显微分割扩张孵化胚泡获同卵双生山羊羔

通过分割孵化囊胚之前不同发育阶段的胚胎,国外已分别在牛、绵羊、山羊、马、猪等家畜上取得同卵双生试验的成功。但国内至今尚无通过显微分割获得家畜同卵双生后代的实例。作者等于1986年10月至1987年5月进行了山羊胚胎分割和半胚移植试验,1987年4月18日和5月25日,两只受体孕羊各产1对同卵双生山羊羔,在国内首次获得家畜同卵双生后代。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分害虫所用溶液，冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响，结果表明：①将解冻囊胚分割后，无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响（P＞0.05）；②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异（P＞0.05）；③与分割解冻桑椹胚相比，在蔗糖液中分割解闲囊胚可显著提高冻胚分割效果（P＜0.05）。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体，结果有2只妊娠，共获得半胚仔鼠6只，其中2对为同卵双生。     

哺乳动物胚胎分割发展现状及展望

本文系统综述了国内外哺乳动物胚胎分割的当前水平和今后发展趋势。对影响分割胚存活率的若干因素、分割胚的冷冻、人工嵌合体的制作、胚胎性别鉴定及卵核移植等方面的研究进展也作了简要介绍。     

现场分割奶牛胚胎产生同胚双犊的研究

采用简易徒手胚胎分割法,一分为二分割奶牛胚胎。应用非手术方法,每头受体移植成对二分胚。移植4头受体,2头妊娠,其中1头产公犊1头,1头产母犊2头。该母犊为同胚双犊,健康,发育正常。     

牛胚胎分割及半胚移植研究

对来自黑白花及西门塔尔超排母牛的７～８日龄胚胎，采用手持微玻璃针，在普通解剖镜下进行分割。通过非手术法将裸半胚移入发情后７天的受体牛黄体侧子宫角。在太原市郊奶牛场及太行山区农民户养牛中，共移植受体牛４５头，结果妊娠产犊２５头，移植成功率为５５．６％。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分割所用溶液、冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响。结果证明:①将解冻囊胚分割后,无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响(P>0.05);②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异(P>0.05);③与分割解冻桑椹胚相比,在蔗糖液中分割解冻囊胚可显著提高冻胚分割效果(P<0.05)。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体,结果有2只妊娠,共获得半胚仔鼠6只,其中2对为同卵双生。     

用酶分离小鼠早期胚胎的研究

用酶分离小白鼠２－－细胞、４－－细胞和８－－细胞胚胎,获取单个卵裂球,将其培养在含有牛血清蛋白质的ＣＺＢ培养基微滴内。培养的小白鼠胚胎发育情况有３种：（１）正常发育;（２）泡囊化;（３）不发育。在体外培养条件下２－－细胞单个卵裂球有８６．５％发育成２－－细胞;有３５．１％发育成４－－细胞,有８．１％发育到８－－细胞,有５．４％发育到桑椹胚;４－－细胞胚的单个卵裂球中有８３．３％发育到２－－细胞,３７．５％发育到４－－细胞,１２．５％发育到８－－细胞,８．３％发育到桑椹胚;在８－－细胞胚的单个卵裂球中有４６．７％发育到２－－细胞,２６．７％发育到４－－细胞,１３．３％发育到８－－细胞、６．７％发育到桑椹胚。实验结果表明用酶分离小白鼠早期胚胎,所获卵裂球具有一定的继续发育能力,而且没有透明带也能发育。     

小鼠胚胎冷冻保存试验

应用4～10周令的杂种 CB6/Han 和纯种 C57BL/Han 小鼠73只进行试验,共采胚胎523枚,将发育正常,形态完好的157枚胚胎低温冷冻保存。解冻后回收率为83.4％,其中45％(59枚)形态完好,(囊胚56％,桑椹胚20％)。将其培养24—48小时后,71.2％(42枚)继续发育到扩张囊胚(其中囊胚为76.5％,桑椹胚为37.5％)。应用3′6′—二乙酰基荧光素(FDA)染色进行胚胎质量评定,对胚胎无损害。     

小鼠早期胚胎体外培养的实验研究

本试验采用国产化学试药和哈尔滨地区的天然水,制备了 Brinster 化学合成培养液。把160枚通过超数排卵获得的2-细胞期小鼠胚胎放在添加适量牛血清白蛋白或胎牛血清的 Brinster 化学合成培养液内,并在适当湿度、5%CO_2和95%空气的气相环境、37℃温度条件下培养。58小时后,大约67%4小鼠2-细胞期胚胎发育到桑椹胚阶段;大约32%的小鼠桑椹胚发育到囊胚期阶段。试验证明,用国产化学药品和哈尔滨地区水配制的培养液可以对早期小鼠胚胎进行体外培养研究。     

超速冷冻8-细胞鼠胚

用3.5M和2.5M DMSO作冷冻保护剂进行超速冷冻8-细胞鼠胚。用前者作保护剂的鼠胚,无论在体外培养和体內发育的情况都好于后者。前者中的8-细胞鼠胚解冻后的存活率为78.9％;存活胚胎体外发育到囊胚的比率为83.4％,体內附植率为63.9％,胎儿形成率为43.2％。实验证明,超速冷冻保存胚胎是一种省时、省力、省钱的好方法。     

小鼠电融合胚胎发育影响因素的研究

电融合技术，是获得四倍体胚胎的主要手段．本试验研究了各种不同因素，对小鼠电融合胚发育的影响．结果表明，电刺激前后，使用不同的操作液对融合胚发育有影响．电刺激前使用Ｍ２液、电刺激后在Ｗｈｉｔｔｅｎ氏液中融合，然后转入ＣＺＢ液中培养，这一操作体系（Ｍ／Ｗ—ＣＺＢ）效果最好，融合胚的囊胚发育率为８０．５％，显著高于Ｍ／Ｗ—Ｗ，Ｗ／Ｗ—Ｗ，Ｗ／Ｗ—ＣＺＢ组，后者的囊胚发育率分别为０，０，５４．５％（Ｐ＜０．０５）．试验还发现，刺激强度为１．０ｋｖ／ｃｍ，８０μｓ；１．０ｋｖ／ｃｍ．４０μｓ和０．８ｋｙ／ｃｍ，８０μｓ时，融合囊胚的发育率分别为７９．０，８１．９和７１．１％．ＨＣＧ注射后４７ｈ、４８ｈ的２—细胞胚胎的融合胚发育率，显著高于（Ｐ＜０．０１）ＨＣＧ注射后４２ｈ、４４ｈ和４６ｈ的，囊胚发育率分别为８２．９，８０．６，０，０和２２．８％．     

小鼠2-细胞期胚胎融合及其发育能力的研究

小鼠带有完整透明带2-细胞期胚的2个卵裂球,用电融合和灭活的仙苔病毒融合法进行融合。实验结果表明:在电场强度为1kV/cm,脉冲持续时间为40μs(重复2次),电融合媒介液为PBS(磷酸盐缓冲液)和Whitten's Solution的条件下胚胎融合效果最好。融合后胚胎发育能力观察结果:46.9％融合胚在体内可发育到囊胚期,融合胚做染色体分析,数目为四倍体。     

昆明小鼠单细胞胚胎体外培养的研究

本试验研究了葡萄糖、EDTA和小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育的影响.结果发现:不含葡萄糖HECM-1组桑椹率为40.05％,对照组为8.14％;含EDTA的CZB组桑椹率为61.18％,对照组为47.44％;小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育无促进作用。可见,葡萄糖抑制昆明小鼠单细胞胚胎体外发育;在不含葡萄糖的条件下,EDTA支持小鼠早期胚胎体外发育;无论有无葡萄糖小鼠血清对小鼠早期胚体外发育无促进作用。     

小鼠卵母细胞和胚胎不同贮存液6℃贮存的研究

<正> 超排技术的应用,可以得到几倍于正常排卵的卵母细胞或胚胎,为体外卵母细胞或胚胎的操作提供了丰富的材料。淘汰母畜或屠宰母畜的卵巢更是卵母细胞的一个重要来源。然而,如果供大于求,则需要一种较为满意的贮存过剩卵母细胞或胚胎的方法。超低温(-196℃)冷冻固然是一种长期贮存