供体细胞对猪体细胞克隆胚胎早期发育的影响

以中国农业大学实验用小型猪香猪胎儿成纤维细胞、成年耳成纤维细胞和颗粒细胞3种细胞系为供体细胞进行核移植。比较了血清饥饿法和接触抑制法处理胎儿成纤维细胞诱导进入G0／G1期的效率，发现二者差异不显著（P〉0．05），血清饥饿2d和4d差异不明显，同样接触抑制2d和4d差异也不显著（P〉0．05）。系统研究了影响克隆胚胎发育的供体因素：血清饥饿与否、细胞形态、细胞类型及个体差异等，结果表明：血清饥饿处理对克隆胚的早期发育没有明显的促进作用；圆形光滑细胞有利于细胞融合，对早期发育无显著影响（P〉0．05）；不同个体、不同类型的供体细胞对克隆胚囊胚发育率有一定的影响。     

银狐发情、受精及胚胎早期发育研究

本实验选择 12只雌性银狐 ,观察繁殖期发情、排卵、受精及胚胎早期发育情况。研究结果表明 ,银狐属季节性单次发情动物 ,繁殖期处于 1月末至 3月初 ,排卵时间在初次接受交配后 2 5～ 2 7小时 ,持续排卵时间为 3天左右 ,而且陆续排卵。在初次配种后 3～ 4天 ,6～ 7天 ,9～ 10天和 11～ 12天 ,回收的胚胎分别发育到 3～ 4细胞 ,8～ 32细胞 ,桑椹～早期囊胚和扩张囊胚阶段。     

延边黄牛体细胞克隆早期胚胎部分超微结构的研究

为了解延边黄牛体细胞克隆早期胚胎的超微结构特征,以延边黄牛体细胞克隆早期胚胎为研究对象,应用透射电子显微镜对延边黄牛体细胞克隆早期胚胎发育各时期的线粒体和细胞核等超微结构进行了观察。结果表明,延边黄牛体细胞克隆早期胚胎随着胎龄的增长,帽状线粒体逐渐减少,成熟线粒体增多;核仁由絮状到致密,最后呈网状化。     

影响胚胎早期发育环境因素的研究进展

母体妊娠期的组织器官对各种物质的代谢发生明显改变，对外界环境因素的影响极为敏感。此时各种有害因素都可能引起胚胎的损害，特别是胚胎发育初期。本文就多年来国内外学者对环境因素对胚胎发育初期的危害、机理和后果的研究现状进行综述。     

分化抑制物对动物胚胎干细胞克隆率的影响

胚胎干细胞是从动物胚胎内细胞团或原始生殖细胞分离的具有全能性的细胞，在遗传学、发育生物学和细胞工程领域具有广阔的应用前景。抑制胚胎干细胞分化和促进胚胎干细胞增殖是克隆胚胎干细胞的关键，本文介绍了饲养层、条件培养基、分化抑制因子对哺乳动物胚胎干细胞分离与克隆的影响，并探讨了白血病抑制因子影响胚胎干细胞克隆的机理，认为在饲养层中添加分化抑制因子能有效提高胚胎干细胞克隆率。     

培养液中添加物对牛卵母细胞体外成熟、受精和胚胎早期发育的影响

<正>1951年Chang和Austin首次发现哺乳动物精子获能现象,开创了哺乳动物体外受精(IVF)研究的新时代。自Brackett于1982年获得世界上第一头试管犊牛以来,IVF技术得到迅速发展。但牛胚胎体外化生产技术是一个复杂的过程,不仅受各种人为因素的影响,还受到培养液等环境条件的制约,使体外受精胚胎发育率较低。本文就培养液中添加不同物质研究其对牛卵母细胞体外成熟、受     

细胞外环境中分化抑制物对动物胚胎干细胞克隆率的影响

介绍了饲养层、条件培养基、分化抑制因子对哺乳动物胚胎干细胞分离与克隆的影响，并探讨了白血病抑制因子影响胚胎干细胞克隆的机理。     

哺乳动物早期胚胎体外发育阻滞的产生与克服

哺乳动物早期胚胎发育阻滞是体外培养条件下普遍存在的现象。文中就离体情况下由于生长环境的变化使早期胚胎所遭受到外界因素的影响进行了探析。综合国内外研究报道，提出通过改善培养条件和利用体细胞共培养，克服早期胚胎的体外发育阻滞。旨在为哺乳动物胚胎的体外培养提供一些参考。     

牛体外受精胚胎早期发育过程中基因差异表达的研究

本研究旨在筛选牛体外受精胚胎早期发育差异表达基因,并进行差异表达分析。选取牛卵母细胞、体外受精8细胞期和囊胚期胚胎为试验材料,进行mRNA差异表达研究。初步克隆出4个牛卵母细胞和早期胚胎发育不同阶段差异表达的基因,同源性分析显示,它们分别与高移动样蛋白盒结构域4基因(HMGXB4)、热休克蛋白40亚家族C成员8基因(Dnajc8)、突触膜胞吐调节2基因(RI MS2)和核糖体蛋白L31基因(RPL31)高度同源。RT-PCR检测验证,HMGXB4、Dnajc8、RI MS2和RPL31在牛卵母细胞和早期胚胎发育过程中mRNA表达量存在时间性差异,可能与其参与不同的生理活动有关。     

猪早期胚胎在体内发育及分布的研究

猪是我国重要的家畜之一。然而过去对其胚胎早期发育过程的研究报道甚少。本项研究对猪受精后至１９２ｈ前的早期胚胎发育过程以及在其生殖道内的分布进行了研究。结果表明，猪胚胎胚龄７２ｈ左右时，胚胎均分布在输卵管内，猪胚胎发育期为８细胞前期；７２ｈ至１２０ｈ期间，猪胚胎已进入子宫角，分布比较集中于靠近宫管结合部，胚期已发育至桑椹期：１２０－１９２ｈ胎龄的猪胚已发育形成囊胚；到１９２ｈ时，胚胎已分布在整个子宫     

以囊胚双重染色方法检测果糖对胚胎早期发育效果的影响

本试验结合囊胚细胞(TCM/TE)双重染色方法研究了果糖代替葡萄糖后对牛早期胚胎体外发育效果的影响。结果显示,对第8d囊胚双重染色时,以TritonX-100处理60-69s为宜,TCM细胞数和囊胚细胞总数分别为48.2±12.4和142.5±30.1,二者之比约为0.33;果糖组与葡萄糖组卵裂率(62.2%±3.87vs61.7%±2.89)、囊胚率(32.1%±1.73vs29.7%±4.16)差异均不显著(P0.05),而且,TCM细胞数(43.6±14.5vs40.2±11.3)和TE细胞数(99.3±26.7vs89.9±24.8)差异也不显著(P0.05)。但是数据显示,囊胚细胞总数果糖组要高于葡萄糖组(142.3±21vs136.2±35,P0.05),说明果糖可以代替葡萄糖作为早期胚胎体外培养的能量代谢底物,而且可以提高囊胚质量。     

影响胚胎早期发育环境因素的研究进展

妊娠期生理状态的改变,使母体对治疗药物和各种环境有害物质的吸收、分布和排泄发生了较大的改变。在发育初期,胚胎对治疗药物和环境因素的影响极为敏感,此时各种有害因素都可导致胚胎的损伤,甚至丢失。许多药物和环境因素是引起早期胚胎死亡或胎儿畸形的主要因素。环境类激素可直接作用于中枢神经内分泌调节系统,引起生殖激素分泌紊乱,出现生殖率下降和胚胎发育异常。重金属铅、镉、汞、砷可导致早期胚胎的丢失,或使胎儿出现畸形。对于药物和环境因素对胚胎发育的毒性评估,妊娠动物服用的剂量对妊娠结果仍然是最基本的方法,而用BBDR模型来反映药物在低剂量情况下的作用以及在种间变化是近年来常用的模型。另一方面,细胞和分子的水平上观察环境毒物造成畸胎发生的机理也是活跃的研究领域。     

小鼠早期胚胎发育过程中的DNA去甲基化

表观遗传修饰在基因转录与表达、细胞生长与分化以及动物个体正常发育等过程中都具有重要的调控作用。表观遗传修饰发生异常,会引起机体生长发育中的各种异常。哺乳动物从精卵受精到附植前的胚胎早期发育阶段会发生重要的表观遗传重编程,主要包括DNA甲基化和组蛋白修饰。精卵受精后DNA发生主动和被动2种方式的去甲基化。本文主要综述了与DNA甲基化相关的蛋白和早期胚胎发育过程中的去甲基化机制,并对小鼠附植前胚胎发育过程中的DNA甲基化的动态变化进行了详细的论述。     

体细胞克隆的小鼠胚胎在附植前后发育的研究

采用成年小鼠的卵丘细胞核、胎儿成纤维细胞作核供体细胞来进行核移植,研究小鼠卵母细胞的去核程序和影响重构胚附植前发育的激活条件;随后将重构胚与供体细胞系共培养后获得囊胚阶段的小鼠重构胚,并将其移植到受体鼠体内后获得了24%克隆胚胎。结果表明,小鼠卵母细胞质能够进行重编程来支持早期的胚胎发育。     

兔核移植胚胎的克隆研究

本研究改进了兔受体卵母细胞的去核程序及供体卵裂球的处理方法，并对核移植胚的体外克隆、继代克隆及克隆胚的体内发育进行了试验。结果表明：卵龄对受体卵母细胞的去核具有显著的影响，卵龄为１５～１８ｈ的去核率为１００％（４５／４５），显著高于１３～１４ｈ的４６．６％（７／１５），Ｐ＜０．０１。ＤＮＡ合成抑制剂Ａｐｈｉｄｉｃｏｌｉｎ处理１６－细胞期卵裂球后，重组胚的囊胚发育率５４％（２０／３７）高于未处理组的４５％（１４／３１），Ｐ＜０．０５。从２枚１６－细胞供体胚分别获得来自一个供体胚的９枚和７枚核移植克隆囊胚，囊胚发育率为５１．６（１６／３１）。然而第一次继代核移植胚的囊胚发育率仅为１１．５％（６／５２）。１６－及３２－细胞期卵裂球的重组胚可发育至产仔，共获２窝８只仔兔。其中１只、２只、２只和３只仔兔分别来自４个供体胚。     

影响牛早期胚胎体外发育的因素

早期胚胎的体外培养系统比较复杂，包括培养液、温度、气相、湿度、pH值、渗透压、离子浓度、能量来源、血清成分、光、水质和培养皿等等。不同物种的早期胚胎代谢具有差异性，而培养液的组成又极为复杂，这可能是造成各种胚胎培养基差异的根本原因。因为简单培养液不能较大限度地满足胚胎发育的需求成分，所以现在一般培养胚胎都用复合培养液。     

热休克蛋白对胚胎早期发育的影响

热休克现象是1962年R itossa首先在果蝇幼虫动物试验中发现的。试验发现,果蝇唾液腺染色体在过热环境中会发生形态改变。此现象与细胞中一类特殊蛋白质———热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)的合成有关,因其最先在热休克现象中发现而得以命名。热休克蛋白除了因热休克刺激产生以外,还有很多因素(如缺氧、低温、氧化反应、化学物质、各种重金属、放射线、某些线粒体呼吸链抑制剂及某些药物等)都可以诱导产生,因此热休克蛋白又称为应激蛋白质(stress protein)。HSP70和HSP90是分子质量分别在70,90 ku左右的热休克蛋白,是热休克蛋白家…     

影响犊牛早期胚胎体外发育的因素

犊牛超数排卵不但可为科研和生产提供大量可用卵母细胞,而且对于加快育种进程、缩短育种间隔、基因优良个体扩繁等存在巨大的潜力和意义。但是,多数研究表明犊牛卵母细胞在体外发育方面还不及成年牛卵母细胞,文章就诱导犊牛卵泡发育取得的主要研究成果和犊牛卵母细胞及其胚胎在发育等方面存在的问题及其影响因素进行了综述。     

应用B-超对小尾寒羊早期胚胎和胎盘发育的研究

应用B-超监测10只健康的妊娠小尾寒羊,以研究早期胚胎和胎盘的发育过程。结果表明,早期胚体发育在妊娠第6周完成;妊娠30～46d,羊膜囊的短径与胎龄之间存在线性关系(R=0.9528,P<0.01),回归方程为Y=0.565065X 18.751970(Y:妊娠天数,X:羊膜囊宽)。胎盘发育期集中在妊娠前11周,在此期间胎盘突直径也可用于预测胎龄,二者之间的方程式为:Y=4.961429X-16.655714(Y:胎盘突直径,X:妊娠周),相关系数R=0.9882(P<0.01)。     

免胚胎细胞核移植重组胚的发育力

以兔为模型 ,对影响胚胎细胞核移植重组胚发育力的电融合与激活参数、体外培养系统进行了探索性研究。结果表明 ,有利于重组胚发育力的适宜电融合与激活参数为 2 0 0 V/ m m的电场强度、10 0μs的脉冲宽度 ;在不同的体外培养系统中 ,TCM- 199培养液内于兔胎儿成纤维细胞饲养层 (REF feeder)上共同培养的重组胚获得了最高的 2～ 4-细胞发育率和桑椹胚或囊胚的发育率 ,分别为 6 5 .7%和 2 2 .9%;移植 111枚重组胚给 9只假孕母兔 ,其中 2只妊娠 ,1只完成足月妊娠产出 2只克隆仔兔 ,另 1只在妊娠 2 2 d流产 1只克隆死胎。