鸡传染性鼻炎二价油苗免疫鸡群抗体动态研究

应用阻断ELISA (B ELISA)、血凝抑制试验 (HI)和血清平板凝集试验 (SPA)方法 ,检测了鸡群用鸡传染性鼻炎A、C二价油乳剂灭活疫苗免疫后 0～ 390d的血清阻断ELISA、HI和平板凝集抗体消长情况 ,并绘制了相应抗体曲线。结果表明 ,鸡体按规定免疫程序免疫后 ,A型B ELISA抗体和HI抗体在测定期内一直保持比较高的水平 ,C型B ELISA抗体首免 5 0～ 180d、SPA抗体在首免后 5 0～ 60d达到高峰 ,此后抗体缓慢下降 ,但各种抗体至少可持续 390d以上。结果进一步显示了二价苗良好的免疫原性以及B ELISA和SPA较好的敏感性 ,为二价苗、各种诊断方法或其试剂盒产品的进一步应用提供了参考。     

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合症三联油乳剂苗的研制

以ＮＤ Ｌa Sota株,呼吸道型,ＩＢ（ＲＩＢ）Ｈ１２０株或肾型ＩＢ（ＫＩＢ）ＳＮ９３０１株和ＥＤＳ ＸＮ９２０３株制苗毒株,分别经鸡胚和鸭胚增殖后甲醛灭活。灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中,乳化剂成“ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ”和ＮＤ－ＫＩＢ－ＥＤＳ两种三联油乳剂苗。测试结果表明：三联疫苗安全性好,无毒副作用;乳化度、稳定性和通针性良好;免疫效果即,用三联苗免疫２０日龄鸡,免疫后１４、２８、５８d、ＮＤ、ＲＩＢ、ＫＩＢ、ＥＤＳ的ＨＩ抗体均可达７．０和９．２log2以上,于免疫后６０d用相应强毒攻击,８３．３％－１００％的鸡获有效保护。疫苗保护期长,常温避光１８０d和4℃左右３６０d,免疫效果与新制苗无明显差异。     

肉种鸡免疫两不同ND-IB-IBD-Reo四联灭活疫苗后的抗体水平比较

为了检测肉种鸡开产前免疫两不同的鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病-病毒性关节炎四联灭活疫苗（ND-IB-IBD-Reo四联苗）后的抗体水平差异,在鸡群20周龄分别用A、B疫苗免疫,免疫后28 d和56 d 用HI检测ND抗体水平和ELISA检测IB、IBD和Reo的抗体水平。结果显示,免疫后28 d和56 d,B疫苗的IBD和REO抗体效价效价显著高于A疫苗（P﹤0.05）,ND和IB的抗体效价虽较A疫苗高但差异不显著（P﹥0.05）。结果表明,B疫苗的免疫抗体水平优于A疫苗,该研究为肉种鸡ND-IB-IBD-Reo四联灭活疫苗的筛选和合理免疫程序的制定提供依据。     

中药“增免散”对免疫抑制鸡免疫功能的影响

将300只1日龄雏鸡随机分成正常对照组、中药“增免散”组、环磷酰胺组、环磷酰胺组 左旋咪唑组、环磷酰胺 “增免散”组,6日龄用鸡新城疫LaSota疫苗免疫点眼滴鼻,14、21、28、35日龄测定鸡血液ND抗体效价、免疫器官指数、细胞免疫功能、红细胞免疫粘附功能等,探索中药“增免散”的免疫增强机理。结果表明:中药“增免散”不但能显著提高Lasota活苗接种雏鸡的特异性HI抗体水平,延长其持续时间,能促进雏鸡免疫器官的生长发育,能显著增高雏鸡外周血T淋巴细胞ANAE阳性率,并对雏鸡红细胞免疫粘附功能具有显著促进作用,而且对环磷酰胺的免疫抑制有部分拮抗作用。     

河南部分地区H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及交叉免疫攻毒保护试验

为了分离鉴定河南漯河、郑州H9亚型禽流感病毒及交叉免疫攻毒保护试验。于2011年用SPF鸡胚从河南漯河、郑州疑似感染H9亚型禽流感病毒的病料中分离出2株病毒,通过血凝及血凝抑制试验和RT-PCR方法进行鉴定,确定为AIV H9亚型;用河南省动物性食品安全重点实验室于2001年分离的2株H9亚型禽流感病毒分别制成油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,然后再用上述4株病毒对免疫鸡群进行交叉攻毒,进行交叉免疫保护试验,测定其交叉免疫保护作用。结果表明：成功分离出2株H9亚型禽流感病毒;用2001年分离毒株所制备出的灭活疫苗免疫鸡后,试验鸡体内抗H9亚型禽流感HI抗体效价均明显上升,平均HI效价均大于11log2,不同毒株所诱导产生的HI抗体效价存在一定的差异;不同时期及地点分离的H9亚型禽流感流行毒株间均产生了较好的交叉保护,且同一地区的保护率更高,2001年的分离株对目前的流行毒株仍有很好的保护作用。     

鸡新城疫、传支（双价）二联油剂灭活苗的研究

鸡新城疫（ND）和鸡的传染性支气管炎病（IB）仍然是目前养鸡业的最大病害。国内外虽已研制出许多良好的疫苗，但由于近年来变异株和超强毒的出现以及ND和IB混感率的不断上升，现在应用的ND和IB疫苗普遍存在以下弊端：（1）疫苗毒株与当地流行毒不相吻合，免疫效果不佳；（2）ND和IB疫苗分别接种，常造成应激反应而影响免疫应答；（3）油佐剂灭活苗的免疫产生速度不够理想。为此，1996～1997年对当地鸡病进行流行病学调查，在对致病毒株分离鉴定的基础上，试图选用与本地抗原性相似的国际标准毒株作为制苗毒株，研制ND—IB（双价）二联油剂灭活疫苗。     

IB(M41株)种毒代次和免疫原性的关系

评估不同代次IBV M41株种毒是否可以作为生产用种子。将M41株种毒用SPF胚连传8代,从中选出第3、第5、第7代,测定其EID50。并用此3代M41株鸡胚尿囊液制毒的油乳苗免疫易感鸡,以HI试验检测其抗体水平。3种疫苗免疫鸡均保护9/10以上,对照鸡全发病;对免疫后与免疫前HI抗体水平的比较表明,免疫后抗体平均滴度提高3倍以上。不同代次的M41毒株的免疫原性仍然保持良好,可以正常用来制造疫苗和建立种子批。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联油佐剂灭活疫苗的研究

用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒，分别接种鸡胚或鸭胚，制备各种病毒抗原液，经福尔马林灭活后，采用FIL TRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩，然后按一定比例混合，以司本80及吐温80为乳化剂，10号白油为佐剂，制成ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗。对四联苗各项技术指标进行了测定，证明本疫苗安全、无任何副作用；免疫10～14d后产生免疫力；ND部分效检，攻毒100％保护，每羽份含ND效价达50～123PD50；IB部分效检，免疫21～28d后攻毒保护率达80％～100％，IBHI效价≥1：64；EDS76效检。免疫后21d HI效价≥1:128;AE效检,保护率达80%～100%。     

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的近期免疫效力检验

应用３批鸡传染性鼻炎价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和近期免疫效力检验,安全性试验采用１５只鸡进行,胸肌注射疫苗４￣５ｍＬ／只后,逐日观察,结果鸡只食欲、精神未见异常,２周后观察,注射部位未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫（０．５ｍＬ／ｋｗ ）后的鸡只对Ａ型高致病力菌株的攻击保护率可达１００％,对Ｃ型高致病力菌株的攻击保护率为９３．３％。采用Ｂ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＺＡ对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平。     

中药鱼腥草注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

用鸡胚培养法和血凝试验,测定了鱼腥草对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验共分为4组,第1组接种病毒尿囊液与中药鱼腥草混合液,HA滴度0。第Ⅱ组接种新城疫病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度5 log₂。第Ⅲ组接种新城疫病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9log₂。第Ⅳ组不接种病毒尿囊液,不给药,HA滴度0。试验结果表明：鱼腥草对鸡胚无毒性作用;鱼腥草与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。     

左旋咪唑影响流感灭活疫苗（H9N2）抗体滴度

为了研究不同剂量的左旋咪唑对鸡流感病疫苗免疫效果的影响,将20只17龄雏鸡,随机分成A、B、C、D四组,每组5只。分别皮下注射H9N2灭活疫苗0.5ml/羽,同时给试验组A(0.6mg)、B(0.3mg)、C(0.15mg)剂量的左旋咪唑,D组不加。免疫后0d、7d、14d、21d和28d,翅下静脉采血检测抗H9N2亚型禽流感病毒抗体滴度。结果表明,给药组的抗体水平都明显高于对照组;不同给药剂量的组别的抗体水平也存在差别,高、中剂量A、B组抗体水平基本一致,却明显低于低剂量组D。这表明左旋咪唑影响H9N2流感病毒疫苗抗体滴度,低剂量(0.15mg)添加左旋咪唑,可提高疫苗的抗体水平。     

用平板式超滤机浓缩鸡新城疫病毒及法氏囊病毒试验效果观察

采用ＵＦ１型工业平板式超滤机对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）及法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）进行了初步的浓缩试验。该设备浓缩工艺简单、效率高,浓缩液ＨＡ效价与未浓缩液比较按浓缩比率相应上升。用浓缩液与未浓缩液制成灭活疫苗免疫鸡,均可获得１００％抵抗ＮＤ及ＩＢＤ的保护力,以浓缩苗免疫的ＮＤＨＩ抗体及ＩＢＤ中和抗体滴度明显高于未浓缩苗。试验表明,浓缩苗安全有效,并优于未浓缩苗。     

左旋咪唑对新城疫灭活疫苗抗体滴度的影响

为探讨免疫增强剂左旋咪唑对新城疫灭活疫苗抗体滴度的影响,将20只20日龄雏鸡,随机分成A、B、C、D四组,每组5只。分别皮下注射新城疫灭活疫苗0.5ml／羽,同时注射A组雏鸡高(0.6mg)、B组中(0.3mg)、C组低(0.15mg)剂量的左旋咪唑,对照组D不加。免疫后0d、7d、14d、21d和28d,翅下静脉采血并检测新城疫抗体滴度。结果显示：免疫前四组抗体水平基本一致,无统计学意义;免疫后7d,14d,21d,高、中、低三组抗体水平基本一致,四组的抗体水平相差均在2个滴度以内,统计分析无明显差异;免疫后28d,B组抗体水平较高。统计分析显示,对照组与高中低三组均有显著差异,但无剂量差异;在高中低 三组中,以中剂量添加最佳,抗体效价高（7.2log2）,但中剂量组与高、低二组的差异不显著。这表明,左旋咪唑的添加提高新城疫抗体滴度,并且与免疫后时间长短有关系。从趋势看,随着时间的推移,添加组的抗体水平好于对照组。     

蟾酥注射液对新城疫疫苗免疫效果的影响研究

为了探讨蟾酥注射液对新城疫疫苗免疫效果的影响。选取1日龄健康雏鸡240只,随机分成4组,每组60只,设试验组（低剂量组、中剂量组和高剂量组）和对照组,选择不同浓度的蟾酥注射液与新城疫疫苗联合使用作为试验组。分别在21、28、35、42、49和56日龄,通过β-微量法,检测血清中ND-HI抗体;通过MTT法,检测外周血T细胞吸光度值（OD值）;通过称量体重和免疫器官重量的方法,检测免疫器官指数。结果显示：蟾酥注射液各组与对照组比较,ND-HI抗体水平、外周血T细胞转化、胸腺指数、法氏囊指数和脾指数均有不同程度的提高。说明蟾酥注射液能够提高机体的体液免疫和细胞免疫水平,从而增强新城疫疫苗的免疫效果。     

不同来源高致病性蓝耳病灭活苗的应用效果研究

摘 要：为了搞清不同厂家生产的高致病性蓝耳病灭活疫苗的应用效果差异,为正确选用高致病性蓝耳病灭活疫苗提供试验依据,试验对珠海市最常用的三个厂家生产的高致病性蓝耳病NVDC-JXA1灭活疫苗的不良反应及免疫效果进行了比较研究。结果发现,三种供试的高致病性蓝耳病灭活疫苗均未引起供试猪发生过敏反应和采食量变化等不良反应;三种供试灭活疫苗经2次免疫后,均能提高抗体水平,其中供试疫苗Ⅲ在首次免疫后即能有效产生抗体,而供试疫苗I和供试疫苗Ⅱ在首次免疫后不能有效产生抗体。表明供试疫苗Ⅲ能使机体快速有效地产生抗体,免疫效果最好,可作为珠海市高致病性蓝耳病预防接种的首选灭活疫苗。关键词：高致病性蓝耳病;灭活疫苗;不良反应;免疫效果;猪     

猪圆环病毒II型感染抑制伪狂犬病病毒疫苗的体液免疫反应

为了探讨猪圆环病毒II型(PCV2)感染对伪狂犬病病毒(PRV)疫苗体液免疫反应的影响,检测了PCV2实验感染仔猪血清中PRV疫苗抗体含量的动态变化。将仔猪随机分成二组,一组仔猪进行PCV2接种和PRV疫苗免疫而作为PCV2组;另一组仔猪不予PCV2接种但进行PRV疫苗免疫而作为对照组。所有仔猪在PCV2接种后14天均进行PRV弱毒疫苗免疫,用间接ELISA检测仔猪血清中病毒特异性抗体;到PCV2接种后14天,PCV2组仔猪全部出现PCV2病毒血症。在PRV疫苗免疫后7天,多数仔猪血清中可检测到疫苗抗体之后疫苗抗体含量逐渐上升,在免疫后14天时对照组疫苗抗体水平显著(P<0.05)高于PCV2组,但在免疫后21天时两组之间抗体水平没有差异。研究结果显示：PCV2实验感染仔猪的PRV疫苗抗体产生出现延迟,表明PCV2感染可抑制PRV疫苗诱导的体液免疫反应。