宁夏利通区产奶期奶牛钙、磷盈缺状况调查

本项目对宁夏吴忠市利通区4个奶牛场和10户农户进行奶牛产奶期钙磷营养状况调查,分别测定了饲料钙磷含量,奶牛产奶期血清中钙、磷、羟脯氨酸、碱性磷酸酶、甲状旁腺素、降钙素含量。结果表明:散户血液钙、磷含量正常,但羟脯氨酸、碱性磷酸酶、甲状旁腺素明显升高,日粮钙、磷不足,处于钙、磷缺乏亚临床状态。小户血液钙、磷及相关生化指标基本正常,它们的含量分别为:碱性磷酸酶2.10±0.11-3.23±1.08mg/100ml、羟脯氨酸1.41±1.00-2.84±0.65μg/mL、甲状旁腺素104.24±68.25-58.91±30.51pmol/l、降钙素20.93±26.36-10.27±5.56pmol/l,各被调查户产奶牛血液的降钙素的水平处于正常范围之内,血液降钙素平均水平为9.4686±10.9042pmol/l,95％的置信区间为6.5208-12.4164pmol/l。     

激光穴位照射对子宫卵巢病牛的cAMP、cGMP和内啡肽含量影响的研究

本研究分2大项进行。第1项研究激光照射对不孕奶牛内啡肽含量和发情的影响,第2项研究激光照射对不孕奶牛cAPM、cGMP含量及淋转值的影响。 ①选因患子宫炎或卵巢静止而不孕的黑白花奶牛34头,随机分成2组。试验组(24头)用氦氖激光照射交巢穴,7天为一疗程,间歇7天再照第2个疗程。对照组(10头)不用激光照射。RIA法分析牛血浆β-内啡肽含量。结果发现,试验组病牛(n=24)血浆β-内啡肽含量由照射前的112.864±58.947pg/ml升高到第1疗程后的175.634±104.310pg/ml(P<0.05),间歇1周后为237.627±153.136pg/ml(P<0.01)。第2疗程后为193.448±104·378pg/ml(P<0.05)。激光照射后3次测定值显著高于对照组同期测定值。对照组4次测定结果分别为:103.787±28.360,103.673±32.283,116.594±39.528,118.517±36.933pg/ml。同时观察到试验组发情牛头数为21头,发情率为87.5％,对照组发情3头,发情率30％,两组间差异极显著。试验结果表明,激光照射穴位可使病牛内啡肽含量增多,并参与调节生殖机能。 ②用氦氖激光照射交巢穴治疗不孕奶牛16头,对照组10头,激光照射方法基本同前述。在每个疗程前后1天,第2疗程后10天经颈静脉采血,用全血培养~3HTdR掺入法,蛋白结合法及RIA法,分析淋转刺激指数、血浆cAMP、cGMP含量变化。测得淋转     

HCG通过StAR蛋白快速调节睾酮的合成

以2~3周龄长白仔猪睾丸间质细胞为材料研究HCG对睾酮合成的快速调节作用。结果表明:(1)在2h内,对照组间质细胞分泌睾酮的量为(3.25±0.28)ng/mL,而HCG(浓度为50IU/mL)处理组睾酮的浓度为(8.79±0.54)ng/mL,增幅为4.54ng/mL,二者差异极显著(P<0.01);(2)在2h内,对照组细胞内cAMP的浓度为(13.13±1.12)pmol/mL,而处理组cAMP的浓度为(39.22±2.38)pmol/mL,二者之间差异极显著(P<0.01);(3)加入前体物后,胆固醇对照组睾酮浓度为(3.81±0.45)ng/mL,处理组睾酮浓度为(27.13±1.27)ng/mL,处理组睾酮的浓度明显高于对照(P<0.05),其它几种前体对照组与处理组差异不显著(P>0.05)。(4)在2h内,HCG增加了StAR蛋白和mRNA的表达。这表明在快速反应期,HCG通过促进StAR蛋白的表达,增强睾酮的生物合成。     

猪圆环病毒2型对仔猪淋巴细胞内cAMP和cGMP的影响

为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作用下淋巴细胞的免疫活性,本研究通过体外培养仔猪脾脏淋巴细胞及巨噬细胞(Mφ),分别以PCV2和PCV2+Mφ与淋巴细胞相互作用,同时设Mφ和空白对照组.培养0h、6h、12h、24 h后收取各组淋巴细胞,放射免疫法检测胞内cAMP和cGMP浓度.另外,选取15头PCV2阴性仔猪,每头滴鼻PCV2病毒悬液,分别于14d、21 d、35 d迫杀,每次5头,并设立阴性对照组4头.放射免疫法检测脾脏cAMP和cGMP浓度,并计算cAMP/cGMP比值.体外检测结果显示:PCV2对体外培养淋巴细胞内cAMP和cGMP浓度影响不大;而在Mφ存在时PCV2在6h时能显著降低cAMP和cGMP浓度和cAMP/cGMP比例(p＜0.05); 12 h时cGMP浓度下降(p＜0.05),cAMP和cGMP比例上升(p＜0.05); 24 h时cGMP浓度上升(p＜0.05),但cAMP/cGMP比例降低(p＜0.05).体内检测结果表明,PCV2能显著降低仔猪脾脏细胞内cAMP浓度(p＜0.05)及cAMP/cGMP比值(p＜0.05).该研究结果表明,在巨噬细胞存在时PCV2能够降低淋巴细胞内cAMP/cGMP的比值,从而影响淋巴细胞的功能.     

蓝狐阴茎化学成分的研究

应用放射免疫测定技术及激光速率散射比浊法对蓝狐阴茎中某些化学成分进行测定分析 ,得出与蓝狐生殖有关的睾酮 (T)、孕酮 (P)、17β -雌二醇 (E2 )、生长激素 (GH)、人绒毛膜促性腺激素 (HCG) ,其含量分别为 (2 0 5 0± 3 6 5 )ng/g、(0 6 7± 0 12 )ng/g、(99 2 5± 9 87)pg/g、(18 2 1± 2 98)ng/g、(4 5 6 3± 5 2 9)mIU/g ,得出与蓝狐生命活动有关的三碘甲状腺原氨酸 (T3 )、四碘甲状腺原氨酸 (T4)、生物信使cAMP、cGMP及免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等成分含量分别为 (1 17± 0 17)ng/g、(2 6 13± 3 6 6 )ng/g、(2 1 39± 2 89)ng/g、(2 7 75±3 18)ng/g、(0 0 8± 0 0 1)mg/g、(0 0 7± 0 0 2 )mg/g、(0 0 4± 0 0 1)mg/g。     

蓝狐睾丸几种化学成分的检测

通过放射免疫测定技术及激光速率散射比浊法对蓝狐睾丸中某些化学成分的测定分析,得出与蓝狐生殖有关的睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2 )、生长激素(GH)、人绒毛膜促性腺激素(HCG) ,其含量分别为( 83.3 0±1 1 2 .5 8)ng/g、( 3 0 .1 6±5. 69)ng/g、( 2 41 . 3 5±3 5 .2 1 )pg/g、( 42 .2 2±5 .78)ng/g、( 2 5 9.90±3 9.1 8) μg/g;与生命活动有关的三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、生物信使cAMP、cGMP,以及免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等成分,其含量分别为( 0 .1 1±0.0 2 )mg/g、( 0.1 0±0 .0 2 )mg/g、( 0.0 6±0.0 1 )mg/g,为此产品的开发利用提供理论依据     

黄芪多糖对小鼠免疫细胞NO-cGMP信号系统的效应

试验观察了黄芪多糖对小鼠脾淋巴细胞内第二信使分子cAMP、cGMP及分泌NO的影响。结果发现,黄芪多糖以4种浓度(50、100、200及400μg/mL)均可使脾淋巴细胞NO产生增加,其中以200μg/mL作用最明显(P<0.01);黄芪多糖可抑制cAMP产生,促进cGMP生成,从而降低cAMP/cGMP比例。提示,黄芪多糖能显著影响脾淋巴细胞信息传递,其免疫作用可能是通过调节细胞内信号转导实现的。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠机体cAMP和cGMP含量的影响

为了研究牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠机体环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响,试验用环孢菌素A诱导特异性免疫低下模型,按相应组别对应的剂量对小鼠灌胃给药7 d,获取血清;体外培养正常小鼠腹腔巨噬细胞,用MTT方法筛选TCDCA作用于腹腔巨噬细胞的最佳药物浓度;用最佳药物浓度作用于巨噬细胞后超声破碎,获取上清液;ELISA方法测定血清和上清液中cAMP和cGMP的含量。结果表明:在TCDCA高剂量(0.2 g/kg)组小鼠血清中,cAMP含量极显著高于环孢菌素A组(P<0.01);各组小鼠血清cGMP含量差异不显著(P>0.05);TCDCA促进小鼠腹腔巨噬细胞增殖的体外浓度为1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL;1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL的TCDCA均能显著或极显著提高细胞内cAMP含量(P<0.05或P<0.01),对cGMP含量均没有显著影响。说明TC-DCA能够显著提高正常和免疫抑制小鼠血清中和正常腹腔巨噬细胞内cAMP含量。     

水牛唾液蛋白胃蛋白酶解产物中总阿片样生物活性的测定

研究唾液中的生物活性物质是受人注目的领域。许多研究表明 ,唾液中除含有多种激素和细胞因子外 ,还含有丰富的蛋白质。这些蛋白质(特别是粘蛋白)含有脯氨酸富集片段 ,这些片断抵抗蛋白酶的水解。因而推测 ,唾液进入消化道后有可能解放一些活性肽段。本试验旨在探讨唾液蛋白经胃蛋白酶水解是否有阿片样活性物质产生。自5头体重(450±50kg)公水牛口腔采集混合唾液 ,测定蛋白含量。加入胃蛋白酶 ,在 pH1.4 ,39℃孵育2小时后 ,将酶灭活。以孵育前将酶灭活作对照。调 pH7.2,8500×g离心30分钟。取上清液和1640培养液各5ml与生长旺盛的NG108 -15细胞一起在37℃孵育15分钟。收集细胞 ,提取细胞内cAMP,放免测定cAMP的含量。发现NG108 -15细胞膜上有丰富的阿片受体 ,受体激活后可引起细胞内cAMP减少 ,这种作用可被特异性的阿片受体阻断剂纳洛酮(Nal)反转。因此 ,本试验对照组与试验组分别作加Nal和不加Nal2种处理 ,以细胞cAMP与胞浆蛋白比值变化判定酶解液是否具有阿片样生物活性。试验结果表明 ,试验组细胞cAMP含量 :不加Nal显著低于加Nal(20.103±2.473)ng/mg蛋白质vs(25.850±2.461)ng/mg 蛋白质(P<0.01) ;对照组不加Nal差异不显著(27.177±3.738)ng/mg 蛋白质vs(27.337±3.461)ng/mg 蛋白质(P>0.05)。结果表     

卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、睾酮、雌二醇水平的研究

本试验采用放射免疫法测定了卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素、孕酮、雌二醇和睾酮水平。测定结果,促黄体素水平卵泡囊肿为0.84±0.25ng/ml(n=12),黄体囊肿为0.83±0.23ng/ml(n=5);孕酮水平卵泡囊肿为0.56±0.30ng/ml(n=12),黄体囊肿为2.85±0.64ng/ml(n=5);雌二醇水平卵泡囊肿为28.44±22.47pg/ml(n=12),黄体囊肿为8.14±0.88pg/ml(n=5);睾酮水平卵泡囊肿为84.67±40.40pg/ml(n=12),黄体囊肿为51.98±7.77pg/ml(n=5)。认为卵巢囊肿奶牛外周血浆中促黄体素水平低于正常期奶牛的水平;卵泡囊肿奶牛血浆中孕酮水平低于1ng/ml,黄体囊肿奶牛血浆中孕酮水平高于1ng/ml;卵泡囊肿奶牛血浆中雌二醇水平较高;卵泡囊肿奶牛公牛相与体内高水平睾酮有关。     

母鹅抱窝期间血浆中PRL、P和17β—E2水平的变化

选择表现抱窝行为的母鹅7只,通过RIA方法测定了母鹅在抱窝期间PRL(催乳素)、P(孕酮)和17β—E2(雌二醇)水平的变化。抱窝伊始P、17β—E2含量分别为3.28±0.27ng/ml、71.74±6.45pg/ml。抱窝第11天17β—E2水平降至49.07±8.48pg/ml(P>0.05),而P水平略有升高直至第18天才出现显著下降(1.864±0.12ng/ml)。雏鹅孵出后P、17β-E2水平分别回升至2.71±0.29ng/ml(P>0.05)、142.86±19.00pg/ml(P<0.01)。休产期间P、17β—E2水平均表现一定程度的降低。血浆中PRL水平第一天为214.24±19.73uU/ml。以后呈缓慢上升趋势,抱窝第25天达到高峰395.89±29.75uU/ml(P<0.01),雏鹅孵出后PRL下降至276.32±16.10uU/ml(P<0.05),抱窝结束后PRL水平进一步降低,休产期间PRL降至最低点55.94±15.35uU/ml(P<0.01)。研究表明:PRL可以诱导以及维持母鹅表现抱窝行为,并可抑制卵巢性腺激素的生成与释放。     

枫泾和长白青年母猪首次发情周期内血清中5种生殖激素含量变化

放射免疫法测定枫泾(FJ)和长白(L)青年母猪(各4头)首次发情周期内外周血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)、和睾酮(T)的含量。测定结果,初情期开始日龄FJ猪平均为104.3±11.50天,L猪为235.0±1.95天。两猪种首次发情周期内外周血清中同种生殖激素有相似的变化趋势。在首次情期内,FJ和L猪的FSH平均含量分别波动在28.6±8.6～49.4±6.0ng/ml和16.8±2.5～38.9±0ng/ml之间;FSH总平均含量FJ猪组(37.8±2.7)显著高于L猪(27.0±3.1ng/ml)P<0.05;FJ猪发情0～2小时的FSH平均含量(34.4±2.1ng/ml)极显著地高于L猪(22.2±1.7ng/ml)P<0.001。排卵前LH峰均值FJ猪组(5.31±0.75ng/ml)显著高于L猪组(1.83±0.75ng/ml)P<0.05。发情当天(0天)E_2达峰值,FJ和L猪组分别是30.5±3.9和20.4±5.3pg/ml,两者无显著差异(P>0.05)。FJ和L猪组各自的P_4(ng/ml)和T(pg/ml)分泌呈显著正相关,相关系数依次为γ_F=0.71,P<0.05,γ_L=0.95,P<0.01。LH、FSH的含量高很可能是FJ猪高排卵率的重要因素之一。     

宁夏滩羊发情周期血液中促黄体素(LH)、孕酮、雌二醇——17β含量的测定

用放射免疫测定法测定了宁夏滩羊母羊(13只)外周血清中促黄体素(LH)、孕酮及雌二醇—17β的含量及其变化。血清LH的含量,在黄体期,其值很低,为5.0±0.41ng/ml,到发情开始后约6—12小时增至75.13±17.64ng/ml。孕酮含量的变化,在周期的黄体期,其值最高为2.84±0.10ng/ml;而在发情开始到发情后第二天最低0.52±0.06ng/ml。雌二醇—17β的含量是在发情开始前6—24小时时上升的;其值的变化范围是从黄体期的14.86±1.24Pg/ml到发情开始时的38.7±5.8Pg/ml。     

酒精阳性乳中环腺苷酸与环鸟苷酸含量的测定

通过对酒精阳性牛乳与阴性牛乳中环腺苷酸(cAMP)与环鸟苷酸(cGMP)的定量分析，发现酒精阳性牛乳中cAMP上升、cGMP下降、cAMP／cGMP上升。结果显示，酒精阳性乳症的发生是细胞调节水平异常所致。     

人工家养黑熊血清六种无机离子测定

本文测定了26只人工家养中国黑熊血清六种无机离子(钾、钠、钙、氯、磷和镁)的含量。其结果如下黑熊血清钾含量为4.43±0.71 mEq/L,血清钠为143.69±20.62mEq/L,血清钙为11.19±1.24mg/100ml,血清氯为103.97±8.56mEq/L,血清无机磷为5.17±0.65mg/100ml,血清镁为4.54±0.79mEq/L。     

小麦保护处理对山羊内分泌影响的研究

近年来的研究证明乳汁中酪蛋白在消化道降解过程中能产生酪啡肽(7肽) ,在一些谷物蛋白的酶解过程中也同样能产生这类生物活性多肽。我们的前期工作发现 ,小麦的胃蛋酶水解产物富含阿片肽样活性物质。本文主要研究经保护处理的小麦对反刍家畜采食及内分泌代谢的影响。在4只空怀母山羊进行试验 ,平均体重(24.75±0.73)kg,试验期小麦进行保护预处理 ,精料由88.5 %小麦全粉、10 %磷酸氢钙、0.5 %尿素组成 ,每天喂给400克/头(分2次) ,自由采食青草 ,自由饮水。对照期、试验期各25天。连续取血样结果显示 ,对照期和试验期相关平均值分别为 :采食量(4.656±0.231)、(6.413±0.039)kg/d(P≤0.001) ,血清生长激素总体水平(GH)为(23.170±0.891)ng/ml、(26.792±1.003)ng/ml(P≤0.01);血清胰岛素(18.103±1.035)ng/ml、(23.983±1.600)ng/ml(P≤0.01) ,血清氨基氮(0.102±0.003)mM/ml、(0.140±0.004)mM/ml,血清氨氮(0.206±0.012)mM/ml、(0.086±0.006)mM/ml(P≤0.01)。结果表明 ,小麦经保护处理后能够显著促进采食量并提高内分泌水平。这对于提高饲料利用率、促进生长具有重要意义。     

盐酸沙拉沙星在兔体内的药物动力学及生物利用度研究

选用24只健康哈白兔，分3组，每组8只，进行药物动力学研究。静注、内服和肌注剂量均为10mg/kg。以反相高效液相色谱法，测定了血清中的药物浓度，所得药时数据用MCPKP程序处理，得出了药动学参数，拟合方程及肌注和内服的生物利用度。结果表明，哈白兔静注盐酸沙拉沙星后的药时数据符合无吸收因素二室模型，主要药动学参数如下Vd4.67±0.75L/kg，t1/2α0.54±0.12h，t1/2β4.43±0.186h，AUC13.86±2.63μg/ml*h，ClB0.75±0.16L/kg*h。兔内服盐酸沙拉沙星后，药时数据符合一级吸收一室开放式模型，主要药动学参数如下t1／2ka0.36±0.08h，t1/2Kel5.94±1.09h，tmax1.53±0.15h，cmax0.41±0.09μg/ml,AUC4.19±0.86μg/ml*h，生物利用度为30.22%。兔肌注盐酸沙拉沙星后，药时数据符合一级吸收二室开放式模型，主要药动学参数如下t1/2ka0.06±0.01h，t1/2α0.83±0.16h，t1/2β5.01±1.14h，AUC10.75±1.38μg/ml*h，tmax0.27±0.02h，cmax3.52±0.38μg/ml，生物利用度为77.58%。     

双峰驼排卵机制的研究——Ⅲ输精诱导排卵前后外周血浆促黄体素、孕酮和17β-雌二醇的变化

为了研究双峰驼精液诱导排卵的机制,本文用放射免疫测定法对双峰母驼人工输精诱导排卵前后外周血浆促黄体素(LH)孕酮(P)和17β一雌二醇(E_2)的含量进行了测定。母驼在卵泡发育周期中,LH的基础水平为2.7±1.2ng/ml。输精后4小时LH达到高峰,峰值为6.9±1.0ng/ml,约为基础水平的2.6倍。输精后30～48小时内排卵。在卵泡自然萎缩前一天也出现一个LH小峰(5.3±2.5ng/ml)。 在卵泡发育周期中,血浆孕酮处于低水平(0.36±0.28ng/ml)。诱导排卵后第3天增加到1.73±0.74ng/ml,第8天可达2.40±0.86ng/ml。血浆雌二醇在卵泡发育周期中平均为26.8±9.0Pg/ml,到卵泡成熟时可达30.8±5.1pg/ml,排卵后立即下降到19.0±4.1Pg/ml。但在排卵后3天又上升到29.8±6.5Pg/ml,在其它家畜中未见这种情况。 实验中设置7种对照组,证明双峰驼的排卵仅仅是由具有生殖能力的公驼精液诱导产生的,表明在这样的精液中可能存在着与排卵有密切关系的诱导排卵因子。     

农户舍饲奶牛血清钙及游离羟脯氨酸水平测定

采用氯胺T比色法和EDTANa_2滴定法,对重庆市农户舍饲奶牛不同泌乳阶段血清中游离羟脯氨酸与血清钙的水平进行 测定,旨在调查试验条件下奶牛血钙代谢情况以及骨营养不良发生的可能性。结果显示: 在农户全舍饲条件下,血清钙含量Ⅱ组显著低于Ⅴ组、Ⅵ组,其它各组间差异不显著;Ⅰ～ Ⅵ组血清羟脯氨酸含量分别为2.32±0.37μg/ml、2.36±0.59μg/ml、2.02±0.54μg/ml、1.90±0.44μg/ml、1.98±0.45μg/ml、1.79±0.18μg/ml,Ⅰ、Ⅱ组与Ⅵ组差异极显著。采样后2-3个月内进行临床观察,血清游离羟脯氨酸水平与骨营养不良发生率呈现一致性变化。而钙磷摄入不足,比例不当是主要原因。     

谷精草有效成分分析及体外抗菌活性测定

采用试管法和圆形滤纸层析法分析鉴定了谷精草的化学成分,结果表明:谷精草含有生物碱、酚性成分、有机酸、黄酮及其甙类、挥发油、植物甾醇、鞣质等化学成分。用纸片法和试管法对谷精草水提取液进行了体外抗菌作用试验,结果表明:谷精草水提取液对金色葡萄球菌、链球菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌等兽医临床常见病原微生物都有较强的抗菌作用,抑菌圈直径分别为12.16±0.33mm,15.36±0.29mm,13.57±0.61mm,8.63±0.26mm,9.88±0.72mm;谷精草水提取液对金色葡萄球菌、链球菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.125g/ml、0.063g/ml、0.125g/ml、0.5g/ml、0.25g/m;最低杀菌浓度(MBC)分别为0.25g/ml、0.125g/ml、0.25g/ml、1g/ml、1g/ml。