与流行现状,以期为PEDV新型疫苗的研究提供参考。     

PEDV疫苗株与野毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立及临床应用

根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗株和野毒株在ORF3基因上的差异,我们设计了一对引物用于建立PEDV疫苗株和野毒株的RT-PCR鉴别诊断方法,其中疫苗株PCR扩增产物长度为213 bp,野毒株为262 bp。特异性试验结果表明,该引物对猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的扩增均为阴性。2014年3月至2015年4月期间利用该方法对河南省51家猪场的581份腹泻样本进行检测,结果发现,PEDV总阳性率为54.9%(391/581),其中野毒株阳性率84.9%(332/391),疫苗株阳性率为15.1%(59/391),说明当前腹泻样本中的PEDV检出率依然较高,且在这些PEDV阳性病料中以野毒感染为主。     

我国猪流行性腹泻病毒流行现状及分子遗传演化特征

猪流行性腹泻（PED）是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的,以腹泻为主要症状的急性肠道传染病,是长期以来危害我国养猪业健康发展的常见疾病之一。PEDV通过基因插入、缺失和重组等方式不断发生演化和变异,高致病力毒株、变异毒株不断出现,各类毒株之间的抗原性存在明显差异,导致临床上猪腹泻情况更加复杂。自2010年10月以来,由PEDV变异株引起的PED在我国大规模暴发流行,用经典毒株制备疫苗的免疫效果并不理想,因而造成重大经济损失。本文综述了PEDV在我国的流行现状及分子遗传演化特征,旨在为PED疫苗和诊断试剂研发提供参考。     

猪流行性腹泻防控失败的原因分析

2010年冬季,猪流行性腹泻病毒(PEDV) GⅡ基因型在国内开始流行,引起哺乳仔猪呕吐、严重腹泻和脱水,死亡率高达100％,给我国养猪业造成了严重的损失.临床免疫证实,基于PEDV GⅠ基因型(CV777和DR13)的传统疫苗不足以对当前流行毒株提供完全保护,基于当前流行的PEDV GⅡ基因型的疫苗对仔猪流行性腹泻有...     

猪流行性腹泻病毒野毒株及弱毒疫苗株RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用

为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)野毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV野毒株及弱毒疫苗株的ORF3基因序列,在缺失区的两端设计合成1对特异性扩增引物,用以特异性的扩增PEDV ORF3基因片段,根据目的片段大小判断PEDV的毒株类型;通过退火温度等反应条件优化,建立了区分PEDV野毒株和弱毒疫苗株的RT-PCR鉴别检测方法。结果显示:所建立的RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分PEDV野毒株和弱毒疫苗株;PEDV野毒株扩增出234 bp目的片段,PEDV弱毒疫苗株扩增出185 bp目的片段;与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、A群猪轮状病毒(PRo VA)、猪嵴病毒(PKV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;敏感性试验显示,该方法能检测到病毒滴度为1.3×10~3TCID_(50)/mL。利用该方法对采集自广西部分地区93份临床腹泻样品进行检测,临床腹泻样品中PEDV野毒株阳性率为61.29%(57/93),弱毒株阳性率为5.38%(5/93)。结果表明:该RT-PCR鉴别检测方法特异性强、灵敏度高、操作简便,能快速、准确地区分PEDV自然感染野毒株和弱毒疫苗毒株,为猪流行性腹泻的快速诊断及病原分子鉴别检测研究提供了可供借鉴的技术手段。     

猪流行性腹泻疫苗研究进展

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED),是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种肠道传染性疾病。其主要临床特征为水样腹泻、呕吐和脱水。近年来,在全球范围内广泛流行,且在亚洲东南部的流行趋势最为广泛,给全球范围内养猪业带来了严重的经济损失。目前,最为有效的防治手段是疫苗接种,PED疫苗已经从灭活苗、弱毒苗发展到了基因工程疫苗。主要综述了猪流行性腹泻疫苗的研究进展,以期对以后的疫苗研发提供参考。     

猪流行性腹泻病毒YT1401株分离鉴定及分子进化分析

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种引起猪腹泻的病原体,但由于引发该病的病原体众多、病因复杂,仅通过临床症状和病理组织学变化并不能对PEDV确诊,本研究参考40株PEDV基因设计了1对能高效扩增该N基因片段的引物,建立了PEDV分子诊断方法。并采用该方法从山东烟台某猪场的腹泻样本中检测获得了1株PEDV,采用分段重叠策略扩增获得了该毒株全基因序列,并在此基础上分析了该毒株全基因序列以及S基因的遗传进化关系。所有分析结果均表明,本研究分离获得的PEDV毒株与经典毒株比较发生了重大变化,为新的变异株。该结果提示我们,采用PEDV经典毒株或是早年分离的毒株制作的疫苗并不能有效防控当前流行的PED,研制以当前流行毒株为背景研制新型PEDV疫苗势在必行。     

我国猪流行性腹泻疫苗研究与应用现状

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起仔猪的一种急性、高度接触性、病毒性肠道传染病,自2010年末以来由PEDV变异毒株引起的腹泻疫情给我国养猪业造成了巨大的经济损失,加强PEDV的综合防控工作对保障仔猪健康以及我国养猪业快速发展至关重要。文章综述了我国研究学者在PED疫苗方面的研究与应用现状,以期为新形势下进一步开展PED疫苗的研发提供借鉴与参考,对制定和优化我国PED综合防控措施具有一定的参考价值。     

猪流行性腹泻病毒河南流行株S基因的克隆与遗传进化分析

近年来,我国大多省市暴发新生仔猪严重流行性腹泻,给养猪业造成巨大经济损失。为分析猪流行性腹泻病毒(PEDV)在河南省的流行和遗传变异情况,本研究对2014—2015年收集的30份临床腹泻样品,进行RT-PCR检测,对检测为阳性的PEDV样品进行S基因的克隆与序列分析。结果表明,30份临床腹泻样品中,RT-PCR检测出22个PEDV阳性样品,克隆的22条PEDV S序列与GenBank中发表的29条PEDVS基因序列核苷酸同源性为93.1%~99.2%。与经典毒株相比,22株河南流行株在S1区域存在碱基的插入、缺失现象;S基因遗传进化树表明,PEDV分为2群,河南流行株均属于PEDVП群,与近年国内分离株和韩国野毒株有较近亲缘关系,而与欧洲株以及中国目前使用的疫苗株亲缘关系较远,基因差异较大。     

我国部分省份猪流行性腹泻的流行病学监测

[目的]为摸清我国猪群流行性腹泻的感染状况,[方法]从2011年底到2014年3月,对云南、广西等29个省份开展了猪群腹泻疫情流行病学调查,采集、收集了发生腹泻症状的发病猪群样品（新鲜粪便、肠道组织等）,进行了猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）等多种病原检测。[结果]在7021个调查猪场中,出现腹泻的阳性猪场4060个（57.83%）。在收集的1383份腹泻样品中,利用RT-PCR方法检测到PEDV阳性样本686份（49.58%）,其中腹泻发病猪样品中PEDV的检出率为67.82%,675份组织样品共检测出PEDV阳性样本86份（12.75%）。[结论]这表明我国猪场PEDV的感染十分普遍。对S基因进行分子流行病学分析发现,我国PEDV流行毒株与已有PEDV毒株可以分为2个完全不同的进化分支G1和G2,G1以CV777和DR13等疫苗株和早期毒株为主,G2则以2011-2013年流行毒株为主,流行毒株之间的同源性为97.8%-100%,与疫苗株CV777之间的同源性为94.3%-94.5%。     

分泌抗猪流行性腹泻病毒中国变异株S蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

以纯化的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)中国变异株(CH/ZMDZY/11)S蛋白N端高变区(22-380aa)重组蛋白为抗原免疫BALB/C小鼠,以纯化CH/ZMDZY/11全病毒及带His标签的重组蛋白分别为筛选抗原,利用淋巴瘤杂交技术获得了一株稳定分泌抗S蛋白特异性单克隆抗体细胞株,命名为2D1。该株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价为1∶3 200,免疫球蛋白类型为IgM。ELISA检测该单抗与PEDV流行株及PEDV CV777疫苗株全病毒的反应显著差异,可区分流行毒株和疫苗毒株;但该单抗用于Western blot不能区分PEDV流行株和疫苗株。ELISA及Western blot试验结果显示,该单抗有较好的PEDV特异性,可用于检测PEDV。     

猪流行性腹泻病毒结构蛋白及其在侵染宿主细胞中的作用

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea, PED)的病原,PEDV可导致猪的急性腹泻、脱水甚至死亡。如今PEDV已成为引起猪腹泻最常见病原体之一,给我国养猪行业造成极大的经济损失。PEDV的四种结构蛋白在病毒结构、感染宿主、复制和组装过程中发挥着重要功能,同时在逃避宿主天然免疫方面也起着重要作用。阐述了PEDV四种结构蛋白Spike(S)蛋白、Membrane(M)蛋白、Nucleocapsid(N)蛋白、Envelope(E)蛋白在病毒感染中与宿主细胞的互作机制,为PEDV防控以及疫苗研发等提供理论研究基础。     

USDA(美国农业部)批准首个PED疫苗

<正>近日,美国农业部动植物健康检验局(APHIS)向位于爱荷华州埃姆斯(Ames)的Harrisvaccines公司所研发的一款用于帮助控制猪PEDV(猪流行性腹泻病毒)的疫苗颁发了有条件的许可。这是首个通过许可的PEDV疫苗。这款疫苗用于接种母猪,使母猪体内产生抗体,抗体通过奶水到达新生仔猪体内,以此来保护仔猪免受PEDV侵害。     

猪流行性腹泻病毒结构蛋白及疫苗的研究进展

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)由冠状病毒引起,患病仔猪以呕吐、腹泻、脱水为特征,具有较高的致死率,给生猪的发展带来了巨大的经济损失,故防制PED非常重要。PEDV S、E、M、N蛋白是病毒粒子的结构蛋白,在体外能自我装配成病毒样颗粒(VLPs),并能刺激机体产生抗PED中和抗体,所以研究PED结构蛋白对PED新型疫苗研制至关重要。本文对PEDV结构蛋白分析及疫苗研究进行了综述,为PEDV的深入研究提供参考。