维生素C对建鲤肠上皮细胞氧化损伤保护作用的研究

建鲤肠上皮细胞( IEC)在24孔培养板中原代培养72 h并更换无血清DMEM培养液继续培养12 h后,随机分为7组,每组4个重复.除其中1组作为空白对照外,另外6组均加入100 μmol/L的过氧化氢(H2O2)以建立IEC氧化应激模型.相同条件下继续培养16 h后,将培养液分别更换为含0(空白对照组)、0、4、10、16、22和28 mg/L维生素C的无血清DMEM培养液,相同条件下继续培养72 h后取样测定指标,以考察不同维生素C浓度对H2O2诱导的建鲤IEC氧化损伤的保护作用.结果显示:1)100 μmol/L H2O2处理导致IEC存活数量减少,仅形成一些小细胞集落,并显著降低IEC中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽硫转移酶和谷胱甘肽还原酶活性以及谷胱甘肽和蛋白质含量(P＜0.05),提高IEC中丙二醛及蛋白质羰基含量以及培养液中乳酸脱氢酶活性(P＜0.05),使建鲤IEC产生了氧化应激;2)维生素C显著提高IEC的抗羟自由基能力和抗超氧阴离子自由基能力(P＜0.05),缓解由H2O2导致的建鲤IEC氧化损伤.综上可见,维生素C可提高建鲤IEC抗氧化能力,有效保护IEC免受氧化损伤.     

不同来源和剂量维生素C对建鲤生长性能和消化功能影响的比较研究

本试验旨在研究不同来源和水平维生素C对建鲤生长性能和消化功能的影响.选用平均体重为( 12.63±0.04)g的健康建鲤600尾,随机分为4组(每组设3个重复,每个重复50尾),分别饲喂添加不同来源[乙基纤维素包被维生素C( EC-AA)和维生素C磷酸酯钙盐(LAPP)]和剂量(75和150 mg/kg)的维生素C的实...     

不同维生素E和DHA水平对建鲤免疫力和抗病力的影响

选用体质量为(5.14±0.09)g的建鲤,采用2因子3水平试验设计,在基础饲料中添加3个DHA水平(0%、0.5%和1.5%)和3个维生素E水平(62.5、125、250 mg/kg)配制9种试验饲料,饲养8周后用嗜水气单胞菌进行攻毒试验,探讨DHA和维生素E对高密度养殖建鲤的免疫力及抗病力的影响。结果表明:饲料中添加维生素E和DHA都可显著提高高密度养殖的建鲤血浆SOD、血浆和脾脏LZM及血浆NO(P<0.05),攻毒存活率亦显著提高(P<0.05)。饲料中添加维生素E可显著降低血浆MDA(P<0.05),维生素E和DHA二者交互作用显著提高脾脏LZM和血浆NO(P<0.05)。在本试验条件下,饲料中添加DHA和维生素E可提高建鲤的抗氧化、免疫力和抗病力,适宜在高密度集约化养殖中作为免疫增强剂适量添加。     

高水平维生素E对幼建鲤生长性能和消化吸收功能的影响

本试验旨在研究饲料中高水平维生素E对幼建鲤生长性能和消化吸收功能的影响.选用l 200尾平均体重(9.46±0.03)g的幼建鲤,随机分为8组,每组3个重复,每重复50尾鱼,分别饲喂维生素E水平为7、107、757、1 007、l 257、l 507、l 757和2 007 mg/kg的试验饲料,试验期60 d.结果表...     

家蚕中肠上皮细胞增殖和分化的初步研究

通过分析家蚕自幼虫期到蛹期发育过程中肠上皮细胞的增殖与分化情况,鉴定家蚕中肠干细胞的潜在定位。采用苏木精和伊红(Hematoxylin and Eosin,H&E)染色与4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色追踪变态和发育时期家蚕中肠的形态结构及细胞组成变化,结果显示,幼虫经历蜕皮及变态时,中肠形态结构以及中肠上皮细胞组成均发生明显变化:在幼虫每个龄期的盛食期肠壁较薄,眠前期(蜕皮前)明显变厚,至眠期其厚度达到峰值;中肠上皮层存在柱状细胞(CC)、杯状细胞(GC)和再生细胞(RC)3种细胞,3种类型细胞随龄期逐渐增多,其中各龄期柱状细胞持续增多,至眠期达到峰值,靠近基底膜的小细胞在眠前期增多。利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxyUridine,BrdU)和磷酸化组蛋白(Phospho-histone H3,PHH3)免疫荧光染色检测到中肠上皮细胞,尤其是中肠上皮层靠近基底膜处的小细胞在幼虫各龄眠前期的增殖率最高。同时通过BrdU滞留标记实验在中肠上皮层靠近基底膜处发现了BrdU滞留阳性信号。研究结果发现家蚕幼虫蜕皮时中肠上皮层靠近基底膜处的小细胞发生快速增殖,推测这些小细胞中存在着潜在的家蚕中肠干细胞。     

维生素A对动物肠道及肠上皮细胞生长发育的影响

本文就近年来维生素A与动物肠道和肠上皮细胞生长发育的相关研究作一综述。     

谷氨酰胺促进动物肠上皮细胞生长发育

谷氨酰胺是肠上皮细胞必需的营养物质,对其生长发育有极其重要的作用。本文就谷氨酰胺对肠上皮细胞增殖分化的促进作用及其可能机理作一综述。     

肠上皮细胞增殖分化及体外培养研究进展

小肠上皮细胞的体外培养对于研究肠上皮干细胞的增殖分化机理、肠上皮细胞间信号传导、营养物质的吸收利用及转化、肠道免疫等方面具有重要意义,但肠上皮细胞的分离培养难度较大,能成功建立单克隆肠上皮细胞系的报道较少。结合肠上皮干细胞的增殖分化规律,选择肠上皮细胞分离培养的最佳时期和分离方法,建立稳定传代的小肠上皮细胞系,对于各相关领域的研究均起到了重要作用。     

小肽的营养对幼龄建鲤生长的影响

用810尾平均体重为(4±0.2)g的建鲤鱼苗作为试验材料,在日粮中添加不同水平的小肽进行幼龄建鲤生长性能的对比试验。试验鱼分为6组,每组设3个平行,每个平行45尾,分别饲养于0.2m3的水族箱中,每组3个平行水族箱,共18箱,在0～5组试验中添加小肽的量分别为0%、0.5%、1%、1.5%、2%、3%,0组为对照组,饲养周期为56d。试验结果表明:在建鲤日粮中添加一定量的小肽可提高建鲤生长速度、饲料利用率,改善日粮适口性,其中以添加1%小肽的量为好。     

饲料中添加乳酸杆菌对黄河鲤和建鲤正反交F1生长的影响

试验旨在研究饲料中添加乳酸杆菌对黄河鲤和建鲤正反交F1生长性能的影响。在基础饲料中分别添加乳酸杆菌含量为0(A01、A02对照组)、2×108cfu/kg(A11、A12)、4×108cfu/kg(A21、A22)、6×108cfu/kg(A31、A32)、8×108cfu/kg(A41、A42),采用室内循环水养殖系统,在水温为27.5～28.0℃的条件下,选取平均尾重(8.25±0.15)g黄河鲤和建鲤正反交F1各600尾,随机分为10组,每组设3个重复,每个重复40尾,进行56 d的生长试验。结果表明:各乳酸杆菌组的末重、增重率和特定生长率均显著高于对照组(P<0.05),添加水平在6×108cfu/kg时的终末体重、增重率、特定生长率最大,且反交F1生长较快,饵料系数最低,添加水平再增加,终末体重、增重率、特定生长率降低,饵料系数增加;以终末体重、增重率、特定生长率、饵料系数为指标,采用二次多项式分析表明,黄河鲤、建鲤正反交F1饲料中乳酸杆菌的适宜添加水平为(5.8～6.0)×108cfu/kg。     

甲状腺素对猪小肠上皮细胞miR-let-7a基因表达及细胞增殖的影响

miR-let-7a在动物细胞的分化、增殖与凋亡等方面发挥越来越重要的作用。甲状腺激素(TH)作用非常广泛,机体的每个细胞几乎都是TH作用的靶细胞,其可以促进组织分化、生长和成熟。本实验用甲状腺素(T4)浓度分别为(0、0.02、0.03、0.05、0.075、0.1、0.2μmol/L)在体外培养猪的小肠上皮细胞。结果表明:T4处理组的细胞体积形态相对于空白对照组没有明显变化;当T4添加浓度为0.03μmol/L时,细胞的增殖率显著低于其他组(P0.05);当T4浓度为0~0.03μmol/L时,let-7a的表达随着添加剂量的增加而升高,浓度从0.03~0.2μmol/L变化时,let-7a的表达呈现降低趋势,浓度为0.03μmol/L时表达量极显著高于其他组(P0.01)。let-7a的表达量与细胞增殖呈负相关。     

大豆凝集素对鲤鱼肠道上皮细胞结构和功能的影响

本研究旨在考察大豆凝集素(SBA)对原代培养鲤鱼肠道上皮细胞结构和功能的影响,初步探讨大豆凝集素在鱼类中抗营养的可能作用方式.在24孔培养板中原代培养鲤鱼肠道上皮细胞72 h后,分别更换为含纯化sBA 0、50、75、100、150、200μg/mL的DMEM培养液,继续培养72 h后采样测定指标.结果表明,在SBA的...     

精氨酸对热应激处理的奶牛原代小肠上皮细胞增殖和凋亡的影响

本试验旨在研究精氨酸(L-Arginine,L-Arg)对热应激奶牛原代小肠上皮细胞增殖和凋亡的影响,探究精氨酸对热应激奶牛小肠上皮细胞损伤的修复作用.首先以体外培养的奶牛原代小肠上皮细胞为模型,分为对照组(Con组,37℃)、试验组[42℃培养6h后,更换成无精氨酸培养基(HS组)或者不同浓度(2、4、6、8、10 ...     

过量赖氨酸对断奶仔猪及其肠道上皮细胞的影响

旨在从体内与体外探究过量赖氨酸对断奶仔猪的影响.本试验选用144头杜×长×大三元杂交断奶仔猪,随机分为4组,每组6个重复,每个重复6头仔猪(3头阉公猪和3头母猪),各组在日粮中分别添加1.3％、2.6％、3.9％和5.2％的回肠标准可消化赖氨酸(standardized ileal digestibility lysi...     

大豆苷和染料木苷对山羊乳腺上皮细胞增殖的影响

The experiment was aimed to study the effects of different concentrations of daidzin and genistin on proliferation of goat mammary gland epithelial cells, the test was adopted the method of MTT. The results revealed that the ng level of concentration had more effects on cells than the μg level of concentration. And when cells were treated with the two materials for 48 h, the effects were greater than for 24 and 72 h. The highest poteney was detected in daidzin (10 ng/mL) and genistin (10 and 100 ng/mL) compared with the control group.     

表皮生长因子对成年水牛晶状体上皮细胞促增殖作用

为观察表皮生长因子 ( epidermalgrowth factor,EGF)对成年水牛晶状体上皮细胞增殖作用的影响。将不同浓度 EGF作用于体外培养的成年水牛晶状体上皮细胞 ,采用 MTT法测定细胞的增殖能力。结果 :EGF在浓度为 1ng/ m L和 1 0 ng/ m L作用的前 3 d促增殖作用逐渐加强 ,呈现时间依赖性 ,且在第 3 d达到最大促增殖效果。不同浓度的 EGF对晶状体上皮细胞的增殖作用不同 ,浓度在 1 0 ng/ m L作用 2 4h后即有明显的促增殖作用 ( P <0 .0 5) ,而作用72 h后最低的有效浓度为 1 ng/ m L,而且 2 50ng/ m L EGF有最大促增殖作用。结论 :EGF是诱导成年水牛晶状体上皮细胞增殖的重要因素。     

circRNA-Zfp609对C2C12成肌细胞增殖和分化的影响

【目的】试验旨在探究circRNA-Zfp609调节C2C12成肌细胞增殖和分化的潜在分子机制。【方法】利用RT-PCR和测序分析小鼠骨骼肌组织和C2C12成肌细胞中circRNA-Zfp609的表达,实时荧光定量PCR检测小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、小肠、骨骼肌组织及增殖12、24、36、48 h和分化0、1、3、5 d的C2C12成肌细胞中circRNA-Zfp609的相对表达量;实时荧光定量PCR检测分化0、1、3、5 d的C2C12成肌细胞中肌细胞生成素（MyoG）和肌球蛋白重链（MyHC）的相对表达量。用circRNA-Zfp609的干扰表达载体（siRNA）干扰细胞,通过CCK-8测定siRNA对C2C12成肌细胞增殖率的影响;用实时荧光定量PCR检测siRNA干扰对circRNA-Zfp609、MyoG和MyHC相对表达量的影响。通过TargetScan 7.0和miRDB软件预测circRNA-Zfp609上与肌肉分化相关的miRNA位点,将筛选的miRNAs的过表达载体转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告试验验证circRNA-Zfp609与miRNA的互作关系。根据miRNAs对circRNA-Zfp609的互作,构建circRNA-Zfp609的野生型和突变型载体并转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告试验验证circRNA-Zfp609对miRNA的靶向关系。【结果】PCR和测序结果表明,小鼠骨骼肌中可表达circRNA-Zfp609;circRNA-Zfp609在小鼠骨骼肌中表达水平最高,在其他组织中的表达量由高到低依次是肾脏、肺脏、心脏、肝脏、胃、脾脏和小肠。与12 h相比,在C2C12成肌细胞增殖的36和48 h circRNA-Zfp609的相对表达量显著增加（P<0.05）;与分化第0天相比,在C2C12成肌细胞分化的第1、3和5天circRNA-Zfp609的相对表达量均显著增加（P<0.05）,MyoG、MyHC的相对表达量均极显著增加（P<0.01）。与NC组相比,siRNA组C2C12成肌细胞的增殖率和circRNA-Zfp609相对表达量均极显著降低（P<0.01）,MyoG和MyHC的相对表达量显著降低（P<0.05）。circRNA-Zfp609上有miR-150-5p、miR-327、miR-344g-3p和miR-615-5p 4种与肌肉分化相关的miRNAs。circRNA-Zfp609与miR-615-5p的吸附能力最强,具有靶向结合作用。circRNA-Zfp609可以作为分子海绵与调控肌肉分化相关的miR-615-5p相互作用。【结论】circRNA-Zfp609在小鼠的组织中广泛表达,在骨骼肌中表达水平最高;circRNA-Zfp609在C2C12成肌细胞增殖和分化的不同时期差异表达,circRNA-Zfp609上有4个与肌肉分化相关的miRNAs,其中miR-615-5p与circRNA-Zfp609具有靶向关系。本研究结果可为与家畜骨骼肌生长发育相关的研究提供参考。     

植物雌激素大豆黄酮对牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响

本试验采用大豆黄酮(DZ)作用于牛乳腺上皮MAC-T细胞,探讨其通过上调雌激素受体β(ERβ)表达对细胞体外增殖及细胞周期的影响,为DZ改善乳腺发育提供依据。采用不同浓度DZ(0～160.0μmol/L)处理MAC-T细胞24 h,通过检测细胞活力确定DZ作用浓度;然后采用不同浓度DZ(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)处理MAC-T细胞12、24、36和48 h,通过检测细胞活力确定DZ作用时间;再用生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照,对各处理细胞进行细胞计数,采用Western blot分析细胞内细胞周期相关蛋白、ERβ蛋白相对表达量,并用流式细胞技术分析细胞周期变化。结果表明：1)与对照组相比,2.5和5.0μmol/L DZ处理细胞均能提高MAC-T细胞活力,其中5.0μmol/L DZ处理显著提高细胞活力(P <0.05);而在浓度高于10.0μmol/L后,细胞活力均有下降,因此确定了DZ作用的低、中和高浓度分别为2.5、5.0和10.0μmol/L;而与对照组相比,处理12 h后,5.0μmol/L DZ处理使得细胞活力显著提高(P<0.05),其他...