3-甲基-4-硝基酚对大鼠肾脏氧化损伤作用的研究

为了探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)对大鼠肾脏的氧化损伤作用,选择SPF级雄性SD大鼠,随机分为4组(每组10只),设立3个染毒组和1个对照组。染毒组采用皮下注射的途径分别给予每天剂量为1 mg/kg体重、10mg/kg体重和100 mg/kg体重的PNMC,连续5 d。对照组采用同样的途径给予溶剂(PBS+0.05%tween80),最后一次染毒后第24小时剖检取材。称量体重和器官重量,观察肾脏组织病理学变化,检测血清中肌酐和尿素氮的含量,以及超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能力及丙二醛等抗氧化指标的含量。结果显示,染毒组大鼠体重和日增重出现不同程度的下降;各剂量组大鼠肾脏均有不同程度的病理损伤;100 mg/kg体重组大鼠肌酐浓度显著升高,所有染毒组大鼠超氧化物歧化酶的含量均显著下降,10 mg/mg体重染毒组大鼠总抗氧化能力也显著低于对照组。综上所述,PNMC染毒后血清中超氧化物歧化酶的活性降低,同时伴有总抗氧化能力下降,提示大鼠体内抗氧化系统遭到破坏,导致过多的过氧化物在体内蓄积,从而对大鼠肾脏造成氧化损伤。     

3-甲基-4-硝基酚对雄性小鼠生殖毒性的研究

目的探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)对雄性小鼠的生殖毒性作用。方法 20只小鼠随机分成阴性对照组和PNMC组(分0.9、9和90mg/kg·bw组),经口灌胃染毒30天,观察睾丸和精子的形态变化。结果染毒组小鼠各剂量睾丸生精细胞发生坏死,曲细精管腔内出现细胞团,精子细胞分化异常,形成均质红染颗粒,睾丸曲细精管生精上皮/直径比值在90mg/kg组明显高于对照组;染毒组小鼠精子畸形率明显高于对照组(P<0.05),并且随着染毒浓度的增加,畸形率有增加的趋势。结论 3-甲基-4-硝基酚不仅可以引起生精细胞坏死和抑制精子形成,还可以诱导精子畸变,从而对生殖系统造成损伤。     

3种肝损伤模型的组织病理学特征观察

1材料与方法 1．1动物与试剂 1．1．1动物SD大鼠：雌雄各半，体重170～180g，合格证号：SCXK（京）2002—0003，SPF级，北京维通利实验动物技术有限公司提供。     

镉致大鼠睾丸损伤及葛根素的保护作用

24只4周龄雄性SD大鼠,分成4组并每天按以下处理:对照组灌服蒸馏水(10 mL/kg);葛根素组每日按照100mg/kg的用量灌服葛根素;镉组按照2mg/kg的Cd2+用量腹腔注射氯化镉溶液(10g/L);镉+葛根素组,在镉组的处理基础上,再按照100mg/kg的用量灌服葛根素。4周后,将大鼠麻醉并处死,摘取睾丸称其质量并计算脏器系数,睾丸制成组织匀浆检测大鼠睾丸中过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量,并制作睾丸病理切片显微镜观察。结果显示与对照组相比,镉组大鼠睾丸脏器系数极显著降低(P0.01);睾丸组织中CAT和MDA的含量显著或极显著增加(P0.05或P0.01),GSH含量极显著减少(P0.01);与镉组相比,镉+葛根素组睾丸脏器系数极显著升高(P0.01);睾丸组织中CAT和MDA的含量显著降低(P0.05),GSH含量显著增加(P0.05)。病理切片显示镉组大鼠睾丸组织的细胞出现实化,看不到各级睾丸细胞正常结构,镉+葛根素组与镉组相比,睾丸细胞损坏程度都有所减轻。本试验表明镉对大鼠睾丸有损伤作用,而葛根素能减轻这种损伤,对镉致大鼠睾丸损伤具有保护作用。     

颗粒饲料灭菌方式对SPF级SD离乳大鼠生长状况的影响

目的:通过饲养实验研究颗粒饲料的不同灭菌方式对SPF级SD离乳大鼠生长状况的影响。方法:在SPF级屏障系统内选取30只22日龄左右的健康SD离乳大鼠,随机分成三组。将同等成分的颗粒饲料经不同方式灭菌后分别饲喂三组大鼠,其中第一组饲喂高温高压灭菌饲料;第二组饲喂高温高压灭菌饲料同时补充足量复合B族维生素;第三组饲喂60Co辐照灭菌饲料。结果:饲喂60Co辐照灭菌饲料的大鼠组日增重明显高于饲喂高温高压灭菌饲料的大鼠组,第二组大鼠虽在饲以高温高压灭菌饲料同时补充足量复合B族维生素,但并不能消除两种灭菌方式对SD离乳大鼠生长状况影响的差异。     

牛磺酸对大鼠睾丸间质细胞分泌睾酮的影响及作用机理初探

将雄性Wistar大鼠（220～250g）的睾丸间质细胞混悬液用不连续梯度（5％、30％、58％、70％）Percoll分离液分离，在细胞培养液中分别加入牛磺酸及促性腺激素（HCG）、雄烯二酮、孕酮、cAMP进行培养，用放射免疫分析方法测定作用24h后培养液中睾酮含量。结果表明，牛磺酸可使睾丸间质细胞分泌睾酮的能力显著增加；能增加HCG和cAMP诱导的睾酮分泌；能促进雄烯二酮和孕酮向睾酮的转化。牛磺酸能增加睾丸间质细胞睾酮的分泌，并可能在类固醇合成的多个环节中都起到了一定的促进作用。     

茯苓多糖对大鼠免疫功能的影响

本文围绕茯苓多糖对SD雄性大鼠体内外免疫活性的影响开展研究。取60只SD雄性大鼠,随机分成6组,分别为空白对照组、模型组、免疫对照组（盐酸左旋咪唑100 mg·kg-1）、茯苓多糖低剂量组（100 mg·kg-1）、茯苓多糖中剂量组（200 mg·kg-1）、茯苓多糖高剂量组（400 mg·kg-1）,每组10只。通过ELISA试剂盒测定血清中IgG抗体及细胞因子（IL-2、IL-6和IFN-γ）含量,并测定各组大鼠胸腺指数、脾脏指数。MTT法检测不同浓度茯苓多糖对大鼠腹腔巨噬细胞、脾脏细胞增殖的影响。结果发现,茯苓多糖对大鼠腹腔巨噬细胞、脾脏细胞的增殖具有一定的刺激作用。发现茯苓多糖可提高大鼠血清中IgG、IL-2、IL-6和IFN-γ水平及免疫器官指数。该研究表明茯苓多糖能提高SD雄性大鼠的免疫性能。     

毒性剂量纳米硒对SD雄性大鼠生殖功能的影响

本试验研究毒性剂量下纳米硒(SeNPs)对SD雄性大鼠睾丸损伤、精子活力及其运动参数的影响。选取6周龄SD大鼠40只分4组,每天分别灌胃剂量为0、2.0、4.0、8.0mg/kg体质量的SeNPs 1次,连续2周,试验结束取睾丸称重,做组织切片进行光镜和电镜观察,并取附睾中的精液上机分析。结果显示,8.0mg/kg体质量剂量的SeNPs使睾丸出现严重萎缩,4.0、8.0mg/kg体质量剂量组的睾丸组织都出现了不同程度的病理损伤,8.0 mg/kg体质量剂量组的睾丸细胞染色质浓染边聚,有细胞凋亡现象。另外4.0、8.0 mg/kg体质量剂量的SeNPs会显著降低精子浓度、精子活力以及精子的运动参数,2.0mg/kg体质量剂量的SeNPs对于精子浓度和精子活力无显著影响,却提高了精子的部分运动参数。本研究提示高于4.0mg/kg体质量的SeNPs对雄性SD大鼠的生殖功能有损害。     

三聚氰胺对小鼠睾丸病理损伤的观察

本研究采用组织病理学和免疫组织化学技术观察了三聚氰胺（Melamine,MA）对雄性小鼠睾丸的毒性作用,以深入揭示三聚氰胺的毒性作用及其机理。将25只28日龄SPF雄性昆明小鼠随机均分为5组,1组为对照组,其他4组为试验组。4个试验组分别按下述不同剂量灌服三聚氰胺：0.6 mg/kg（bw）/d（每日每公斤体重0.6 mg）、3.0 mg/kg（bw）/d、15.0 mg/kg（bw）/d和17.5 mg/kg（bw）/d,用玉米油做溶剂;空白对照组每日灌服等量玉米油。连续灌胃30天后剖检小鼠并取其睾丸组织进行固定、切片和染色,观察睾丸的组织病理变化。同时,采用免疫组织化学方法检测睾丸组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达量。观察结果表明,与对照组相比,试验组不同剂量浓度的三聚氰胺对小鼠睾丸组织造成不同程度的病理损伤;三聚氰胺也会在一定程度上影响睾丸组织中PCNA的表达。研究结果表明三聚氰胺对于小鼠生殖系统有明显毒性作用。     

氯化汞对SD大鼠组织损伤的病理学研究

将24只SD大鼠被随机分为4组,即对照组(饮用蒸馏水)、低剂量汞组(HgCl250 mg/L)、中荆量汞组(HgCl2100 mg/L)、高剂量汞组(HgCl2200 mg/L),采用自由饮水染毒,染毒时间为21 d.期间记录大鼠体质量及临床症状,染毒结束后采集心、肝、脾、肺、肾组织,称重并制作石蜡切片观察其病理组织学变化.结果显示,各染毒组大鼠体质量增长均低于对照组,部分组间差异显著(P<0.05);与对照组相比.中、高剂量染毒组大鼠肾脏、脾脏、肺脏和大脑脏器系数差异显著(P<0.05);光学显微镜观察各染毒组大鼠肝细胞肿胀、肝细胞索紊乱、中央静脉淤血;肾小管上皮细胞肿胀、变性,管腔内有脱落的上皮细胞或溶解崩裂的细胞碎片,肾间质有红细胞积聚;心脏、脾脏、肺脏可见大量红细胞积聚,而大脑未见明显异常的病理学变化.结果表明,低剂量汞暴露对SD大鼠生长发育具有明显抑制作用,且能引起机体各组织器官广泛性病理损伤.     

生长激素STH对体外培养猪COCs卵丘细胞影响的研究

试验研究了生长激素（somatotropin,STH）对猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的卵丘细胞扩展、凋亡、凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。结果表明,STH能够促进卵丘细胞扩展,抑制卵丘细胞凋亡,抑制凋亡相关基因Bax在卵丘细胞上的表达。     

银杏叶提取物对大鼠脾脏免疫细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响

24只SD雌性大鼠随机分为假手术组(A组)、卵巢摘除组(B组)、卵巢摘除并银杏叶提取物(EGb)治疗组(C组),利用免疫组化染色检测脾脏中Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达.结果发现,B组大鼠脾脏内Bcl-2蛋白表达显著减少,而Bax蛋白表达显著增加;C组Bcl-2蛋白表达明显回升(P＜0.01),而Bax蛋白表达明显回落(P＜0.05).表明银杏叶提取物可通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,改变Bcl-2与Bax的比值(Bcl-2/Bax)而维护脾脏的免疫自稳状态.     

白消安对睾丸的毒害作用及机制探讨

白消安（busulfan）对精子发生具有较强毒害作用,可导致雄性不育,是制备精原干细胞（spermatogonial stem cells,SSCs）移植受体的理想药剂。睾丸炎对生精机能也有重要影响,甚至能导致雄性不育。然而,白消安损害血睾屏障（blood-testis barrier,BTB）,影响精子发生的机制尚不清楚,尚不知其是否会导致非传染性睾丸炎症,并影响细胞因子分泌,损害生育能力。因此,本文综述了白消安对BTB的破坏作用、对睾丸细胞相关功能蛋白的影响,以及白消安损伤睾丸的缓解方法,以深入揭示白消安对睾丸细胞和BTB功能与结构的毒害作用,为研发高效安全的SSCs移植受体制备技术,以及化疗药物治疗和环境毒素作用下生精机能科学防护与恢复提供科学参考。     

固始鸡免疫器官内细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的动态表达

应用免疫组织化学技术和Leica 显微图像处理系统,对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2在固始鸡免疫器官内的动态表达进行了研究。结果：Bax蛋白在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量不同;Bax蛋白表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜、细胞质和细胞核;Bax蛋白表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布：脾脏内不同部位均有分布,主要在动脉周围淋巴鞘、红髓、淋巴小结边缘、边缘区,很少出现在淋巴小结内;胸腺内主要分布于胸腺小叶的皮质与髓质交界处,其次是胸腺小叶髓质,极少出现于皮质;法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴滤泡间的区域,在淋巴滤泡边缘的少量淋巴细胞也有Bax蛋白表达,淋巴滤泡内极少有阳性细胞。Bcl-2蛋白在固始鸡免疫器官内的表达与Bax相似,但表达量与Bax相比较少。以上结果表明,细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,对免疫器官的稳定发挥重要作用。     

17-β雌二醇对去卵巢大鼠垂体中Bcl-2和Bax表达的影响

为了探讨雌激素对垂体细胞发育和凋亡的影响,利用免疫组化SP法检测摘除卵巢及补充外源性17-β雌二醇后的不同时间大鼠垂体中Bcl-2和Bax表达的变化。结果显示：假去卵巢组（SHAM）Bcl-2和Bax的表达在不同给药时间无显著变化（P〉0.05）;同时间去卵巢（OVX）组与SHAM、去卵巢并注射17-β雌二醇组（OVX＋E2）相比,差异均显著（P〈0.05）;去卵巢给药后6周,OVX组垂体内Bcl-2的表达与之前相比有所增加,而Bax则减少,给药后8周,各组与6周后相比无显著差异（P〉0.05）;同组Bcl-2的表达随时间逐渐减少,4周后最少,Bax的表达则逐渐增加,4周后达到该组的峰值。结果表明,雌激素在垂体的结构维持和功能发挥中起一定的调节作用。     

蒙古绵羊在不同季节的生长过程中Bcl-2与Bax基因在皮肤中的表达

笔者应用免疫组化s-p法,检测个不同月份石蜡包埋组织切块Bcl-2和Bax基因的表达情痀。试验结果：Bcl-2在皮肤细胞内表达情痀各个月份不同,4月和10月之间无显著差异（P＞0.05）,而分别与5,6,8,12月4个月份之间差异显著（P＜0.05）;5,6月和8月之间无显著差异（P＞0.05）,而分别与4,10,12月3个月份之间差异显著（P＜0.05）。皮肤的厚度与Bcl的表达呈正比关系。4月份起开始变薄,5-6月份为最薄。Bax在皮肤细胞内表达4,5;6,8;10,12三组组内不同月份Bax表达差异不显著（P＞0.05）,而组间表达差异均显著（P＜0.05）Bax在5-6月份Bax表达水平急剧上升（7.313%-42.813%）;在8-10月份Bax蛋白的表达水平急剧下降（32.263%-23.00%）。结论：细胞凋亡引起的蒙古锦羊毛的生长和脱落可能与Bcl-2和Bax的表达有关,并且发重要的调控作用。Bax基因表达促进细胞凋亡。     

氟对体外培养绵羊成骨细胞Bcl-2和Bax基因表达的影响

目的:探讨氟对体外培养成骨细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法:采用酶完全消化法分离2～3月龄胎羊颅盖骨成骨细胞,加入不同浓度(0～10-3mol/L)NaF,作用24h后,提取细胞总RNA并反转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR方法,检测成骨细胞Bcl-2和Bax基因表达的变化。结果:1.0×10-5mol/LNaF组Bcl-2基因表达水平较对照组高,其他组Bcl-2表达水平均比对照组低;各NaF浓度组Bax基因表达量均比对照组高,且5.0×10-4mol/L组最高;除1.0×10-5mol/LNaF组外,Bcl-2/Bax比值均比对照组低,且5.0×10-4mol/L组最低。结论:高浓度NaF可能增加成骨细胞线粒体膜的通透性,下调Bcl-2 mRNA表达,上调Bax mRNA的表达,可能启动了线粒体凋亡信号转导途径。     

枸杞多糖对双酚A暴露小鼠生精细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

研究枸杞多糖(LBP)对双酚A(BPA)暴露小鼠睾丸生精细胞中Caspase-3、Bcl-2和Bax凋亡蛋白表达的影响.将50只成年雄性昆明小鼠随机分为A、B、C、D、E共5组,每组10只.除正常对照组(A组)注射等量橄榄油外,其余4组小鼠分别腹腔注射20 mg·kg 1的BPA,连续7d,建立生精损伤模型.同时C、D、E组小鼠分别灌服7d不同剂量的LBP(50、100、200 mg·kg-1),正常对照组(A组)和模型组(B组)小鼠灌服等量生理盐水.制备组织切片观察睾丸组织病理学变化,免疫组化法测定睾丸组织Caspase-3、Bax和Bcl-2凋亡蛋白的表达.结果显示,BPA可极显著增加睾丸生精细胞Caspase-3和Bax的阳性细胞数量(P＜0.01),降低Bcl-2的表达(P＜0.05).补充不同剂量LBP后,Caspase-3的阳性表达均极显著低于模型组(P＜0.01).200 mg·kg-1 LBP组生精细胞Bax的阳性细胞数量极显著低于模型组(P＜0.01);Bcl-2的表达随LBP剂量的增加而提高,其中200 mg·kg1LBP组阳性表达极显著高于模型组(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值也随着LBP剂量的增加而上升.结果表明,枸杞多糖通过调节凋亡相关基因的表达,抑制生精细胞凋亡,从而缓解双酚A引起的雄性生殖损伤.     

脱氢表雄酮对雄性小鼠睾丸组织发育的毒性作用

昆明种雄性小鼠32只,随机分为4组。脱氢表雄酮（DHEA）日摄取量分别为0（对照组）、20、40和60mg／kg,试验期52d。各组分别在42日龄、72日龄处死小鼠,分离睾丸,制作石蜡切片,HE染色,显微观察、摄影。结果显示,与对照组比较,42日龄时中、高剂量组的曲精小管断面变形,各时期的生精细胞和成熟精子数量均减少;高剂量组曲精小管内生精细胞层次基本消失,出现较大腔隙,间质发生不同程度的变化。72日龄时中、高剂量组的曲精小管断面变形。基膜变薄伴有断裂和间质受损增加。中剂量组出现畸形精子,高剂量组曲精小管中央空白区域增大,缺乏成熟精子。以上结果表明,中、高剂量的DHEA对生长期小鼠的睾丸组织结构发育有明显的毒性作用。