高产β-胡萝卜素杜氏藻突变株的鉴定与分析

采用紫外辐射诱导巴氏杜氏藻Dunaliella bardawil突变,经初筛和复筛,初步获得一株巴氏杜氏藻的突变株,对两者从细胞形态特征、β-胡萝卜素含量、蛋白质SDS-PAGE电泳以及总DNA的RAPD扩增等方面进行了比较分析。结果表明,在相同培养条件下,两者均为卵圆形,但原种直径仅为突变后藻株直径的60％,颜色差异明显;突变株的β-胡萝b素含量为原种的6．2～15．5倍;两者遗传相似系数为0．868,与突变株的一般要求相符。鉴于此,确认其为高产β-胡萝卜素的新突变株,命名为Dunaliella bardawil variant 4-5Sun ＆ Liu。     

不同提取方法对盐藻β-胡萝卜素产量的影响

[目的]研究不同提取方法对盐藻β-胡萝卜素产量的影响,以改进盐藻β-胡萝卜素的提取工艺。[方法]首先比较了丙酮∶甲醇(7∶2)和石油醚2种常用提取试剂对盐藻β-胡萝卜素提取效率的影响;然后以丙酮-甲醇(7∶2)为提取试剂,分别从提取时间、提取温度、固液比3个方面对其提取工艺进行了优化。[结果]相对于石油醚,丙酮∶甲醇(7∶2)对盐藻β-胡萝卜素的提取效率较高。4℃和25℃浸提温度下β-胡萝卜素的得率没有明显差异。分3次提取时,5 m in的浸提时间即可获得较高的提取效率。在1~7 m l的提取剂使用范围内,随着提取剂用量的增加β-胡萝卜素的提取效率有所增加,但增加幅度不是很大。[结论]以丙酮∶甲醇(7∶2)为提取试剂,在25℃下浸提5 m in 3次可以得到较高的提取效率。     

杜氏藻的生物学和生态学研究进展

杜氏藻Dunalidlla属已有记录的种类近30种,其中盐生杜氏藻含有极丰富的β-胡萝卜素,是很有开发意义的植物性维生素A源。综述了杜氏藻属的分类、生化组成、生理、生态和培养条件等方面的研究进展,同时简述了胡萝卜素的生物生产方法。     

碘盐对杜氏盐藻生长和品质的影响

[目的]研究碘对杜氏盐藻生长及品质的影响。[方法]用不同浓度的KI、KIO3处理杜氏盐藻,检测叶绿素a、可溶性蛋白、β-胡萝卜素、内源碘含量以及藻干重的变化。[结果]0.5～5.0 g/L的KI均抑制杜氏盐藻的生长,0.5～5.0 g/L的KIO3不同程度地提高了杜氏盐藻中叶绿素a及可溶性蛋白的含量,增加了藻的干重。其中0.5 g/L的KIO3效果最明显,使叶绿素a和藻干重分别提高65%和42%。另外,KIO3处理也使藻细胞中β-胡萝卜素和碘的含量增高,0.5 g/L KIO3使β-胡萝卜素和碘的含量分别提高48%和430%。[结论]KI抑制杜氏盐藻的生长,KIO3不但能刺激杜氏盐藻的生长还能提高其内活性物质的含量。     

农村生活污水培养杜氏盐藻的初步研究

通过以含有不同浓度（0、20%、40%、60%、80%、100%）的农村生活污水的培养基培养杜氏盐藻,研究了不同浓度的农村生活污水对杜氏盐藻生长、β-胡萝卜素含量、叶绿素a含量、蛋白质含量及可溶性糖含量的影响。结果表明：盐藻在各种处理培养基中都能生存,当培养到第21天时,不含污水样品的β-胡萝卜素含量和叶绿素a含量最高,含100%污水样品的β-胡萝卜素含量和叶绿素a含量最低,含60%的污水样品的蛋白质含量最高,含100%的污水的样品可溶性糖含量最高。可见,用适当浓度的农村生活污水可以培养杜氏盐藻。     

胡萝卜中β-胡萝卜素测定的方法

采用１：４丙酮－石油醚混合液或１：９乙醇－石油醚混合液研磨提取胡萝卜中β－胡萝卜素,经ＤＵ－７紫外分光光度计测试,最大吸收波长４４８ｎｍ,线性范围０￣１０ｕｇ／ｍｌ,通过稳定性,准确性,回收率等项验证,测试数据准确,方法可行。研究还证明,浸泡提取与研磨提取,干样与鲜样对测试胡萝卜中β－胡萝卜素含量影响不显著。     

6种不同激素对杜氏盐藻生长的影响

研究了6种激素对杜氏盐藻生长的影响,结果表明:IBA、2,4-D、NAA、IAA、6-BA、GA分别在0.5、1.0、5.0、0.5、1.0、0.5μg/ml浓度能明显促进杜氏盐藻的生长。挑选影响效果较明显的4种激素IBA、2,4-D、6-BA、GA做正交试验,结果表明:以盐藻的β-胡萝卜素含量为指标,最优组合为2,4-D0.5μg/ml,IBA1.0μg/ml,6-BA1.0μg/ml和GA0.1μg/ml;以盐藻的生物量大小为指标,最优组合为2,4-D0.5μg/ml,IBA1.0μg/ml,GA0.05μg/ml和6-BA2.0μg/ml。     

巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的克隆和分析

[目的]获得巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[方法]以巴夫杜氏藻cDNA为模板,采用简并引物进行PCR扩增,获得533bp特异cDNA片段。在此基础上,设计特异引物,采用5’-Genome Walking和3’-RACE的方法,获得基因的5’-端DNA序列和3’-端cDNA序列,进而获得β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[结果]获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的特异cDNA片段、5’-端DNA和3’-端cDNA片段。经拼接后,扩增出全长cDNA。β-肌动蛋白基因cDNA全长1754bp,包括1137bp的开放读码框和617bp的3’-非翻译区序列。氨基酸序列相似性分析发现,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白氨基酸序列与杜氏盐藻、莱茵衣藻等的同源性较高。系统发育分析表明,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白与杜氏盐藻的相似性最高。[结论]首次获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列,并发现巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因非常保守。     

巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的克隆和分析

[目的]获得巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[方法]以巴夫杜氏藻cDNA为模板,采用简并引物进行PCR扩增,获得533 bp特异cDNA片段。在此基础上,设计特异引物,采用5′-GenomeWalking和3′-RACE的方法,获得基因的5′-端DNA序列和3′-端cDNA序列,进而获得β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[结果]获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的特异cDNA片段、5′-端DNA和3′-端cDNA片段。经拼接后,扩增出全长cDNA。β-肌动蛋白基因cDNA全长1 754 bp,包括1 137 bp的开放读码框和617 bp的3′-非翻译区序列。氨基酸序列相似性分析发现,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白氨基酸序列与杜氏盐藻、莱茵衣藻等的同源性较高。系统发育分析表明,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白与杜氏盐藻的相似性最高。[结论]首次获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列并发现巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因非常保守。     

巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的克隆和分析(英文)

[目的]获得巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[方法]以巴夫杜氏藻cDNA为模板,采用简并引物进行PCR扩增,获得533 bp特异cDNA片段。在此基础上,设计特异引物,采用5′-GenomeWalking和3′-RACE的方法,获得基因的5′-端DNA序列和3′-端cDNA序列,进而获得β-肌动蛋白基因cDNA全长序列。[结果]获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因的特异cDNA片段、5′-端DNA和3′-端cDNA片段。经拼接后,扩增出全长cDNA。β-肌动蛋白基因cDNA全长1 754 bp,包括1 137 bp的开放读码框和617 bp的3′-非翻译区序列。氨基酸序列相似性分析发现,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白氨基酸序列与杜氏盐藻、莱茵衣藻等的同源性较高。系统发育分析表明,巴夫杜氏藻β-肌动蛋白与杜氏盐藻的相似性最高。[结论]首次获得了巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因cDNA全长序列并发现巴夫杜氏藻β-肌动蛋白基因非常保守。     

鱼汤提取物对杜氏盐藻植板率的影响

比较了不同浓度鱼汤提取物对杜氏盐藻(Dunaliella salina)在平板上生长的影响,发现在加入了一定浓度鱼汤提取物后,盐藻藻落较对照明显增大,颜色加深,呈深绿色,并且获得较为分散的单克隆.随着鱼汤提取物浓度的增加,盐藻在平板上的植板率也有明显提高,在浓度为8%的平板上盐藻的植板率高达42%,是对照平板的6.4倍.     

黄体素和β-胡萝卜素在肉鸡消化道吸收和代谢过程中的相互影响

利用瘘管技术研究黄体素 (lutein)和 β 胡萝卜素 (βc)在肉鸡消化道吸收、代谢过程中的相互影响。实验分为两大组 :Ⅰ组为研究 βc对肉鸡肠道吸收、代谢lutein的影响 ,lutein与 βc的质量比分别为 4 0 0∶0 (对照组 )、4 0 0∶2 0 0、4 0 0∶4 0 0 ;Ⅱ组为研究lutein对肉鸡肠道吸收、代谢 βc的影响 ,lutein与 βc的质量比分别为 0∶4 0 0 (对照组 )、 2 0 0∶4 0 0、 4 0 0∶4 0 0。结果发现在肠道吸收过程中lutein和 βc没有相互影响 ;lutein在黏膜细胞中的滞留量随灌注液中 βc含量的增加而提高 ,并在 βc添加量为 4 0 0 μg时达到显著水平 (P <0 0 5 ) ;添加lutein后 ,黏膜细胞中 βc的含量极显著提高 (P <0 0 1) ,维生素A的水平极显著下降 (P <0 0 1) ;βc的添加使血浆中lutein的水平极显著降低 (P <0 0 1) ;同样血浆中 βc和维生素A的含量因lutein的添加而极显著下降 (P <0 0 1)。     

β—胡萝卜素在牛血清和小肠吸收细胞脂蛋白中的分布比较

论文报道了经口腔灌注β－胡萝卜素溶液后其在牛血清和小肠吸收细胞脂蛋白中的分布。试验结果表明：β－胡萝卜素在血清中的运输主要由ＨＤＬ完成,吸收细胞中的可溶性β－胡萝卜素均与脂蛋白结合,绝大多数结合于乳糜微粒。鉴于β－胡萝卜素的脂溶性特征,其吸收是与脂肪紧密结合的,推断是１种被动吸收机制。在吸收细胞和血清中除脂蛋白以外未发现其它β－胡萝卜素转运蛋白。     

β—胡萝卜素和维生素A对母猪繁殖性能的影响

本综述了β－胡萝卜素和维生素Ａ对母猪繁殖性能的影响。有关研究结果表明,对断奶母猪注射或在日粮中添加β－胡萝卜素和（或）维生素Ａ能必低胚胎死亡率,显提高窝产仔数,降低仔猪死亡率,提高窝重,从而增强母猪的繁殖性能。本也探讨了β－胡萝卜素和维生素Ａ对母猪繁殖性能之影响的作用机理。     

培养条件对铜藻幼苗生长发育的影响

通过室内培养,研究了温度、光强、光照周期、盐度和密度对日龄为60 d的铜藻[Sargassum horneri(Turner)C.Agardh]幼苗生长发育的影响,旨在了解铜藻幼苗的适宜培育条件。结果显示:铜藻幼苗在15~30℃范围内,均能存活,适宜温度为20~25℃;在500~7 500 LX下均能生长,生长的适宜光强为2 500~4 500 LX;长光照条件(18L∶6D)更有利于幼苗的生长;幼苗在盐度为10~40下均能存活,适宜盐度为30。另外,幼苗的密度越低,越有利于幼苗的生长和发育,5~25棵/L的密度有益于幼苗的生长和叶片分生。上述研究结果为铜藻幼苗室内渡夏培养提供了基础技术数据。     

微生物发酵生产β-葡萄糖苷酶

分别用土壤分离微生物和现有菌株发酵生产β－葡萄糖苷酶,经酶活力比较,筛选酶活较高的产酶菌株。其产酶条件为：以初始ｐＨ为５．５的麸皮、（ＮＨ４）２ＳＯ４等为发酵培养基,在３０℃条件下,于１４０ｒ／ｍｉｎ摇床转速下培养１２０ｈ,获较高酶产量,酶活达９．１２Ｕ／ｍｌ。     

能源微藻——葡萄藻培养的研究进展

葡萄藻是一种世界广布的高产烃能源微藻。在石油资源日趋紧张以及环境恶化日趋严重的今天,利用该藻生产石油替代品的研究受到广泛的关注。简要概述了葡萄藻人工培养方面的研究进展,讨论了未来葡萄藻产烃工业化发展的方向。