丰花月季愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系。结果表明,丰花月季叶片和茎段是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是NAA 4 mg·L-1+2,4-D 1 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.5×104～3.0×104个.mL-1时;继代培养4～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系。     

当归愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养的研究

为了建立当归愈伤组织的诱导及其细胞悬浮培养的技术体系,采用正交试验法研究不同植物生长调节剂对当归叶柄、根尖和叶片愈伤组织诱导的影响,以及采用植物细胞悬浮培养技术研究当归不同外植体细胞的生长特性及其活性成分的积累规律.结果显示,叶柄最易诱导出愈伤组织,其次是根尖和叶片,2,4-D对当归不同外植体愈伤组织的诱导均具有极显著的效果,其中诱导叶柄和根尖愈伤组织形成的最佳组合均为1.0 mg/L 2,4-D+ 0.2 mg/LNAA+ 0.4 mg/L 6-BA,诱导率达到80％以上.此外,当归根尖和叶柄细胞分别悬浮培养至15、21 d时,细胞量分别为926.7、990.6 mg/L;根尖细胞悬浮培养至21 d时,阿魏酸和藁本内酯的含量分别达到为96.6、167.5μg/g.结论为,当归叶柄和根尖均是诱导愈伤组织形成的适宜外植体和应用于细胞悬浮培养的最佳细胞来源.     

花椒愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

以花椒试管苗叶片为试验材料,研究了不同激素浓度对花椒愈伤组织继代培养的影响,并以多次继代得到的疏松、活性高的愈伤组织建立花椒细胞悬浮系。结果表明:花椒愈伤组织最适继代培养基为MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂6g·L~(-1);花椒细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:MS+2,4-D 1.0mg·L~(-1)+6-BA 1.0mg·L~(-1)+葡萄糖30g·L~(-1),接种量0.05g·mL~(-1),摇床转速110r·min~(-1),25℃暗培养,该条件下悬浮细胞生长良好,最大生长量为4.52g;花椒悬浮细胞生长呈"S"型曲线,最适继代周期为16d。     

土人参愈伤组织诱导及细胞悬浮培养研究

[目的]建立土人参愈伤组织的诱导、增殖继代培养及其细胞悬浮培养的技术体系。[方法]研究不同植物激素组合对叶片、茎段愈伤组织诱导的影响;采用液体振荡培养法测定叶片愈伤组织细胞悬浮生长曲线。[结果]叶片最易诱导产生愈伤组织,最佳诱导、增殖培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋6-BA0.5 mg/L（pH5.8）。由叶片愈伤组织建立的细胞系生长呈＂S＂型曲线,最适继代周期为15 d。[结论]以叶片为外植体经愈伤诱导、增殖培养可建立良好的细胞悬浮系。     

人参胚愈伤组织诱导和悬浮培养的研究

[目的]建立一种从人参胚诱导愈伤组织并进行悬浮培养的方法,考察这种悬浮细胞的生长和人参皂苷积累情况。[方法]以人参胚为外植体,在添加了2,4-D3mg/L、NAA2mg/L和6-BA0.5mg/L的MS培养基上诱导愈伤组织。选取经8次继代培养的松散的愈伤组织在含有同样激素的液体培养基中进行悬浮培养。继代悬浮培养5次后测定悬浮细胞生长曲线,用高效液相色谱（HPLC）技术分析细胞中所含的人参皂苷。[结果]有活性的人参胚愈伤组织的诱导率为100%。用这种愈伤组织建立的悬浮培养体系生物量在21d内可增加1.5倍,悬浮培养物至少含有6种人参皂苷,其中Rb1、Rg和Re的含量较高,分别为细胞干重的0.44%、0.35%和0.37%。[结论]由人参胚诱导的愈伤细胞进行悬浮培养比较容易,生长良好,含有较丰富的人参皂苷。     

高山红景天愈伤组织诱导及生长的研究

以高山红景天种子、试管苗的叶片、茎等为外植体，研究了影响愈伤组织诱导和生长的激素浓度和光温条件．结果表明，在浓度为2．0，8．0mg／L的NAA和浓度为3.0，5．0，8．0mg／L的6-BA配合的MS培养基上得到了较好的愈伤组织诱导效果，附加2，4-D时浓度为1．5mg／L的愈伤组织诱导率显著高于0．5mg／L浓度，特别是与浓度为5．0，8．0mg／L的6-BA配合时效果更明显．适合愈伤组织生长的温度为20～24℃，光照长度为12～14h．     

百里香愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以普通百里香无菌苗的茎段和叶片为材料,对百里香愈伤组织诱导和继代增殖的最佳培养条件进行研究,并对悬浮细胞的生长特性进行监测,初步建立细胞悬浮培养体系.结果表明,茎段是诱导愈伤组织和进行悬浮培养的理想外植体,愈伤组织最佳诱导培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D0.5 mg/L,最...     

苦瓜愈伤组织的诱导及悬浮培养体系的建立

以苦瓜子叶、上、下胚轴为外植体,在添加不同浓度激素组合的培养基上诱导和继代愈伤组织,比较愈伤组织的状态与生长情况,并对悬浮细胞培养条件进行了优化。结果表明,上下胚轴在添加2,4-D2.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1或NAA1.0mg·L-1+6-BA4.0mg·L-1的MS培养基上均可诱导出状态良好的愈伤组织,愈伤组织在添加2,4-D0.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1的继代培养基上能长势最好,添加30g·L-1蔗糖和3.0g·L-1活性炭的B5培养基有利于苦瓜悬浮细胞的快速增殖。     

海巴戟天愈伤组织诱导及细胞悬浮培养试验

以海巴戟天叶脉作为外植体,在B5 培养基上诱导出淡黄色、疏松愈伤组织,通过增殖后接种到液体培 养基中,建立细胞悬浮培养体系,并对影响细胞悬浮培养的培养基种类、接种量、pH 值、蔗糖含量等因素进行了研 究。结果表明院B5 + 1 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L 6-BA 能诱导出淡黄色、质地疏松的愈伤组织;较佳愈伤组织增殖培养 基为B5 + 2 mg/L NAA + 0.2 mg/L KT;细胞在B5 + 2 mg/L NAA + 0.2 mg/L KT 培养基中悬浮培养,接种量60 g/L（细 胞鲜重）、蔗糖4%、pH 值5.8、100 r/min、27益下暗培养,海巴戟天悬浮细胞比生长速率为0.0836 d-1,总蒽醌含量 367.8 mg/L,培养周期27~30 d。     

高山红景天愈伤组织的诱导和植株再生的研究

本文报道了高山红景天(Rhodiola Sachlinensis A.Bor)种子、子叶、胚轴、籽苗及试管苗叶片的脱分化和植株再生。用MS基本培养基附加1 mg/L 6-BA、0.5mg/L 2,4-D,种子脱分化形成愈伤组织,诱导频率为76％;附加2.0mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA,子叶、胚轴、籽苗、试管苗叶片脱分化形成愈伤组织,诱导频率分别为66％、100％、50％、100％。愈伤组织的分化实验表明,以种子为外植体诱导的愈伤组织分化能力最强,以胚轴为外植体诱导的愈伤组织不能分化。从不同激素种类和浓度的组合对愈伤组织生长和分化的效果看,MS基本培养基附加1.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA最有利于愈伤组织分化,而附加3 mg/L 6-BA、0.3mg/L NAA最有利于愈伤组织生长。经观察基本培养基MS、1/2MS、1/2MS+0.5 IAA、1/2MS+1 IAA对苗子的生根效果发现,MS基本培养基的生根效果最好。利用种子诱导愈伤组织,然后分化成植株的方法,可作为快速繁殖高山红景天的手段。     

胆木愈伤组织与悬浮细胞培养研究

通过组织培养技术,利用胆木（Nauclea officinalis）种子无菌实生苗的茎段、叶片、叶柄等进行愈伤组织的诱导及悬浮细胞的培养。结果如下：（1）以WPM为基本培养基,获得愈伤组织高诱导率的激素种类及浓度为①0.5 mg/L 2,4-D、②0.5～1.5 mg/L IBA＋（0.0,0.5 mg/L）6-BA,诱导率达到100%;（2）在外植体的差异上,茎段和叶片出现愈伤组织的时间较早、增殖系数最大,可达15倍;（3）在培养基1/2WPM＋0.5 mg/L2,4-D＋30 g/L蔗糖中,继代周期为14～17 d,胆木细胞悬浮培养增殖率可达30.16%。     

番茄愈伤组织诱导与细胞悬浮培养方法的改良

[目的]探讨番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件。[方法]用番茄的子叶作为外植体,研究不同浓度2,4-D与6-BA组合诱导"美国红"番茄子叶愈伤组织形成、不定芽发生的情况。[方法]在MS基本培养基上附加不同水平6-BA和2,4-D的培养基中,愈伤组织形态发生的情况不同,其中激素含量起主要作用。子叶外植体以MS+2,4-D0.05mg/L+6-BA0.01mg/L为最佳再生培养基,对愈伤组织的形成和不定芽的分化都有良好的效果。不同生长调节物质对细胞的悬浮培养有一定的影响,以2,4-D0.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT0.05mg/L的浓度组合为最佳。[结论]该研究确认了番茄愈伤组织及细胞悬浮培养的最佳培养条件,为番茄组织培养奠定了基础。     

大红红景天愈伤组织的诱导及植株再生体系的建立

以大红红景天根、茎、叶为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖的主要因素.结果表明,叶片的诱导效果为最好,且叶片切块的最佳培养基为MS 6-BA0.50mg/L IAA2.00mg/L,诱导频率达85%.大红红景天叶片切块经诱导可产生3种类型的愈伤组织,其中只有紫红色的愈伤组织属于胚性愈伤组织易诱芽,分化培养基MS 6-BA0.05mg/L IAA0.50mg/L有利于芽的分化和增殖.本研究建立了一套有效的以叶片为外植体的大红红景天的组织培养再生体系.     

一品红愈伤组织诱导·增殖及悬浮系建立的研究

[目的]为一品红原生质体融合及遗传转化等相关研究奠定基础。[方法]以一品红品种"喜庆红"的顶芽和带芽茎段为外植体,进行愈伤组织诱导、增殖及悬浮系建立的研究。[结果]以浓度0.1%升汞处理顶芽和带芽茎段的时间分别以6 min和10 min为宜。在MS固体培养基里分别添加活性炭、PVP和Vc后,愈伤组织在培养过程中褐化程度有所减轻,但与对照相比差异并不显著。[结论]一品红愈伤组织悬浮系的适合继代周期为7~8 d。     

Study on separation and purification of oligomeric proanthocyanidin from Rhodiola rosea

The objective was to study the technology for the separation and purification of oligomeric proanthocyanidins from Rhodiola rosea and establish the best operating conditions. First, the oligomeric proanthocyanidins was extracted by ethyl acetate from rough-extracted R. rosea liquid using an optimized technique. Its purification was achieved by macroporous resins. Five kinds of macroporous adsorbent resins were compared for the adsorption and desorption performance of procyanidins, the concentration and pH value of both the extracted sample and the eluant were investigated. According to the results, the optimized conditions were as follows: four times of extraction at 25 min each time was effective, the best volume ratio was 1.5:1 (ethyl acetate: extracted solution); AB-8 resin was the best choice; the concentration of the extracted sample was 4.0 g/L, and the pH was 4.5; the ratio of the diameter to height of the chromatography column was 1:40 (cm); 50% ethanol was used as the eluant at pH 5; and finally, the purity of procyanidins reached 88. 3%.     

黑莓愈伤组织细胞悬浮培养条件研究

为获得黑莓细胞悬浮培养的最佳条件,以黑莓品种Kiowa无菌苗叶片、叶柄产生的质地疏松的嫩黄色颗粒状愈伤组织为初始材料,考察了培养基种类、糖种类、蔗糖浓度、激素种类、2,4-D浓度、水解酪蛋白浓度对细胞悬浮培养效果的影响。结果表明:以MS为基础液体培养基、30 g/L蔗糖为碳源、附加1.0 mg/L2,4-D和200 mg/L水解酪蛋白处理愈伤组织,悬浮培养的效果最佳,可以获得最大生物量。