益生菌SFU—9发酵工艺的确定

益生菌具有促进动物生长，提高机体免疫能力等生理功能，常用作微生态饲料添加剂。菌体SFU－9是一株蜡状芽杆菌，该菌株在不利环境下能够以孢子形式存在，具有耐高温，耐酸碱和耐挤压等优点，较乳酸菌，酵母菌等益生菌更能保持活菌状态，适合饲料加工业的需要。该研究以菌株SFU－9进行实验，研究发酵温度，接种量，培养基初始pH值，溶解氧等因素对菌株生长的影响，确定出最佳培养条件为：培养基初始pH值为6．0－6．5，接种量5％（相对摇瓶装液量），培养温度30－32℃，装液量28-33mL/250mL。发醇液中的活菌数可达10^11cfu/mL。在此基础上，采用单因子和正交实验相结合的方法，确定出最佳发酵培养基组成为：玉米淀粉2．0％，啤酒酵母1．5％，NaH2PO40.2%,Na2HPO40.2%,玉米浆2．0％。是以最佳培养基配方给菌体提供营养，在最佳培养条件下培养，可以使发酵液中的活菌数高达10^12cfu/mL.     

抗犊牛腹泻益生菌株BN-9产芽孢条件的优化

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BN-9菌株是一株能够抑制犊牛腹泻病原菌大肠杆菌(Escherichia coli)的益生菌.为提高该菌株的芽孢生成率,对其产芽孢条件进行了优化.采用单因素试验方法,选择益生菌BN-9菌株的适宜碳源、氯源、无机盐;采用正交设计,结合SPSS软件进行分析,优化出BN-9菌株的最适宜的发酵培养基组成和发酵产芽孢条件.BN-9菌株的芽孢生成率最高时,其相应的培养基组成及发酵条件如下:蔗糖为0.25%,黄豆粕粉为1.5%,MgC12为0.01%,MnSO4为0.01%,种龄12 h,接种量4%,装瓶量100 mL·250 mL-1,培养基初始pH 8.0,摇床转速200 r·min-1.37℃发酵培养48h.通过研究,确定了BN-9菌株芽孢生成率最高时的培养基组成和发酵条件;优化后,BN-9菌株的芽孢生成率提高到93.83%.相应的细菌数为2.28x108cfu·mL-1.     

水产养殖用复合微生态制剂的安全性评价

为水产用复合微生态制剂的安全应用提供科学依据,对由蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)组成的复合微生态制剂进行了溶血性试验、小鼠急性毒性试验和斑马鱼急性毒性试验。结果表明:蜡状芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌和酿酒酵母组成的复合微生态制剂的溶血率低于5%,小鼠最大耐受剂量(MTD)大于15 000mg/kg;对斑马鱼的96h-LD50大于10 000mg/L,即该复合微生态制剂实际无毒。     

一株油菜根际促生菌的产芽孢发酵条件优化

[目的]提高从油菜根际分离筛选得到的促生菌蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)QZB24-6的芽孢数量和芽孢产率,为进一步该苗株在复合生物肥中的应用打下基础.[方法]采用单因素和正交试验,研究不同的氮源、碳源、pH、温度、培养时间对蜡状芽孢杆菌形成芽孢的影响.[结果]确定蜡状芽孢杆菌产芽孢培养基的最佳组分为(g/L):乳糖2;、酵母膏1.5;、硫酸锰0.07;、磷酸氢二钠0.4;、磷酸二氢钠0.2;.对发酵条件进行了研究,温度35℃、pH值7.0、接种量4;、装液量100 mL、转速为180 r/min下发酵72 h.[结论]通过优化培养基组分和培养基条件,最终发酵液中活菌数、芽孢数、芽孢产率分别为2.27×108 cfu/mL、2.05×108 cfu/mL、90.31;.     

纳豆芽孢杆菌SFU—18液体深层发酵培养基的优化

采用BPY培养基，在最佳培养条件：温度为37℃、初始pH为7．0、溶氧量为40mL/250mL,230r/min接种量为4％下，测定了纳豆芽孢杆菌菌株SFU－18的生长曲线，从而确定了纳豆芽杆菌的最佳接种种龄以及收获时间。然后，在种子培养液其他成分保持不变的情况下，分别改变氮源、碳源、无机盐、生长因子进行单因素实验（以原种子液为对照），采用L（9）3^4正交表设计实验进行培养基的优化，确定了纳豆芽孢杆菌液体深层发酵的最佳培养基配比为：玉米淀粉1％、豆粕粉5％、玉米浆1．5％、NaClO.2%。     

纳豆芽孢杆菌SFU—18液体深层发酵培养基的优化

采用BPY培养基，在最佳培养条件：温度为37℃、初始pH为7．0、溶氧量为40mL/250mL,230r/min接种量为4％下，测定了纳豆芽孢杆菌菌株SFU－18的生长曲线，从而确定了纳豆芽杆菌的最佳接种种龄以及收获时间。然后，在种子培养液其他成分保持不变的情况下，分别改变氮源、碳源、无机盐、生长因子进行单因素实验（以原种子液为对照），采用L（9）3^4正交表设计实验进行培养基的优化，确定了纳豆芽孢杆菌液体深层发酵的最佳培养基配比为：玉米淀粉1％、豆粕粉5％、玉米浆1．5％、NaClO.2%。     

复合益生菌发酵桑葚汁饮料的工艺优化

[目的]优化益生菌发酵桑葚汁饮料的加工工艺。[方法]以桑葚汁为主要原料,以植物乳杆菌和副干酪乳杆菌为发酵菌种,对桑葚汁添加量、蔗糖添加量、发酵时间、接种量4个因素进行了考察,通过单因素及正交试验,对所制得的发酵桑葚汁饮料进行感官评价,得到发酵工艺的最佳组合,同时对其货架期进行预测。[结果]优化出的最佳发酵工艺:桑葚汁添加量为50%,蔗糖添加量为5%,发酵时间为24 h,接种量为3‰,由此所得的发酵桑葚汁呈红棕色,具有果香及发酵风味,口感酸甜。在0~4℃冷藏条件下贮藏28 d后,活菌数仍有2.1×10~8CFU/m L。[结论]复合益生菌发酵的桑葚汁饮料可作为一款营养保健活菌饮料,具有广泛的市场前景。     

复合益生菌芽孢杆菌发酵培养基及条件的优化

为了获取活菌数高、抗性强、经济效益好的益生菌制剂,对复合益生菌芽孢杆菌制剂的培养基配方及各项发酵工艺参数进行了优化。选取枯草芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌进行联合培养,并采用单因子试验和正交试验对其发酵培养基成分进行了优化,在此基础上对其发酵条件做了进一步优化。优化后最佳培养基成分为:废糖蜜初始pH值7.5,转速160 r/min,接种量8%,装液量40%。经优化后活菌数得到显著提高,达到6.62×1010CFU/mL。     

复合益生菌发酵饲料工艺参数及品质研究

研究以玉米、小麦粉、菜籽粕和豆粕按一定比例混合为原料,采用固态发酵法,探讨复合益生菌接种量、发酵水分、温度、时间等发酵工艺参数对发酵饲料品质的影响.结果表明,菌种接种量、水分、温度和时间均对发酵饲料品质有显著影响,选择适宜的发酵工艺参数,可显著提高饲料乳酸菌数量、乳酸含量、游离氨基酸和粗蛋白体外消化率.本试验中,饲料发酵的适合工艺参数为:复合益生菌接种量5%、发酵水分40%、温度30～35℃、发酵时间3 d,所得发酵饲料表观品质为金黄色、芳香味、质地良好,pH值为4.27,游离氨基酸氮/总氮为13.73%、总菌数为5.50×108 cfu·g-1、乳酸菌数和乳酸含量分别为16.17×108 cfu·g-1和4.86 g·kg-1,干物质回收率为99.04%,粗蛋白体外消化率较发酵前提高了17.81%.     

一株饲用益生蜡样芽孢杆菌的液体发酵研究

[目的]为探明蜡样芽孢杆菌的液体发酵规律。[方法]以玉米粉+豆粕粉+硫酸锰+硫酸镁+磷酸二氢钠+磷酸氢二钠+植物油为发酵培养基,在(30±1)℃、初始pH值7.2、通气量1.5 m3/h、罐压0.04 Mpa、发酵周期54 h条件下,对蜡样芽孢杆菌MYSLY-02进行发酵培养。测定发酵过程中菌体数量及芽孢形成率等的变化。[结果]培养0~6 h时,芽孢杆菌菌体小、数量少,糖度基本不变;培养6~36 h时,菌体数量急剧增多,菌体增大增长,并开始形成芽孢,糖大量消耗;培养36~54 h时,菌体数量基本稳定,菌体基本形成芽孢,糖消耗减慢;培养54 h后,菌体数量减少,部分芽孢开始脱落。反应结束时,细菌浓度达到9.5×109CFU/ml,芽孢形成率达到92%。[结论]确定了蜡样芽孢杆菌液体发酵的最佳条件。     

1株益生蜡样芽孢杆菌发酵培养基优化研究

[目的]通过优化蜡样芽孢杆菌的发酵培养基,提高蜡样芽孢杆菌的生物量。[方法]在初始发酵培养基的基础上,通过单因素试验和正交试验确定蜡样芽孢杆菌发酵培养基的最适碳氮源和碳氮比。[结果]优化后的发酵培养基为:葡萄糖15.00 g/L,可溶性淀粉40.00 g/L,蛋白胨10.00 g/L,玉米浆干粉30.00 g/L,硫酸铵3.00 g/L,磷酸氢二钾5.00 g/L,磷酸二氢钠5.00 g/L,硫酸镁1.25 g/L,硫酸锰0.60 g/L,氯化钙2.00 g/L。优化后蜡样芽孢杆菌在50 L不锈钢发酵罐中的发酵液活菌数达1.6×1010cfu/m L,较优化前提高了1个数量级。[结论]优化后的蜡样芽孢杆菌发酵培养基大大提高了该菌的生物量,为工业化放大生产提供了参考。     

枯草芽胞杆菌B13液体发酵培养条件的优化

枯草芽胞杆菌B13是一种良好的微生态制剂原材料,为了增加枯草芽胞杆菌B13的芽孢产量,研究采用单因素试验对接种量、培养时间、机械搅拌程度、装液量和消泡剂添加量等发酵条件进行了优化。结果表明,接种量0.5%,发酵液中添加4根玻璃棒和0.4%的豆油,装液量为容器的1/10,37℃下以200 r/min的转速振荡培养8~48 h,可获得较高浓度的菌体。     

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)液体发酵条件

采用单因素试验和正交试验对筛选出的1株生防拮抗菌——枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的液体发酵培养基和工艺条件进行优化。确定了最佳的培养基配方为:蔗糖20g·L-1、硫酸铵5g·L-1、麸皮50g·L-1、柠檬酸三钠2.5g·L-1、K2HPO·43H2O0.3g·L-1、MgSO4·7H2O0.5g·L-1、FeSO4·7H2O0.05g·L-1;最适发酵条件为:发酵温度30℃,初始pH值7.2,最适接种量5%;进行了100L发酵罐放大培养,20h达到生长高峰期,生长周期24h,最适放罐时间为26￣28h;此时所获得的菌体数量约为6×109个·mL-1。     

产纤维素酶枯草芽孢杆菌C-36的产酶条件研究

以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5.0,产酶最适温度为37℃。在此条件下,培养36 h后达到产酶高峰,CMC酶活为196.33 U/mL,是优化前的3倍。     

添加凝结芽孢杆菌对生长猪生产性能的影响

目的在含有抗生素的肉鸡饲粮基础上,额外添加饲用益生菌凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans),研究凝结芽孢杆菌与抗生素组合使用对1~21日龄AA肉仔鸡生产性能的影响。方法98只1日龄AA肉鸡分为2个处理组：对照组,添加抗生素(50 mg/kg金霉素、60 mg/kg盐霉素钠);试验组,在对照组基础上额外添加3×10⁶ cfu/g (全价配合饲料)凝结芽孢杆菌。试验周期21 d,至肉鸡21日龄,屠宰试验鸡,重点分析生长性能、血液生化指标及免疫器官指数。结果试验组肉鸡的末体重和平均日增重分别比对照组增加约4.54%和4.84%,但差异不显著(P>0.05)。1~21日龄阶段,试验组与对照组肉鸡的料重比基本一致(P>0.05);然而,试验组肉鸡腹泻率约8.2%,低于对照组14.3%。21日龄试验组肉鸡血清的葡萄糖、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇含量以及丙氨酸氨基转移酶活性等指标显著高于对照组(P<0.05)。此外,试验组与对照组之间的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数等免疫器官指标无显著差异(P>0.05)。结论在含抗生素的肉鸡饲粮基础上额外增加3×10⁶ cfu/g凝结芽孢杆菌饲用益生菌,进一步提高了幼龄(1~21日龄) AA肉鸡的生产性能,主要表现在腹泻率、平均日增重的改善作用。血液生化指标结果也显示：凝结芽孢杆菌改善肉鸡生长性能与提高饲料碳水化合物和脂肪的消化、吸收效率有关。研究结果对促进凝结芽孢杆菌饲用益生菌产品在肉鸡实际养殖及饲料配方中的应用具有科学价值与生产指导的实际意义。