银狐垂体细胞系构建研究

分别采用组织块法和消化法2种接种方法进行银狐垂体细胞系构建研究。在消化法中使用不同浓度的胰蛋白酶来检验效果,同时在原代培养期使用反复差速贴壁法纯化,传代培养期结合使用反复差速贴壁以及两步消化法进行处理。结果表明:组织块法接种后成纤维细胞生长明显,原代培养后期成纤维细胞已为主要细胞;降低胰蛋白酶浓度能降低对细胞损伤,但消化时间会增长;采用消化法接种在抑制成纤维细胞生长方面效果好于组织块法。纯化效果上,结合反复差速贴壁法与两步消化法处理后获得了较好的效果,在原代培养时期能较好去除成纤维细胞并通过持续使用该方法可在传二代后获得较高纯度的细胞,纯度能达到80%以上,能够建立细胞系。     

银狐、兰狐精液的研究

1 前言狐狸人工授精技术于1979年首先在挪威的商业饲养场中推广应用(Fougner & Forsberg 1987),到1987年,即不到十年的时间里,在北欧就有32万只狐狸人工授精(Jalkanen & Jou(?) Senlaht 1988),其推广应用速度和规模相当可     

银狐睾丸组织细胞学研究

根据公狐生殖生理特点，对其睾丸组织细胞学进行研究，一方面了解公狐的繁殖生物学，细胞生物学和发育生物学特点，另一方面为生产应用和推广狐狸人工授精技术提供理论依据。研究表明，狠狐睾丸组织发育也是季节性变化，而且其重量的增加与精细管上皮的发育和精子细胞的增多有直接关系。     

银狐早期胚胎发育的超微结构研究

在银狐繁殖期,母狐自然交配后不同时间将其处死,从其输卵管或子宫角内冲取胚胎,通过透射电镜观察,对胚胎发育过程中的细胞器变化、细胞核变化等超微结构进行了较为系统的研究,以期为狐胚胎工程提供依据。     

银狐精子冷冻前后超微结构的研究

采用按摩法采集银狐精液，将鲜精和冷冻解冻精液离心、固定，制备电镜样品，通过电镜观察，研究精子冷冻前后超微结构变化，并进一步研究受精机理和精子冷冻的基础理论，以推动狐狸人工授精技术的发展。     

猪铜蓝蛋白的分离纯化及对垂体细胞分泌生长激素的影响

采用硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-sepharose离子交换,羟基磷灰石吸附层析,Superdex-200凝胶过滤纯化,从猪血清中分离纯化出电泳纯的一种蛋白质.进一步研究,其相对分子质量为123 500,等电点为5.08,分子含铜原子数为6个,含糖量为7.8%,亚基数为1,经分析为猪血清铜蓝蛋白.用含不同质量浓度铜蓝蛋白(0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2 g/L)的无血清培养液培养已培养48 h的新生仔猪脑垂体细胞12 h,于2、4、8、12 h分别收集培养液,用放免法测定培养液中GH浓度,结果表明铜蓝蛋白质量浓度为0.2、0.4、0.8、1.2 g/L组垂体细胞生长激素的分泌显著高于0 g/L组,其中以0.4 g/L组、换液培养8 h,垂体细胞生长激素分泌最为明显.     

银狐卵母细胞发育和老化过程的细胞学研究

在繁殖季节，取健康母狐卵巢，抽取卵母细胞，并从初配后27h、50h屠宰的母狐输卵管内冲取卵母细胞；初配后15d从子宫角回收的已分裂的母细胞，分别通过光镜和电镜观察，研究卵母细胞成熟变化和老化过程，从而可以确定15d从子宫角回收的已分裂的卵母细胞，分别通过光镜和电镜观察，研究卵母细胞成熟变化和老化过程，从而可以确定卵母细胞质和核的成熟时间、进程和发育特征，及卵母细胞老化的时间和机理。     

水貂,银狐输卵管和子宫液元素成分研究

本文应用Ｘ射线能谱技术对水貂，银狐输卵管和子宫液内的元素成分进行了研究，结果表明在动情期水貂输卵管液中具有高含量的钾，氯和磷，而子宫液中以钾，氯和硫含量为高；在动情期银狐输卵管液中钾，磷，氯和硫的含量较高；而在子宫液中以氯和钾含量较高。     

银狐、蓝狐及貉松果体的形态及组织结构初步研究

银狐、蓝狐及貉松果体的形态位置相近。３ 种动物松果体的不同之处是：蓝狐松果体体积最大,细胞密度最小,毛细血管最丰富,银狐松果体毛细血管比貉多一些,细胞密度稍小,银狐松果体细胞核直径平均为５－２ μｍ ,蓝狐平均为４－６ μｍ ,貉平均为４－３ μｍ 。     

樗蚕蛹(Philosamia cynthia)精巢细胞系的建立

樗蚕蛹精巢细胞传代培养已到８９代。细胞系形态基本为圆形,少数为梭形。细胞呈悬浮生长,也有少数半贴壁现象。细胞群体倍增时间约７２ｈ左右。细胞系生长的适宜培养基为ＭＧＭ ４４３;温度２６～２７℃ｐＨ６４。染色体具有典型鳞翅目昆虫的染色体特征。细胞系的酯酶同功酶、葡萄糖 ６ 磷酸脱氢酶活性较好。     

银黑狐优化结构模型的建立与经济效益的分析研究

毛皮动物是一个动态群体，依年龄、性别的差异，运用莱斯里、投入产出模型等，对其动态结构进行分析优化，提高了饲养场的经济效益。本文以银黑狐为例建立优化结构模型．     

蓝狐与银狐褪黑激素受体1A基因的克隆及序列分析

根据其它物种褪黑激素受体（melatonin receptor, MTNR）1A基因核酸序列的同源性设计引物,PCR扩增蓝狐和银狐MTNR1A基因的546 bp DNA序列,GenBank登录号分别为EU170442和EU170443。蓝狐和银狐MTNR1A基因DNA序列同源性为99.1%,编码的氨基酸同源性为99.4%,与人、鼠及绵羊MTNR1A基因同源性为84%~86%,与鸡MTNR1A基因同源性为74%。     

猪胚胎干细胞建系研究进展

胚胎干细胞(ESCs)是遗传工程、发育生物学和疾病模型研究与应用的重要材料。猪ESCs建系研究虽已历经十多年,且已有建立猪类ES细胞系的报道,但由于其培养和鉴定方法基本都是借鉴小鼠和人的ESCs建系,从而使其培养体系存在着极大的不可靠性,至今未有种系嵌合的猪ESCs建系成功的报道。论文对猪ESCs建系的影响因素和存在的问题、传统的培养和鉴定方法在猪ESCs建系中的应用、ESCs多能性分子以及ESCs研究中出现的新理论进行了综述。     

日粮脂肪酸组成对生长期银狐生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响

本试验旨在研究日粮脂肪酸组成对生长期银狐生长性能、营养物质消化率及氮代谢的影响.选取12周龄左右、体重相近的健康雄性银狐20只,随机分成2组,每组10个重复,每个重复1只,分别饲喂在基础日粮中添加10%豆油(豆油组)和10%混合油脂(鸡油:豆油=1:1)(混合油脂组)的试验日粮.试验期151 d,分为育成期(90～145日龄)和冬毛期(146～240日龄)2个阶段.结果表明,日粮脂肪酸组成对育成期和冬毛期银狐的干物质采食量和料重比均无显著影响(P>0.05),但对育成期银狐日增重有显著影响(P<0.05),表现为豆油组显著高于混合油脂组(P<0.05);日粮脂肪酸组成对育成期和冬毛期银狐的蛋白质表观消化率和碳水化合物表观消化率均无显著影响(P>0.05),但对育成期银狐脂肪表观消化率有显著影响(P<0.05),表现为豆油组显著高于混合油脂组(P<0.05);日粮脂肪酸组成对育成期银狐的氮代谢无显著影响(P>0.05),但对冬毛期银狐的蛋白质生物学效价和氮沉积有显著影响(P<0.05),表现为混合油脂组分别显著和极显著高于豆油组(P<0.05;P<0.01).综合本试验测定指标,建议育成期银狐以豆油作为日粮脂肪主要来源生产性能较好,而冬毛期以混合油脂(鸡油:豆油=1:1)作为日粮脂肪主要来源效果最佳.     

抗旋毛虫单克隆抗体细胞林的建立及其特性鉴定

为筛选旋毛虫保护性抗原,建立了4株分泌抗旋毛虫McAb的细胞株。经连续培养30余代,仍稳定地分泌抗体。其中,2G3和2C10的靶抗原为旋毛虫幼虫表膜。免疫球蛋白 型及亚 鉴定表明,2G3和2C10为IgG_1,1D5为IgG_3,1C9为IgM。除2C10和IC9对伊氏锥虫可溶性抗原呈现阳性反应外,未见对猪圆线虫、猪囊尾蚴、伊氏锥虫表膜抗原和正常猪肉反应。经ELISA测定,2G3、2C10、1D5、1C9均可与施毛虫幼虫可溶性抗原作用,其腹水效价分别为1:50000、1:10000、1:1000、1:800。各McAb均与旋毛虫幼虫排泄分泌物抗原(ES抗原)作用,经ELISA测定表明,2G3腹水效价达1:320000。     

Characterization of Murine Pituitary-Derived Cell Lines Tpit/F1, Tpit/E and TtT/GF

The pituitary is an important endocrine tissue of the vertebrate that produces and secretes many hormones. Accumulating data suggest that several types of cells compose the pituitary, and there is growing interest in elucidating the origin of these cell types and their roles in pituitary organogenesis. Therein, the histogenous cell line is an extremely valuable experimental tool for investigating the function of derived tissue. In this study, we compared gene expression profiles by microarray analysis and real-time PCR for murine pituitary tumor-derived non-hormone-producing cell lines TtT/GF, Tpit/F1 and Tpit/E. Several genes are characteristically expressed in each cell line: Abcg2, Nestin, Prrx1, Prrx2, CD34, Eng, Cspg4 (Ng2), S100β and nNos in TtT/GF; Cxcl12, Raldh1, Msx1 and Twist1 in Tpit/F1; and Cxadr, Sox9, Cdh1, EpCAM and Krt8 in Tpit/E. Ultimately, we came to the following conclusions: TtT/GF cells show the most differentiated state, and may have some properties of the pituitary vascular endothelial cell and/or pericyte. Tpit/F1 cells show the epithelial and mesenchymal phenotypes with stemness still in a transiting state. Tpit/E cells have a phenotype of epithelial cells and are the most immature cells in the progression of differentiation or in the initial endothelial-mesenchymal transition (EMT). Thus, these three cell lines must be useful model cell lines for investigating pituitary stem/progenitor cells as well as organogenesis.     

阳离子脂质体转染家蚕培养细胞的技术体系研究

阳离子脂质体转染家蚕培养细胞是家蚕基因功能研究的重要技术之一。利用阳离子脂质体Lipofectamine2000与pBac[A3Neo+A3EGFP]转基因表达载体,对家蚕卵巢细胞BmN-SWU1、BmN-SWU2、BmN和草地贪夜蛾卵巢细胞Sf21进行了外源DNA质量、脂质体用量、转染细胞密度和转染孵育时间等4个转染条件的优化实验,筛选到了阳离子脂质体转染效率最高的细胞系BmN-SWU1。BmN-SWU1细胞的最佳转染条件为:外源DNA0.6μg,脂质体2.5μL,细胞密度1×105mL-1,无血清条件下孵育24 h。此条件下转染效率可达55.08%。用抗生素G418筛选转染后的BmN-SWU1细胞,建立了GFP转基因细胞系。