伪狂犬病病毒基因缺失及活载体疫苗研究进展

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种以发热、奇痒、脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。该病每年给养猪业造成的损失达数十亿美元,目前对该病主要是以疫苗防制为主。随着基因工程技术的不断更新和发展,研制更加安全、有效的基因工程疫苗对该病的防治将会有重要的意义。文章对伪狂犬病基因缺失疫苗及活载体疫苗的研究进行了综述。     

狂犬病口服疫苗的研究进展

狂犬病口服疫苗的研究进展邹莹（新疆畜牧科学院情报研究所，乌鲁木齐８３００００）狂犬病至今仍是一种广泛分布于世界各地严重威胁人畜健康的传染病。据世界卫生组织估计，狂犬病在全世界８７个国家和地区的２４亿人群中流行，每年约有５万人死于狂犬病，而且还不断有新...     

狂犬病疫苗研究进展

狂犬病是感染中枢神经系统的一种人兽共患的急性接触性传染病,由狂犬病病毒(Rabies virus,RV)引起,病毒粒子聚集形成胞浆内包含体,只在神经细胞胞浆和蒲肯野氏细胞里存在.RV可分成4个血清型和2个尚待定型的病毒株.随着RV血清型变异,目前人用和动物用狂犬病疫苗毒株已不能提供针对所有种类RV的有效保护,为了对狂犬病及其研究进展有一个全面的认识,该文主要对RV病原以及狂犬病疫苗等方面的研究进展进行了综述.     

重组伪狂犬病病毒疫苗的研究进展

随着分子生物学技术的发展及对伪狂犬病病毒(PRV)研究的不断深入, 伪狂犬病病毒载体的研究已成为病毒载体研究领域的热点之一.通过基因工程技术使伪狂犬病病毒的毒力基因失活构建表达外源基因的重组质粒,再通过同源重组获得毒力减弱但仍具有良好免疫原性的重组病毒,重组病毒疫苗在动物体内的表达不仅十分安全,而且还可以一针多防,提高生产效率.文章对以伪狂犬病病毒为载体研制重组疫苗的研究进展进行了综述.     

采用腺病毒作为猪用疫苗的研究进展载体

疫苗是兽医学中最有效和最便宜的预防工具。现实的兽医领域不仅理想的疫苗很少,许多疫苗效力有限或有毒副效应,而且仍有一些严重疾病尚无有效疫苗。传统的疫苗包括灭活疫苗、弱毒疫苗和亚单位疫苗。近期已采用基因工程技     

狂犬病病毒糖蛋白单、双拷贝基因重组腺病毒穿梭载体的构建及表达

提取HEP-Flury株狂犬病病毒RNA,RT-PCR方法扩增糖蛋白G基因,并克隆入pMD18-T载体,进行测序鉴定和序列分析。之后双酶切下G基因,将其亚克隆入腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-1,经卡那霉素抗性、PCR、双酶切及测序鉴定,获得重组单G腺病毒穿梭载体pShuttle-G。应用PCR方法在G基因末端引入口蹄疫病毒2A自剪切肽序列,并克隆入T载体,同时构建含G基因的T载体,分别双酶切回收以上2片段并将他们定向亚克隆入pShuttle-IRES-hrGFP-1,经系列鉴定,成功构建由2A自剪切肽序列连接双G基因的重组腺病毒穿梭载体pShuttle-dG。转染以上2个表达质粒入Ad-293细胞,荧光显微镜观察到GFP的表达,斑点印迹试验结果显示G蛋白成功表达。     

重组伪狂犬病病毒疫苗的研究进展

随着分子生物学技术的发展,人们对伪狂犬病病毒的分子学特征研究也逐步深入,根据基因工程原理对伪狂犬病病毒的基因组进行改造,从而构建了多种含有不同外源基因的重组伪狂犬病病毒疫苗.这种疫苗不仅可以为猪的伪狂犬病提供保护,同时还可以产生针对外源保护性抗原的特异性免疫反应,具有广阔的应用前景.笔者在本文中系统地对近些年所报告的多种重组伪狂犬病病毒疫苗的安全性和免疫原性就行了综述,以期为伪狂犬病病毒新的基因工程疫苗的研制提供一定的参考.     

非节段负链RNA病毒作为疫苗载体研究进展

负链RAN病毒的反向遗传系统建立以后,非节段负链RNA病毒作为疫苗载体的研究取得了重要进展.文章从病毒载体的构建策略、插入基因在载体中的位置、插入片段的大小、数量以及外源基因的表达对载体的毒性作用进行了综述;对外源糖蛋白整合到病毒粒子上对载体的影响,通过不同的方法和途径来提高载体疫苗的免疫效果方面进行阐述.     

无病原性腺病毒载体构建的研究

以小鼠腺病毒作为无病原性“孤儿病毒”的模型,进行了构建真核细胞基因工程载体的研究。通过对小鼠腺病毒DNA的提取、酶切和克隆,将病毒DNA片段插入pBR322质粒中,从中选出重组质粒pBAD-8,进而在病毒DNA的BglⅡ单一切口处,插入Ⅰ型单纯疱疹病毒TK基因,构成新的重组质粒pBAT。将重组质粒pBAT和野生小鼠腺病毒在TK~-的3T3细胞内进行同源重组,使TK基因插入小鼠腺病毒的DNA序列中。通过选择性培养基培养及α-~(32)P标记的核酸探针检测,证明在经同源重组的小鼠腺病毒DNA中插入了TK基因,并得到了表达。将重组病毒接种小鼠,进行体内存留实验,结果表明所构建的小鼠腺病毒载体在小鼠体内至少可存活40d。     

腺病毒载体及其在口蹄疫疫苗研究中的应用

腺病毒载体具有高效传递和表达外源基因的能力,常被用作体内和体外基因转移或表达的工具.体内同源重组和体外直接连接是目前构建腺病毒重组体的两种主要方式.口蹄疫病毒基因重组腺病毒活载体疫苗多是以缺失E1和E3基因编码区的人5型腺病毒AdHu5为载体进行构建,有些载体还缺失了E4基因编码区.研究证实,已构建的口蹄疫重组腺病毒疫苗对猪、牛都有一定的免疫保护效果,在口蹄疫预防研究领域具有很好的应用前景.     

腺病毒表达载体研究进展

基因治疗和基因免疫技术已成为解决生物学领域问题的重要手段之一,多种治疗因子的设计、研发和应用,促进了更多高效转移载体的发展.腺病毒载体由于宿主范围广泛和对人体的低致病性、病毒颗粒比较稳定、基因组较少发生重排等优点,已经成为最常用的病毒载体之一.但由于细胞的靶向性和宿主的免疫反应限制了腺病毒载体的应用和发展,针对这种情况,对腺病毒载体进行了不断改进和完善,其潜在的应用价值也得到了广泛关注.文章综述了腺病毒载体的性质、研发过程及应用前景,为进一步优化和利用腺病毒表达载体提供参考.     

昆虫杆状病毒表达系统生产流感疫苗的研究进展

综述了昆虫杆状病毒表达系统生产流感疫苗的研究进展,同时分析了昆虫杆状病毒表达系统表达流感病毒样颗粒用于流感疫苗的优势和前景,以期为兽用流感病毒VLPs疫苗研发提供参考。     

腺病毒载体的研究进展与展望

随着重组技术在生物领域上的应用,病毒活载体疫苗的研制成为基因工程疫苗研制的热点,其中,腺病毒由于其具有独特的优势,成为疫苗载体应用中的不可缺少部分,本文就腺病毒载体的研究进展作一简要综述,旨在为其进一步应用提供参考依据。     

细菌载体技术研究进展

随着重组DNA 技术的发展和应用,基因工程疫苗的研究取得了快速的进展.其中,最有发展前景的研究领域之一是以细菌为活载体的疫苗,即将所需的编码病原菌特异性抗原的DNA 片段插入减毒的病原菌或者共生菌中,以递呈表达所编码的抗原,以期达到预防一种或多种疾病的作用.细菌载体疫苗是新型疫苗的重要发展方向,文章主要对卡介苗、志贺菌和乳酸杆菌等细菌载体疫苗加以介绍.     

新城疫病毒作为疫苗载体的研究进展

在综述新城疫病毒(NDV) 的分子生物学特征、致病本质、复制机理以及利用反向遗传操作技术获得NDV的感染性克隆的基础上,着重介绍了以NDV作载体,将报告基因、功能基因包括鸡传染性法氏囊病毒VP2基因及流感病毒HA基因等插入NDV基因组的不同位置构建重组新城疫病毒,并对外源基因进行成功表达的研究进展。同时对DNV作为新的疫苗载体表达外源基因的可行性及未来应用前景进行了初探。