芜菁花叶病毒提纯技术的研究

将繁殖于大白菜上的病叶榨汁,结合聚乙二醇(PEG)沉淀及差速离心技术,拟定三种提纯程序,所得芜菁花叶病毒(TuMV)粗提纯物,可侵染芜菁、萝卜和大白菜,并在苋色藜和普通烟黄茵榆上产生局部枯斑。测定提纯物表现出典型的核蛋白紫外吸收光谱,在电镜观察下,其丝状病毒粒子形态清晰且排列疏松均匀、病毒粒子长度集中分布在730nm、宽12～13nm。用水醋酸分解、可获得本病毒的提纯的衣壳蛋白,它具有典型蛋白质紫外吸收光谱,上述三种提纯程序中,以第三种程序最佳。初步认为,若设备不足情况下省用蔗糖密度梯度离心步骤,仅用第三种提纯程序,亦可获得较好提纯效果。     

引起二月兰花叶病的芜菁花叶病毒研究

在表现花叶,植株矮化,茎叶坏死和畸形的十字花科观赏植物二月兰９Ｏｒｙｃｈｏｐｈｒａｇｍｕｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓ）上分离到一种线状病毒,其病毒粒子分布范围灯７８０－８００ｎｍ。通过寄主反应测定,病毒提纯和形态观察,血清学反应测定,确定该病毒为芜菁花叶病毒。病毒分离的ＡＨ１回接二月兰无病毒苗,引起黄斑,系统花叶,系统坏死和畸形,在供试十字花科植物上均产生系统侵染,并在洋酸桨等茄科供试寄主上引起系统症状     

芜菁花叶病毒研究进展

概述了芜菁花叶病毒的研究进展,主要包括其地理分布与危害、寄主与传播途径、基因组结构及其功能、基因组的变异、检测、鉴定及抗性基因等内容,以期减少芜菁花叶病毒的危害。     

引起二月兰花叶病的芜菁花叶病毒研究

在表现花叶、植株矮化、茎叶坏死和畸形的十字花科观赏植物二月兰（Ｏｒｙｃｈｏｐｈｒａｇｍｕｓｖｉｏ－ｌａｃｅｕｓ）上分离到一种线状病毒,其病毒粒子分布范围为７８０～８００ｎｍ．通过寄主反应测定、病毒提纯和形态观察、血清学反应测定,确定该病毒为芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）．病毒分离物ＡＨ１回接二月兰无病毒苗,引起黄斑、系统花叶、系统坏死和畸形,在供试十字花科植物上均产生系统侵染,并在洋酸桨等茄科供试寄主上引起系统症状．ＡＨ１与来自十字花科甘蓝型油菜上的一个ＴｕＭＶ有紧密的血清学关系,但在寄主反应上与之有一定差异．对自然发病的二月兰植株和接种ＡＨ１分离物的系统寄主用ＴｕＭＶ抗血清进行免疫电镜观察,均检测到线状病毒粒子,用ＣＭＶ抗血清、ＴＭＶ抗血清进行检测,均没有发现相关病毒．作者认为：ＴｕＭＶ即是引起二月兰花叶病的病原．这是ＴｕＭＶ侵染该属植物的首次报道．     

芥菜品种资源对芜菁花叶病毒的抗病性鉴定研究

对367份榨菜和雪菜等芥菜类种质资源进行田间自然发病鉴定，筛选出对病毒病表现为免疫的材料20份。表现为高抗的材料30份，表现为抗病的材料29份。对96份自交3代以上材料苗期进行芜菁花叶病毒人工接种鉴定，筛选出11份抗病毒病材料，其中品种编号为06191和06222的2份榨菜对病毒病表现高抗，病情指数分别为3．13和3．57。06222田间鉴定和苗期接种鉴定均表现为高抗。芥菜病毒病抗源材料的筛选为抗病育种工作奠定了基础。     

AFLP Marker Linked to Turnip Mosaic Virus Susceptible Gene in Chinese Cabbage (Brassica rapa L.ssp.pekinensis)

Turnip mosaic virus (TuMV) which has several strains causes the most important virusdisease in Chinese cabbage in terms of crop damage. In China, Chinese cabbage is infectedby a mixture of strains, breeding of cultivar for the TuMV resistance has become themajor aim. Screening the molecular marker linked to the TuMV-resistance gene formolecular assisted selection is the major method to improve the breeding efficiency. Inthis study, we used AFLP technique and the method of bulked segregant analysis(BSA) tostudy the progeny of Brp0058 x Brp0108, and identified two DNA molecular marker linked toTurnip mosaic virus-resistance gene with a recombination frequency 7.5 cM and 8.4 cM.     

芜菁花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析

 从山东省3地市感病的白菜和萝卜上分离到芜菁花叶病毒6个分离物，将其分别命名为TuMV-SD1、TuMV-SD2、TuMV-SD3 、TuMV-SD4、 TuMV-SD5和TuMV-SD6。利用RT-PCR克隆了这6个分离物的外壳蛋白基因，测定了它们的核苷酸序列，并进行了序列分析。结果表明，6个分离物的CP基因均为867个碱基，核苷酸序列同源性较高, 达97.0%～99.4%；它们与World-B组分离物的同源性最高，达91.8%～100%；与Brassica- Raphanus (BR) 致病型分离物的同源性次之，在89.1%～91.0%之间；与basal-B组分离物的同源性最低，仅86.0%～90.3%。基于TuMV的CP基因核苷酸序列的分子进化树显示，TuMV分离物可分为4组，本研究所分离到的6个TuMV山东分离物属于第四组，即world-B组。用分离到的6个TuMV分离物对已获得的转TuMV CP基因的抗病毒大白菜进行攻毒试验。结果表明，尽管作为转基因的CP基因与这6个分离物的CP基因只有88.2%～88.9%的同源性，但转基因大白菜对这6个分离物均具有明显抗性。     

转基因植株抗芜菁花叶病毒的鉴定

为鉴定转基因大白菜T1代对芜菁花叶病毒是否具有抗病性,采用摩擦接种法,将毒源接种到转基因T1代各植株和对照品种上,经培养、观察并鉴定其病情指数.结果表明:转基因T1代植株各品种的发病率及病情指数明显低于对照品种,且都具有明显的抗病性;经过统计分析表明,转基因T1代各品种的抗病性随着时间的增加,其抗病性有所减弱.     

魔芋芋花叶病毒的检测

为评价魔芋(Amorphophallus konjac)体内芋花叶病毒检测方法,利用人工接种芋花叶病毒的魔芋作为试验材料,分别采用DAS-ELISA、RT-PCR、荧光定量PCR等3种方法进行检测。结果表明,对于人工接种芋花叶病毒1周,植株出现有明显病征的魔芋,荧光定量PCR检测的灵敏度最高、RT-PCR次之,而DAS-ELISA酶联检测法灵敏度较低。     

Study on Screening of Virus Inhibitor Combinations against Viral Diseases in Chinese Cabbage

选用毒氟磷、香菇多糖等几种病毒抑制剂或钝化剂,设计了15个单独或组合处理,探讨田间防治大白菜病毒病的防治效果。结果表明,毒氟磷、香菇多糖2种单剂单独使用的防治效果较好,防效分别为70.01%、66.02%。该2种药剂组合为毒氟磷＋香菇多糖或者分别与维佳希复配为毒氟磷＋维佳希、香菇多糖＋维佳希均可产生一定的增效作用,其防治效果分别达83.70%、78.07%、82.32%。     

不结球白菜谷胱甘肽还原酶基因NhccGR1的克隆与表达分析

利用cDNA-AFLP技术,从芜菁花叶病毒(TuMV)侵染的不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino)幼叶中分离到1条编码谷胱甘肽还原酶的基因片段,通过电子克隆得到其cDNA全长为1 503 bp,编码501个氨基酸,命名为Nhc-cGR1。对该基因进行生物信息学分析,并利用实时定量PCR研究其在TuMV侵染和水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)、乙烯(ET)诱导下的表达情况。结果表明:该基因作为病原相关基因参与了TuMV病害响应,并通过增加自身表达量来激活细胞内的信号转导途径,诱导各种防卫反应相关基因的表达;同时,SA和JA抑制该基因的表达,外施ET能诱导其正向表达。     

甘蓝×白菜种间花粉-柱头相互作用的研究

以甘蓝为母本与白菜杂交,授粉后采不同时期的子房用苯胺兰法染色,在荧光显微镜下观察花粉在柱头上粘合、萌发及花粉管在柱头表面和花柱中的生长情况。试验结果表明:甘蓝×白菜杂交的主要障碍在于白菜萌发的花粉管难以伸进柱头,并与柱头表面发生严重的胼胝质反应,使花粉管扭曲,尖端膨大,难以生长。     

大豆花叶病毒病抗性基因的分子标记研究进展

大豆花叶病毒病是为害大豆生产的世界性病害,严重影响大豆产量和品质。对大豆花叶病毒病的研究进展从抗性遗传、抗性基因的分子标记及定位、抗病品种的分子标记辅助选择育种3个方面进行了阐述。