鸡beta-defensin基因片段的序列鉴定及分析

防御素是一种富含半胱氨酸的阳离子抗菌肽,是先天免疫的重要分子。鸡体内所含的防御素一共有13种,全部属于β防御素。本实验利用RT-PCR技术扩增出来航鸡的骨髓、肝脏、肾脏中所含防御素片段,并进行测序比对,同时对鸡β防御素的蛋白质分子结构、组织分布、表达调控及其生物学功能进行了介绍。     

猪源β-防御素2和3的研究进展

防御素是一类阳离子抗菌肽,广泛存在于动物和植物体内。猪源β-防御素2和β-防御素3能抵抗猪体内病原微生物,并能调节机体免疫功能,对生殖发育也有一定的生理作用。猪源β-防御素2能促进仔猪生长,对猪红细胞毒性低,能在毕赤酵母中高效表达,其转基因猪也具有较好的抗病性能。因此,猪防御素具有潜在的应用价值。本文就猪源β-防御素2和β-防御素3在体内的表达分布和调控因素、参与调节的信号通路、在生殖发育和畜牧养殖方面的新功能及应用潜力进行综述。     

瓢鸡3个防御素基因（AvBD4、AvBD5、AvBD14）的Bi-PASA分子标记与沙门菌易感性的相关性研究

研究以3个防御素基因(AvBD4、AvBD5、AvBD14)为鸡沙门菌易感性候选基因,以瓢鸡成年鸡沙门菌阳性群体与阴性对照群体为研究对象,采用序列测定和双向PCR扩增特异等位基因标记(Bi-PASA)技术,分析了3个防御素基因变异与沙门菌易感性的相关性。结果显示:在瓢鸡每个防御素基因编码区均检测到一个引起氨基酸变异的多态位点,分别建立了3个防御素基因的Bi-PASA分子标记;AvBD5基因A799G位点与瓢鸡沙门菌易感性的相关性达到极显著水平(P=0.0039),AvBD14基因的A2096T位点达到显著水平(P=0.017),而AvBD4相关性不显著(P=0.599);根据比值比(OR)与95%CI确定了每个防御素基因的保护基因型与易感基因型。研究结果对阐明防御素基因与沙门菌易感性的关系以及建立沙门菌抵抗力鸡群具有重要意义。     

家畜体内防御素多态性和表达的研究进展

抗菌肽可抵御细菌、病毒和真菌的入侵,在人类和家畜的先天性防御系统中具有重要的作用,是有望用于预防和治疗的药物,因此,抗菌肽被称为"新一代的抗生素"。抗菌肽是一个阳离子肽,其中的一个大家族就是防御素。防御素的结构中普通带有一个β-片状结构,其中包含3个分子内二硫键,可分为α-防御素、β-防御素和θ-防御素,其中β-防御素是最大的一个家族,在人类和家畜的组织内均有表达。结合已有的研究成果,作者主要对家畜体内防御素的表达、多态性及其作为健康和生产性能的遗传标记的潜在应用作一综述。     

抗菌肽SMAP-29研究进展

抗菌肽作为存在于生物体内一类具有广谱抗菌活性的多肽,是宿主非特异性防御系统的重要组成部分,在动物先天免疫机制中具有特殊的意义。目前,在哺乳动物体内发现的10多种抗菌肽都属于Defensins（防御素）和Cathelicidins两大家族。     

家畜防御素体内组织表达及体外表达研究进展

防御素是广泛分布于动物、植物、昆虫体内的一类富含半胱氨酸的阳离子内源性抗菌肽,在动物免疫调节及植物自身防御方面扮演着重要的角色。对防御素的概念、类型、结构特征、作用机理进行了综述,总结了防御素在牛、马、羊、猪、鹿、骆驼等家畜体内组织表达及体外表达研究进展,并对防御素在未来生物制药和畜牧饲料生产方面的应用前景进行了展望。     

鸡防御素(Gallinacin)稳定转染细胞系的建立及其抑菌活性检测

本研究采用脂质体介导方法,将真核表达载体pl RES2-EGFP-GAL-8(或10)转染到Marc145细胞中,通过G418筛选获得了2个稳定表达鸡防御素的Marc-145细胞系。经RT-PCR和Western blot鉴定证实,成功表达出重组鸡防御素基因GAL-8和GAL-10。通过抑菌活性检测,转基因细胞系的培养上清液及细胞冻融液具有一定的抑菌作用。这为稳定生产鸡防御素,并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源。     

禽防御素在雏鸡抗鸡白痢沙门菌感染中的表达及其分子设计

为了探寻有效防治雏鸡感染鸡白痢沙门菌的新型防御素生物制剂,建立雏鸡感染鸡白痢沙门菌(S.Pullorum)的模型,感染3²4 h后检测十二指肠组织禽防御素(Av BDs)抗感染的防御性表达水平,分析Av BDs的理论等电点,选择活性强且结构稳定的Av BD,对其进行分子设计,以期构建出理论生物活性更强且结构更稳定的改型防御素。结果表明,与对照组相比,雏鸡感染鸡白痢沙门菌324 h后检测十二指肠组织禽防御素(Av BDs)抗感染的防御性表达水平,分析Av BDs的理论等电点,选择活性强且结构稳定的Av BD,对其进行分子设计,以期构建出理论生物活性更强且结构更稳定的改型防御素。结果表明,与对照组相比,雏鸡感染鸡白痢沙门菌3²4 h后十二指肠Av BD-6的表达水平明显上升,差异显著(P<0.05),结合理论等电点分析,选择Av BD-6做设计出发肽,用天冬氨酸替换Av BD-6原有的中性氨基酸,并在C端增加抗菌肽BF2衍生物的α螺旋,成功构建了改型防御素Av BD6-BF2,其理论生物活性与结构稳定性均强于Av BD6出发肽。本研究将为Av BDs生物制剂用于防治鸡白痢沙门菌病的可行性提供参考。     

鸡β-防御素Gallinacin-8基因片段的克隆与序列分析

本试验从鸡的肝脏中提取总RNA,根据GenBank公布的鸡β-防御素Gallinacin-8(简称gal-8)基因序列设计2对引物,运用RT-PCR技术扩增出大小为20lbp的鸡β-防御素gal-8的基因片段.通过序列分析得知其由66个氨基酸组成,包括20个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸的原片肽及41个氨基酸的成熟肽.BLAST分析表明与GenBank中已公布的序列相比较缺失2个碱基,其同源性达到98%.将该基因克隆进pGEM-T Easy载体中,并转化大肠杆茵感受态DH5α,经筛选和测序鉴定获得了阳性重组质粒.从重组质粒中扩增出的成熟肽,大小约123 bp.试验为进一步构建重组核蛋白及表达具有广谱抗微生物活性的防御素提供了实验基础.     

猪β防御素研究进展

β防御素是猪体内分泌的一类抗菌肽,广泛分布于各个组织中,在抵抗病原入侵和免疫调节中发挥着重要作用。猪β防御素对细菌、真菌和病毒都有很强的杀灭作用,并且具有分子量小、热稳定性好、无残留等优点,是理想的抗生素替代品。研究表明,猪β防御素的表达与个体抗病力正相关,增加内源性防御素表达或直接摄入外源性防御素均能增强机体免疫力并促进生长。脂肪酸、氨基酸、维生素、益生菌、病原微生物等外源刺激皆可影响β防御素的表达。随着防御素相关研究的深入,将有望解决养猪生产中长期使用抗生素而导致的耐药性、药物残留及环境污染等问题。文章介绍了猪β防御素的结构特征、表达特异性及生物学功能,主要综述了外源刺激对β防御素表达的影响及其作用机制,初步说明外源β防御素作为饲料添加剂在仔猪生产中的效果,旨在为猪β防御素的深入研究及其在生猪健康养殖中的应用提供参考。